刘朝辉
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
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- 硫酸镁对脂多糖诱导巨噬细胞表达和释放高迁移率族蛋白1的影响被引量:1
- 2012年
- 目的探讨硫酸镁对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7表达和释放高迁移率族蛋白1(HMGB1)的抑制作用。方法传代培养的小鼠RAW264.7细胞分5组接种于6孔板,每组为3孔。C组为仅加RPMI 1640培养液的对照组,LPS组为在RPMI 1640培养液的基础上加500ng/mL LPS的诱导组,M1组为在LPS组基础上加1mmol/L硫酸镁的干预组,M5组为在LPS组的基础上加5mmol/L硫酸镁的干预组,M10组为在LPS组基础上加10mmol/L硫酸镁的干预组。孵育24h后,收集细胞及细胞培养上清液,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测各组细胞内HMGB1mRNA表达水平和细胞培养上清液中HMGB1蛋白含量的变化。结果 M1、M5、M10组的RAW264.7细胞活性分别为1.35±0.10、1.34±0.11、1.31±0.08,差异均无统计学意义(P值均>0.05)。LPS、M1、M5、M10组细胞上清液中HMGB1蛋白的含量分别为(82.80±9.15)、(81.26±8.47)、(56.69±6.21)、(50.71±6.62)ng/mL,均显著高于C组(C组为0,P值均<0.05);M5、M10组细胞上清液中HMGB1蛋白的含量均显著低于LPS及M1组(P值分别<0.05或0.01)。LPS、M1、M5、M10组细胞中HMGB1 mRNA的相对表达量分别为1.435±0.161、1.416±0.124、0.873±0.093、0.774±0.067,均显著高于C组的0.195±0.020(P值均<0.05);M5、M10组细胞中HMGB1mRNA的相对表达量均显著低于LPS及M1组(P值分别<0.05或0.01)。结论硫酸镁抑制LPS诱导的RAW264.7细胞表达和释放HMGB1,通过抑制与脓毒症致死性密切相关的关键炎性因子,可能对脓毒症患者具有一定保护作用。
- 刘朝辉张俊杰黄小静黄丽娜李士通汪正平
- 关键词:硫酸镁脂多糖RAW264.7细胞
- 低镁对脂多糖诱导巨噬细胞表达和释放高迁移率族蛋白1的影响
- 2012年
- 目的探讨低镁对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7表达和释放高迁移率族蛋白1(HMGB1)的促进作用。方法传代培养的小鼠RAW264.7细胞分为4组,接种于6孔板,每组为3孔,4组分别为含1mmol/L硫酸镁的RPMI1640培养基组(C1组)、含0.1mmol/L硫酸镁的RPMI1640培养基组(C0.1组)、含1mmol/L硫酸镁的RPMI1640培养基加500ng/mLLPS的刺激组(L1组)和含0.1mmol/L硫酸镁的RPMI1640培养基加500ng/mLLPS的刺激组(L0.1组)。孵育24h后,收集细胞及细胞培养上清液,用反转录-聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验分别检测各组细胞内HMGB1mRNA表达水平和细胞培养上清液中HMGB1蛋白含量的变化。结果 C0.1组与C1组间HMGB1mRNA及蛋白表达的差异均无统计学意义(P值均>0.05),L1组和L0.1组HMGB1mRNA及蛋白的表达均显著高于C0.1组和C1组(P值均<0.05),L0.1组又显著高于L1组(P值均<0.05)。结论低镁促进LPS诱导的RAW264.7细胞表达和释放HMGB1,可能对脓毒症患者的预后有一定损害作用。
- 刘朝辉张俊杰黄小静江继宏李士通汪正平
- 关键词:低镁脂多糖RAW264.7细胞