公共文化服务平台

共 9 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

dd-PCR法研究中草药促神经生长过程中的基因差异表达被引量：6: 1999年; 目的 :为探讨中药促神经生长的分子机理提供实验依据。方法 :采用 dd-PCR方法 ,从体外培养大鼠背根神经节细胞加中药组和不加中药组中获得两者的差异表达片段 ,并克隆测序分析。结果 :获得 7个差异条带 ,其中 2个条带的 c DNA序列分别与酪氨酸磷酸酶受体 ( PTPR) m RNA、促生长素抑制素受体 ( SSTR) m RNA的序列部分同源。结论 :在中药促神经生长过程中。; 刘梅顾晓松刘炎崔学芝邱一华张沛云; 关键词：神经生长 DD-PCR 基因表达

原核表达融合蛋白的亲和层析法纯化被引量：6: 2001年; 目的 :以T7·TagAffinityPurificationKit纯化原核表达Tropic 180 8基因编码的融合蛋白 ,并进行免疫印迹检测。方法 :以 0 .4mmol/LIPTG诱导含pET -2 1a -180 8重组质粒的BL2 1(DE3)大肠杆菌 ,T7·TagAffinityPurifica tionKit纯化菌体上清液 ,SDS -PAGE分析 ,将SDS -PAGE蛋白区带转移至NC膜进行免疫印迹检测。结果 :外源性Tropic 180 8基因在大肠杆菌中表达的融合蛋白可经T7·TagAffinityPurificationKit进一步纯化 ,纯化后的蛋白为单一条带 ,分子量约为 32 .0kDa ,其免疫印迹反应结果提示该蛋白为Tropic 180 8基因编码的融合蛋白。结论 :在大肠杆菌中表达的融合蛋白可以免疫亲和法进行纯化和鉴定。; 姚登兵崔学芝王志刚刘炎顾晓松; 关键词：原核表达融合蛋白免疫印迹亲和层析法基因编码

CNTF基因在大鼠脊髓中的表达及生后发育的变化被引量：4: 2001年; 目的　观察CNTF基因在大鼠脊髓中的表达以及生后发育过程中的变化。　方法　以地高辛标记(dig )CNTFcDNA为探针 ,采用原位杂交法 ,观察CNTFmRNA在大鼠脊髓中的分布 ;采用RT PCR法 ,半定量分析大鼠生后发育过程中 ,脊髓CNTFmRNA表达水平的变化。　结果　CNTFmRNA原位杂交阳性信号存在于正常大鼠脊髓白质的腹索、外侧索周边的部分胶质细胞中 ;灰质中未能发现阳性杂交信号。RT PCR结果显示 ,大鼠生后 1d脊髓组织中即可见CNTFmRNA表达 ,但表达量较低 ;出生 15d表达量迅速增加 ;30d时最高 ;6 0d时的表达量有下降的趋势。　结论　大鼠脊髓白质的部分胶质细胞可表达CNTFmRNA ;大鼠出生后 1dCNTFmRNA即有表达。; 顾晓松丁斐刘炎沈爱国姚登兵; 关键词：CNTF MRNA 脊髓发育

大鼠损伤性周围神经组织cDNA文库的构建被引量：7: 1998年; 为克隆神经损伤及再生过程中出现的诱向因子和营养因子基因，以ＳＤ大鼠手术损伤的坐骨神经组织为材料，提取ｍＲＮＡ，逆转录合成ｃＤＮＡ，以λｇｔ１１为载体，构建了一个ｃＤＮＡ文库。经测定，该文库的容量大于１．５×１０６，重组百分率为９６．７％，插入片段长度分布在０．５～８＼＾０ｋｂ之间。扩增后的滴度达１．４／１０１２ｐｆｕ／ｍｌ。以该文库ＤＮＡ为模板，运用ＰＣＲ方法扩增出３６０ｂｐ的ＮＧＦ和６１６ｂｐ的ＣＮＴＦ阅读框架片段。以地高辛标记的ＣＮＴＦ探针，从文库中筛选出ＣＮＴＦ克隆。经ＤＮＡ测序证实确为ＮＧＦ和ＣＮＴＦｃＤＮＡ全序列。根据已获得的６５ｋＤ化学诱向因子抗体，应用ＡＢＣ法筛选文库，获得了阳性克隆，其插入片段为１．１ｋｂ左右。经Ｇｅｎｂａｎｋ查询证实为一新序列。该文库的建立为筛选和分离目的基因，从基因水平深入研究神经再生。; 谭湘陵顾晓松印其友刘炎刘梅曹铮; 关键词：周围神经 CDNA文库

中药“神经再生素”促神经生长过程中基因差异性表达的初步研究被引量：27: 2001年; 为了探索中药“神经再生素”促神经生长过程中基因水平的变化。本实验采用 dd-PCR方法 ,从体外培养背根神经节细胞加药组和不加药组中获得两者的差异表达片段 ,并经反杂交筛选、克隆测序、DNA序列检索分析、Northern验证。结果表明 ,差异显示共获得 8个差异条带 ,一个为下调基因 ,其余为上调基因 ,其中 2个 c DNA序列与 RRAJ5 16 1基因 (增殖相关基因 )、AF196 3 15基因 (锌指样蛋白 DDP2 ) 10 0 %同源 ,2个 c DNA序列与 AK0 0 175 7基因、STA5 SRR基因 (t RNA合成酶 )部分同源。结论是中药“神经再生素”在促神经生长过程中 ,对神经元基因的选择性表达起着重要的调控作用。; 刘梅顾晓松刘炎崔学芝彭聿平张沛云; 关键词：神经再生素神经生长 DD-PCR 基因表达中药药理

Tropic1808基因在大肠杆菌中的表达被引量：2: 2000年; 目的 :在大肠杆菌宿主系统中表达 Tropic180 8基因编码的蛋白。方法 :用 PCR方法从质粒中扩增出 Tropic180 8c DNA开放阅读框架片段 (82 8bp) ,并重组入表达载体 p ET-2 1a中 ,转化大肠杆菌 BL2 1(DE3) ,用 IPTG诱导 Tropic180 8融合蛋白的表达 ,经 SDS-PAGE,表达蛋白条带转至 PVDF膜进行氨基酸序列分析。结果 :构建了 p ET-2 1a-180 8重组质粒 ,外源性 Tropic180 8基因可在大肠杆菌中获得表达 ,目的蛋白占细菌总蛋白的 14 %以上 ,表达蛋白的 N端氨基酸序列与基因编码序列一致。结论 :Trop-ic180 8基因可在大肠杆菌中获得表达 ,这为进一步纯化该基因表达蛋白。; 崔学芝刘梅刘炎谭湘陵顾晓松; 关键词：克隆大肠杆菌

睫状神经节神经营养因子基因克隆被引量：1: 1997年; 在构建了再生性外周神经组织cDNA文库的基础上，人工合成了睫状神经节神经营养因子（CNTF）阅读框架的引物，用PCR地高辛标记法标记了CNTF探针．筛选CDNA文库，得到了CNTF的阳性克隆，运用PCR法证实了克隆中存在着全长CNTF阅读框架，Sanger法测定了DNA序列，证实序列无误。CNTF基因克隆为从基因水平上研究CNTF的分子生物学作用机制打下基础．; 谭湘陵曹铮刘炎刘梅顾晓松; 关键词：神经营养因子基因克隆

全选清除导出

共1页<1>

刘炎