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体外诱导大鼠脂肪间充质干细胞向肝细胞方向分化的研究被引量：5: 2007年; 目的:探讨大鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs)是否可以在体外被诱导向肝细胞方向分化。方法:从大鼠脂肪组织中分离出干细胞,行体外扩增、传代;用免疫荧光染色法检测其表面标志,用成纤维细胞生长因子(FGF-4)和肝细胞生长因子(HGF)诱导其向肝细胞分化;倒置显微镜观察细胞形态变化,诱导后14天和21天分别用免疫荧光检测法检测肝细胞标志物白蛋白的表达,每次换液时留取培养上清用尿素氮测试盒检测尿素氮含量。结果:免疫荧光检测显示从脂肪组织所获取的细胞表面标志CD29阳性,而CD31和CD145均为阴性;诱导14天后可逐渐观察到肝细胞样形态改变;免疫荧光检测到白蛋白表达;尿素氮检测显示诱导组尿素氮含量随时间延长而逐渐升高。结论:从大鼠脂肪组织中获取的脂肪间充质干细胞能在体外被诱导分化成形态、表型及功能与肝细胞相似的细胞。; 刘美媛王旭霞冯国华张晓兰王伟闻勤生; 关键词：间充质干细胞肝细胞细胞分化

大鼠脂肪间充质干细胞在体内向肝细胞样细胞方向的转化被引量：4: 2008年; 目的:探讨大鼠脂肪间充质干细胞(Adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)在体内向肝细胞样细胞转化的可能性。方法:将从4周龄雄性SD大鼠腹股沟分离得到的原代脂肪间充质干细胞传至第3代,用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)在体外标记后,通过门静脉注射的方法移植入由四氯化碳造成慢性肝损伤的雄鼠体内。移植术后2周处死受体雄鼠,取其肝组织,通过免疫荧光双染色的方法观察BrdU标记细胞的存在和白蛋白的表达,以确定所注入的脂肪间充质干细胞在受鼠体内向肝细胞样细胞转化的情况,结果:在经门静脉注射法进行移植的实验组SD大鼠的肝组织内检测到同时表达BrdU和白蛋白的细胞。讨论:本研究证明了脂肪间充质干细胞在体内有向肝细胞样细胞转化的可能.; 冯国华王旭霞刘美媛张晓兰闻勤生; 关键词：间充质干细胞脂肪组织肝细胞

大鼠脂肪间充质干细胞的鉴定及肝内移植的研究: 2008年; 目的:从脂肪组织中获取间充质干细胞(ADMSCs)并验证其多向分化潜能,探讨ADMSCs在肝再生中的作用。方法:获取大鼠脂肪组织,用胶原酶消化法获取干细胞,并进行体外扩增、传代,取第3代细胞分别用不同诱导培养液进行成骨、成脂诱导,诱导后通过细胞形态学和特殊染色观察诱导效果。用PKH26标记细胞,制作部分肝切除模型,将标记的自体ADMSCs经门静脉植入体内,2周后切下取肝脏制成冰冻切片,荧光显微镜观察植入细胞在肝脏的定位,免疫荧光染色观察其白蛋白的表达。结果:从脂肪组织中分离出的细胞能在体外大量扩增,能被诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞,ADMSCs移植2周后,可见PKH26标记细胞散在分布于肝内,免疫荧光染色显示标记细胞白蛋白染色阳性。结论:大鼠脂肪组织中可以获取具有多向分化潜能的间充质干细胞,该细胞在肝再生环境中能向肝细胞分化,参与肝再生。; 闻勤生王恽立赵永锋赵保民刘美媛冯国华张晓兰; 关键词：脂肪间充质干细胞多向分化肝再生干细胞移植

大鼠脂肪间充质干细胞在部分肝切除模型中向肝细胞分化的研究: 2008年; 目的探讨脂肪间充质干细胞(ADMSCs)在部分肝切除模型中向肝细胞的分化。方法从大鼠脂肪组织中分离出干细胞,并进行体外扩增、传代,取第2代ADMSCs用PKH26标记,制作部分肝切除模型,将标记细胞经门静脉自体植入体内。2周后切下肝脏制成冰冻切片,荧光显微镜下观察标记细胞在肝脏的定位,进行免疫荧光染色检测标记细胞白蛋白的表达。结果从脂肪组织中分离出的ADMSCs能在体外大量扩增,PKH26标记后细胞在荧光显微镜下发红色荧光,细胞标记率约95%;荧光显微镜下可见肝脏冰冻切片中散在分布红色标记细胞,免疫荧光染色显示大多数标记细胞白蛋白染色阳性。结论大鼠脂肪间充质干细胞在肝再生环境中能向肝细胞分化,有可能在肝部分切除后参与肝再生。; 刘美媛王旭霞张晓兰冯国华胡运生闻勤生; 关键词：脂肪间充质干细胞肝再生干细胞移植分化

不同途径移植脂肪间充质干细胞在肝内定居数量的比较被引量：3: 2008年; 目的:探讨大鼠脂肪间充质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stemcells,ADMSCs),在同种异体不同途径移植后的肝内定居情况。方法:用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记从大鼠脂肪中分离并培养至的第三代脂肪间充质干细胞,分别从尾静脉和门静脉注入同种异体、由CCl4造成肝损伤的大鼠体内。移植2 w后分别取肝组织,通过激光共聚焦显微镜观察两种移植途径对大鼠脂肪间充质干细胞在肝内定居的影响。结果:在两组大鼠的中央静脉及肝汇管区均可见BrdU标记的细胞;BrdU标记阳性的细胞在门静脉移植组600倍镜下每张切片平均为127.5个,在尾静脉移植组平均120.7个(P>0.05)。结论:脂肪间充质干细胞在肝脏定居的细胞数量与移植途径无关。; 冯国华王旭霞赵署光刘美媛张晓兰闻勤生; 关键词：间充质干细胞脂肪组织静脉

白萝卜提取物促胃动力作用机制被引量：1: 2008年; 目的探讨白萝卜提取物(Raphanus sativus L extract,Ecr)促胃肠动力作用机制。方法20只SD大鼠随机分为A(Ecr)组、B(0·9%氯化钠对照)组,分别灌服Ecr和等体积0·9%氯化钠,1h后,免疫组织化学方法和放免法分别观察胃电起搏区P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)表达的变化。结果SP免疫阳性神经及产物的表达明显增加(P<0·05);CGRP免疫阳性神经及产物的表达明显减少(P<0·05)。结论白萝卜提取物的促胃肠动力作用可能与局部及血浆中SP、CGRP量的变化有密切关系。; 王伟王景杰颜云龙夏德雨刘美媛张晓兰黄裕新; 关键词：白萝卜提取物 P物质降钙素基因相关肽免疫组织化学方法

网络抗氧化剂对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的防治作用被引量：3: 2008年; 目的观察网络抗氧化剂对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的预防与治疗效果。方法雄性SD大鼠40只随机分为4组:正常对照组、模型组、网络抗氧化剂预防组、网络抗氧化剂治疗组(各10只),空白对照组喂以正常饲料,其余3组均喂以高脂饮食。网络抗氧化剂预防组在高脂饮食同时给予维生素E(100mg/kg)、硫辛酸(40mg/kg)、辅酶Q10(100mg/kg)、维生素C(100mg/kg)、还原型谷胱甘肽(100mg/kg)联合灌胃治疗,每日1次。网络抗氧化剂治疗组在高脂饮食12周(造模成功)后开始给予上述网络抗氧化剂联合灌胃治疗。16周时处死各组大鼠,观察肝功能和血脂变化,检测血清及肝组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果网络抗氧化剂预防组及治疗组体重、肝湿重、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、MDA、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及肝组织MDA均显著低于模型组,血清及肝组织SOD活性显著高于模型组。网络抗氧化剂预防组体重、肝湿重、ALT、TG和血清MDA与网络抗氧化剂治疗组比较差异无统计学意义,血清AST、TC和肝组织MDA均显著低于治疗组,血清及肝组织SOD活性显著高于治疗组。结论网络抗氧化剂对大鼠非酒精性脂肪性肝炎有较好的防治作用。; 张晓兰张志钢王恽立王旭霞刘美媛冯国华赵保民赵曙光王伟闻勤生; 关键词：非酒精性脂肪性肝炎抗氧化剂

大鼠脂肪间充质干细胞对四氯化碳所致慢性肝损伤的治疗作用被引量：1: 2009年; 目的探讨大鼠脂肪间充质干细胞(ad ipose tissue-derived m esenchym al stem cells,ADMSCs)对四氯化碳所致慢性肝损伤治疗的研究。方法将从4周龄雄性SD大鼠腹股沟分离得到的原代脂肪间充质干细胞传至第3代,用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(B r-dU)在体外标记后,通过门静脉注射的方法移植入由四氯化碳造成慢性肝损伤的雄鼠体内。移植术后2周处死受体雄鼠,取其肝组织,通过免疫荧光双染色的方法观察B rdU标记细胞的存在和白蛋白的表达,行HE染色观察肝组织病理学改变,检测血清中ALT、AST及ALB,以确定所注入的脂肪间充质干细胞是否向肝细胞样细胞方向转化及对四氯化碳所致慢性肝损伤大鼠的治疗情况。结果在经门静脉移植的实验组SD大鼠的肝组织内检测到同时表达B rdU和白蛋白的细胞,且其病理组织学及肝功能均较模型组有所好转。结论本研究证实了脂肪间充质干细胞对四氯化碳所致慢性肝损伤大鼠有一定的治疗作用。; 王旭霞冯国华赵曙光刘美媛刘震雄闻勤生; 关键词：间充质干细胞脂肪组织肝细胞

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