卢潍媛
- 作品数：27 被引量：97H指数：7
- 供职机构：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所更多>>
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- Th1和Th2型细胞因子对小鼠感染血吸虫的免疫保护性研究
- 2014年
- 目的 探讨Th1和Th2类细胞因子对小鼠感染血吸虫的免疫保护作用. 方法 C57BL/6小鼠48只,抽签法随机均分为4组,白细胞介素（interleukin,IL）-4组,给予IL-4 （200 ng）; IL-12组,给予IL-12 （200 ng）;胸腺基质淋巴生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）组,给予TSLP（200 ng）;生理盐水组,给予生理盐水（200μl）.4组均为腹腔注射,每周3次,持续注射8周.给药后2周,各组小鼠经皮攻击感染日本血吸虫尾蚴（40±2）条/鼠,感染后第3、6周剖杀,计算各组小鼠虫荷数、肝脏卵荷数.芯片检测各组小鼠感染前和感染后不同时间点血清中IL-5、IL-10、γ-干扰素（interferon-γ,IFN-γ）及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的动态变化.观察小鼠肝、脾的病理变化. 结果 细胞因子注射的第8周,IL-4组的Th2类细因子IL-5、IL-10依次为161.97、65.47 μg/ml; TSLP组的IL-5、IL-10依次为132.72、77.18 μg/ml; IL-12组的IL-5、IL-10依次为87.15、12.29 μg/ml;生理盐水组的IL-5、IL-10依次为188.92、167.52 μg/ml.IL-4和TSLP组Th2类细胞因子水平均高于IL-12组,但低于生理盐水组.IL-12组IFN-γ、TNF-α依次为165.7、23.64 μg/ml,水平高于其它各组.感染后3周IL-4、IL-12、TSLP、生理盐水组虫荷数依次为（9.50±4.51）、（12.83±2.32）、（6.75±2.87）、（9.80±3.03）条;感染后6周上述各组虫荷数依次为（18.83±5.91）、（24.80±9.42）、（21.67±3.67）、（17.67±6.74）条,每克肝组织虫卵数依次为（58 286.98±25 351.60）、（80 460.18±35 542.66）、（54 579.56±16 399.21）、（41 094.92±25 598.27）.与生理盐水组相比,各实验组虫荷数与每克肝组织虫卵数差异均无统计学意义.感染后第3周,IL-4、IL-12、TSLP、生理盐水组脾指数依次为（0.010±0.002）、（0.011±0.002）、（0.009±0.001）、（0.007 ±0.001）,各实验组与生理盐水组相比,差异均有统计学意义（t=3.158、5.076、6.204,P＜0.05）.感染后第6�
- 胡媛徐馀信卢潍媛权红曹建平
- 关键词：日本血吸虫TH1TH2细胞因子
- 安氏隐孢子虫热休克蛋白编码基因的克隆、表达和分析被引量：9
- 2007年
- 目的克隆、表达和分析安氏隐孢子虫Mr70000热休克蛋白(CaHSP70)的部分编码基因。方法依据公布的CaHSP70基因序列设计引物,以江苏徐州安氏隐孢子虫(XZ-BOV)总RNA为模板,反转录PCR(RT-PCR)扩增目的编码基因。PCR产物经TA克隆后,亚克隆入pET28a原核表达载体,构建重组质粒pET28a-CaHSP70,转化感受态大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并获得纯化的重组蛋白(简称为rCaHSP70)。用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹(Western blotting)和ELISA对该重组蛋白进行分析和鉴定。采用相关生物信息学软件对序列进行分析。结果根据克隆的目的基因序列推导的氨基酸序列与GenBank登录的CaHSP70一致。SDS-PAGE和Western blotting分析显示,重组蛋白(rCaHSP70)Mr约为43000(含6个组氨酸),以包涵体的形式存在,可被辣根过氧化物酶标记的抗组氨酸抗体、安氏隐孢子虫感染的小鼠血清、微小隐孢子虫感染的儿童血清和rCaHSP70免疫小鼠血清识别。rCaHSP70存在多个功能位点和潜在的抗原决定簇。种系发生分析表明XZ-BOV与安氏隐孢子虫进化关系最近。ELISA检测结果表明,rCaHSP70免疫的C57BL/6小鼠与BALB/c小鼠血清特异性抗体滴度均显著高于免疫前。结论XZ-BOVHSP70部分编码基因的克隆获得成功,研究获得的重组蛋白具有一定的免疫原性和免疫反应性。
- 刘海鹏曹建平李小红卢潍媛沈玉娟徐馀信臧炜刘述先
- 关键词：安氏隐孢子虫热休克蛋白重组抗原表位分析
- 隐孢子虫牛源分离株的分离和鉴定被引量：21
- 2007年
- 目的分离和鉴定采自徐州自然感染奶牛粪便中的隐孢子虫卵囊。方法在徐州某奶牛场采集经改良抗酸染色镜检确认为隐孢子虫感染的奶牛粪便,用不连续Sheather’s蔗糖密度梯度离心法纯化卵囊。采用Chelex-100方法提取卵囊基因组DNA,设计引物扩增小亚基核糖体RNA(SSU rRNA)基因和卵囊囊壁蛋白(COWP)基因,分别克隆到pGEM-T和pGEM-T Easy载体,测定核苷酸序列,运用BLAST和MEGA软件进行序列同源性和种系发生分析。结果分离的隐孢子虫卵囊个体大小为(7．4±0．32)μm×(5．4±0．21)μm,长宽比为1．3±0．07(n=20)。徐州牛源隐孢子虫与Gen- Bank公布的安氏隐孢子虫比较,SSU rRNA和COWP基因序列同源性分别为100％和99％。种系发生分析显示该株隐孢子虫与安氏隐孢子虫处于同一分支。结论由徐州自然感染奶牛粪便中分离获得的隐孢子虫是安氏隐孢子虫。
- 刘海鹏曹建平沈玉娟陈有贵李小红卢潍媛徐馀信刘宜升刘述先周晓农汤林华
- 关键词：安氏隐孢子虫
- 日本血吸虫中国大陆株酪氨酸激酶TK4保守区基因及其克隆表达方法和应用
- 本发明涉及日本血吸虫(中国大陆株)酪氨酸激酶TK4保守区(SjcTK4)基因的序列及其克隆表达方法和应用。本发明公开的SjcTK4基因具有序列1所示的核苷酸序列及编码相应的氨基酸序列。本发明还公开了SjcTK4基因在大肠...
- 曹建平臧炜徐馀信沈玉娟卢潍媛刘述先汤林华
- 文献传递
- 日本血吸虫中国大陆株酪氨酸激酶TK4保守区基因及其克隆表达方法和应用
- 本发明涉及日本血吸虫(中国大陆株)酪氨酸激酶TK4保守区(SjcTK4)基因的序列及其克隆表达方法和应用。本发明公开的SjcTK4基因具有序列1所示的核苷酸序列及编码相应的氨基酸序列。本发明还公开了SjcTK4基因在大肠...
- 曹建平臧炜徐馀信沈玉娟卢潍媛刘述先汤林华
- 文献传递
- 日本血吸虫中国大陆株硫氧还蛋白基因及其克隆表达方法和应用
- 本发明涉及日本血吸虫(中国大陆株)硫氧还蛋白(SjcTrx)基因的序列及其克隆表达方法和应用。本发明公开的SjcTrx基因具有序列1所示的核苷酸序列及编码相应的氨基酸序列。本发明还公开了SjcTrx基因在大肠杆菌中的表达...
- 曹建平韩海勃刘述先徐馀信汤林华沈玉娟李小红卢潍媛
- 文献传递
- 诊断细粒棘球蚴病的重组抗原蛋白、其制备方法和用途
- 本发明公开了一种诊断细粒棘球蚴病的重组抗原蛋白(其氨基酸序列如SEQID NO：1所示)。此外，本发明还公开了上述重组抗原蛋白的制备方法，包括采用RT-PCR扩增EgEPC1基因，将其克隆到pGEM-T载体中，再将其与表...
- 曹建平蔡辉霞沈玉娟韩秀敏胡媛王虎卢潍媛徐馀信官亚宜
- 重度感染蛇舌状虫病1例被引量：2
- 2006年
- 蛇舌状虫病（armilliferiosis）是由蛇舌状虫感染所引起的一类舌形虫病（pentamiasis），是一种少见的动物源性人畜共患寄生虫病。我院近日收治1例重度蛇舌状虫感染患儿，报告如下。
- 杨智宏王晓红俞蕙陈莲常正山曹建平卢潍媛张永年
- 关键词：重度感染舌形人畜共患寄生虫病动物源性
- 环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫的研究被引量：12
- 2009年
- 目的用环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫。方法提取牛粪中隐孢子虫卵囊DNA。根据隐孢子虫18S rRNA序列及环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）技术的原理，设计4条隐孢子虫特异引物，利用LAMP检测牛粪中隐孢子虫卵囊DNA和蓝氏贾第鞭毛虫DNA，以正常牛粪DNA为阴性对照。LAMP产物经SYBR Green I显色及电泳后观察结果，绿色判为阳性，棕色判为阴性，对LAMP产物进行电泳分析，观察其特征条带的情况。结果隐孢子虫卵囊DNA检测管经显色后呈绿色，阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA呈棕色。隐孢子虫LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带，阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA无扩增产物。结论LAMP方法敏感、特异、简便，可用于检测牛粪中的隐孢子虫。
- 袁忠英沈玉娟曹建平周何军卢潍媛陈勤倪奕昌汤林华
- 关键词：RRNA
- 日本血吸虫HGPRT重组抗原与不同佐剂联合应用对小鼠免疫保护作用的研究被引量：1
- 2010年
- 目的:观察日本血吸虫(大陆株)次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine-guanine phosphoribosyl-transferase,HGPRT)重组抗原(reSjc HGPRT)与ISA206或弗氏佐剂联合免疫对小鼠诱导抗日本血吸虫感染的保护作用。方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为5组:reSjc HGPRT加ISA206佐剂免疫组、reSjc HGPRT加弗氏佐剂组、ISA206佐剂对照组、弗氏佐剂对照组和感染对照组。20μg重组抗原和ISA206或弗氏佐剂乳化后小鼠项背部多点皮下注射,共免疫3次,每次间隔2周。佐剂对照组小鼠仅注射ISA206或弗氏佐剂和生理盐水,感染对照组不注射任何重组抗原或生理盐水。于末次免疫后3周,每只小鼠经腹部皮肤感染(30±1)条日本血吸虫尾蚴,6周后剖杀小鼠,门脉灌注收集成虫,计数成虫数、雌雄合抱数和小鼠肝组织虫卵数。在免疫前、攻击感染前和小鼠剖杀前分别采血并分离血清,用ELISA检测血清中特异性IgG抗体。结果:重组抗原加ISA206佐剂或弗氏佐剂免疫组均诱导小鼠产生特异性IgG抗体应答,与感染对照组和弗氏佐剂对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);诱导小鼠产生的减虫率、减雌雄合抱率和肝组织减卵率分别为53.7%、59.3%、44.9%和43.3%、44.1%、33.0%,与感染对照组和2种佐剂对照组相比均有统计学意义(P<0.05)。结论:reSjcHGPRT与ISA206或弗氏佐剂联合免疫,可诱导小鼠产生抗血吸虫感染保护作用。
- 胡媛沈玉娟曹建平徐馀信卢潍媛周何军张璟李小红权红刘述先
- 关键词：日本血吸虫佐剂免疫保护性
