危艳武
- 作品数：210 被引量：386H指数：12
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株的培育及动物感染试验
- 从临床病例分离到一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株,经细胞传代和蚀斑克隆获得一株增殖性能稳定的毒株,命名为PRRSV-HBR。为了检测该毒株细胞传代过程中的毒力变化,用PRRSB-HBR株第125代培...
- 危艳武刘长明范培虎吴洪丽温士刚陆月华
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异毒株
- 文献传递
- 两株PCV2a-Cap蛋白和两株PCV2b-Cap蛋白免疫保护作用的比较性研究
- 引言 猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原.PCV2 Cap蛋白是主要免疫原性蛋白，是研制PCV2基因工程疫苗的理想靶抗原.PCV2分为多种基因型：包括PCV2a、PCV2b和P...
- 黄立平刘长明危艳武王一平刘丹陈冬杰孙建慧杜文娟夏得利吴洪丽
- 表达V5表位的重组猪圆环病毒2型毒株及其生物学特性鉴定
- 为了探讨猪圆环病毒2型(PCV2)作为表达外源表位的可行性，本研究构建了以PCV2基因组为骨架。在ORF2编码Cap蛋白的C末端插入了源自副流感病毒5型的一个含14氨基酸序列的V5表位标签，用构建感染性分子克隆重组质粒转...
- 黄立平陆月华危艳武郭龙军吴洪丽张飞雁付玉洁刘长明
- 关键词：猪圆环病毒2型表位生物学特性
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型Rep/Rep'和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性试验被引量：6
- 2013年
- 猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1基因编码的Rep/Rep'蛋白与病毒复制酶相关,ORF2编码的Cap蛋白为病毒核衣壳,是病毒保护性抗原。为比较这3种蛋白作为亚单位疫苗的免疫保护性,本研究以重组杆状病毒表达的PCV2-rRep、-rRep'和-rCap蛋白制备亚单位疫苗及PCV2灭活苗,分组免疫BALB/c鼠进行攻毒,以评价疫苗的免疫保护力。对PCV2-rRep和-rRep'亚单位疫苗免疫鼠血清ELISA抗体检测表明,于免疫后第14 d抗体全部转阳,第35 d抗体效价分别达到1∶42 667和1∶51 200。PCV2-rCap亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫组于第21 d抗体转阳,第35 d抗体效价分别达1∶2 133和1∶333。攻毒试验表明,PCV2-rCap亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫鼠获得完全保护;而PCV2-rRep和-rRep'蛋白亚单位疫苗免疫组无保护作用。血清中和试验表明,PCV2-rCap蛋白亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫鼠血清中和抗体效价达1∶1 600和1∶800;而PCV2-rRep和-rRep'蛋白亚单位疫苗免疫鼠血清无中和病毒能力。该研究表明,PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗具有良好的免疫保护力,可以与PCV2自然感染猪产生的抗Rep蛋白抗体相鉴别,具有良好的开发前景。
- 刘丹王一平吴洪丽危艳武刘建波李胜斌魏萍刘长明
- 关键词：猪圆环病毒2型REP亚单位疫苗免疫保护性
- 猪圆环病毒2型分子标记毒株的构建及生物学特性研究
- 以临床分离的猪圆环病毒2型(PCV2)为材料,利用PCR法扩增病毒基因组,将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆．通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入Sall制性内切酶位点作为遗传标记,经重组质粒转染...
- 刘长明危艳武张超范陆月华孔宪刚
- 关键词：猪圆环病毒2型生物学特性
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型病毒样颗粒的制备及其免疫原性研究被引量：4
- 2021年
- 利用真核细胞表达系统制备了猪圆环病毒2型(PCV2)重组Cap蛋白,旨在探索病毒样颗粒(VLPs)的形成及其免疫原性。以pCAGGS为表达载体构建了重组质粒pCAGGS-Cap-Flag,瞬时转染293T细胞,利用Flag标签对表达的Cap蛋白进行纯化。通过电镜观察重组Cap蛋白形成的VLPs形态表明,纯化的重组Cap蛋白以VLPs形式存在,其直径约17 nm,与自然PCV2病毒粒子一致。SDS-PAGE和Western-blot鉴定表明,重组Cap蛋白为28.7 ku,分子质量符合预期,它与PCV2特异性单抗具有良好的免疫活性反应。捕获ELISA检测显示,重组Cap蛋白所组装的VLPs与纯化的自然PCV2具有相似的抗原活性。用制备的VLPs与经典的PCV2灭活疫苗分别免疫小鼠,这两种疫苗均能诱导良好的PCV2抗体应答反应,VLPs免疫组小鼠的抗体效价最高可达1∶12800,是PCV2灭活疫苗免疫组抗体效价的2倍。采用PCR检测免疫攻毒后小鼠肺组织中PCV2核酸,结果显示,VLPs免疫组和PCV2灭活疫苗免疫组均未检测到PCV2核酸,判定100%保护。本研究通过真核细胞表达系统制备的PCV2 VLPs具有与自然病毒粒子相似的形态结构,免疫小鼠可产生良好的免疫反应,可用于新型PCV2疫苗的研制。
- 边海桥黄立平危艳武夏德利朱红振吴洪丽于冲刘建行冯力刘长明
- 关键词：猪圆环病毒2型病毒样颗粒免疫原性
- 猪圆环病毒2型灭活疫苗的研制
- 猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的重要病原,以进行性消瘦、咳嗽、呼吸困难、腹泻、皮肤苍白、淋巴结肿大、肾脏灰白水肿为主要特征,给养猪业造成了巨大的经济损失。此外,猪皮炎与肾炎综合征(P...
- 刘长明危艳武
- 关键词：猪圆环病毒灭活疫苗
- 文献传递
- 猪源和犬源ELF4蛋白的亚细胞定位比较研究
- 2024年
- 本研究旨在对比分析猪E74样因子4(sELF4)和犬E74样因子4(cELF4)的亚细胞定位,为深入开展二者功能研究提供依据。利用PCR截短扩增sELF4和cELF4,分别克隆至真核表达载体pEGFP-C1中,构建17个sELF4重组真核表达载体和13个cELF4重组真核表达质粒,转染HeLa细胞、Hoechst33342染色,荧光倒置显微镜观察亚细胞定位,运用生物信息学软件分析其编码氨基酸序列特征。结果表明,sELF4和cELF4蛋白全长均定位在细胞核中,sELF4 196~291 aa(586~873 bp)之间有可能存在两个细胞质核定位信号肽,cELF4的核定位信号肽分布在203~291 aa(607~873 bp),cELF4 292~663 aa(874~1 992 bp)、sELF4 292~662 aa(874~1 989 bp)在细胞中发生聚集现象。cELF4与sELF4氨基酸序列在第169~303位氨基酸之间均高度保守,其他区段均存在不同程度的差异。综上,sELF4蛋白全长和cELF4蛋白全长均定位在细胞核中,截短表达的羧基端功能区有聚集现象,二者的核定位信号肽分布有一定差异。
- 高翠翠喻娇唐青海侯鑫军刘婷全飞杨刘建行赵婷芳赵铖朱钰英危艳武
- 关键词：真核表达亚细胞定位
- 高致病性PRRSV与PCV2共感染协同致病性试验
- 为阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的协同致病作用,澄清两种病毒不同时间顺序共感染与其协同致病力之间的关系。选取35日龄阴性健康猪30头,随机分6组,PCV2/HP-PRR...
- 范培虎危艳武郭龙军吴洪丽黄立平刘长明
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型共感染
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒持续感染与保护性免疫应答机制被引量：6
- 2006年
- 对猪繁殖与呼吸综合征病毒持续感染与保护性免疫应答机制目前尚未完全阐明,有报道认为病毒中和抗体对抗感染不起保护性作用,甚至起负作用。近年来的研究结果表明,中和抗体在保护性免疫中起重要作用。文章针对猪繁殖与呼吸综合征病毒持续感染与清除,病毒抗原表位与中和抗体的产生机制,病毒感染动物免疫应答反应模型,病毒中和抗体在保护性免疫中的作用等内容做一综述。
- 谭斌刘长明冉多良危艳武张超范
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒中和抗体保护性免疫
