吕文静
- 作品数：6 被引量：46H指数：3
- 供职机构：江苏省大丰市农业干部学校更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 抗冻蛋白研究进展被引量：12
- 2007年
- 抗冻蛋白是一类广泛存在的具有热滞活性、能改变冰晶生长特性和抑制冰晶重结晶的蛋白质。本文综述了各种抗冻蛋白的特性、结构和分子作用机理,并对抗冻蛋白基因及抗冻蛋白应用前景作了论述。
- 冯从经陆剑锋吕文静董秋安符文俊
- 关键词：抗冻蛋白热滞活性
- 一种酚氧化酶原组织定位的胶体金标记免疫电镜方法被引量：1
- 2010年
- 以亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis Guenée5龄幼虫的中肠和体壁组织为材料,采用Epon812常规包埋方法,以作者实验室制备的酚氧化酶原多克隆抗体为一抗、胶体金标记的羊抗鼠IgG为二抗,采用醋酸双氧铀-柠檬酸铅双染色体系,建立一种胶体金标记的特异性强且超微结构保存较好的亚洲玉米螟幼虫体内中酚氧化酶原免疫电镜定位方法。
- 冯从经吕文静
- 关键词：亚洲玉米螟酚氧化酶原胶体金免疫电镜
- 亚洲玉米螟酚氧化酶原的原核表达和性质分析被引量：2
- 2014年
- 【目的】昆虫体内酚氧化酶原(PPO)是一种重要的天然免疫蛋白,参与昆虫的体液免疫和细胞免疫过程。本研究采用原核表达体系,大量表达可溶且具有活性的重组PPO蛋白,可用于各种酚氧化酶(PO)抑制剂的筛选,从而为创制抑制昆虫免疫系统的新型杀虫剂提供条件。【方法】利用从亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis 5龄幼虫体内克隆获得PPO基因,构建了pET-28b-PPO原核表达载体,在大肠杆菌Escherichia coli中重组表达了亚洲玉米螟PPO蛋白;采用Ni-NAT亲和层析柱快速纯化目的蛋白,进行了Western杂交鉴定;测定分析了重组PPO蛋白激活为PO后的酶学性质以及不同金属离子(Mg2+,Cu2+和Fe2+)对PPO二级结构的影响。【结果】融合蛋白PPO得到了表达和纯化。重组PPO蛋白激活为PO后最适反应温度为30℃,最适pH为7.2,以L-DOPA为底物时PO催化反应的Vmax为140.8 U/mg·min,Km为2.96 mmol/L。Fe2+存在的情况下重组PPO蛋白中β-折叠结构成分显著增加至53.7%±4.6%,α-螺旋结构成分则显著下降至2.6%±1.2%(P<0.05);有Mg2+存在的情况下,重组PPO蛋白中β-折叠结构成分显著下降,α-螺旋结构成分稍有上升。有Cu2+存在的情况下,重组PPO蛋白中β-折叠结构成分显著下降为10.0%±1.6%,而α-螺旋结构成分则上升至35.3%±6.9%。【结论】结果说明不同金属离子对重组PPO蛋白的二级结构有显著影响。
- 赵同伟张兵吕文静翟会锋吴桃燕张石洋汤小伟冯从经
- 关键词：亚洲玉米螟酚氧化酶原原核表达蛋白纯化酚氧化酶
- 土壤生防放线菌的分离及其对油菜菌核病菌的抑制作用被引量：8
- 2008年
- 用抑菌圈法从土壤中筛选出21株对油菜菌核病菌有拮抗作用的放线菌菌株,其中拮抗活性较强的有4株。拮抗放线菌对油菜菌核病菌菌丝生长的抑制作用显著,最高抑制率达85.7%;能抑制病菌菌核的形成,处理后11d,对菌核形成的抑制率达97.3%;对菌核萌发的抑制能力稍弱,在菌核萌发初期,部分放线菌菌株对其有抑制作用。
- 朱正兵吕文静纪兆林童蕴慧
- 关键词：生物防治放线菌油菜菌核病菌
- 低温处理对亚洲玉米螟幼虫抗寒性的诱导效应被引量：21
- 2007年
- 室内条件下将亚洲玉米螟Ostriniafurnacalis(Guen啨e)幼虫放置在5℃(LT1处理组)和0℃(LT2处理组)下低温处理2h后,分别测定了其低温诱导识别温度、存活率、抗寒性、过冷却点、体内水分和脂质含量百分率,并进行抗冻特异蛋白的诱导;利用SDS-PAGE方法分析了低温诱导后亚洲玉米螟5龄幼虫血清中抗冻特异蛋白。结果表明:亚洲玉米螟3、4和5龄幼虫的低温诱导识别温度分别为-13·5℃、-16·5℃和-18·5℃;3、4和5龄幼虫存活率LT2组>LT1组>对照组(P<0·05);随虫龄增加,幼虫抗寒性逐步增强;对幼虫过冷却点无明显影响(P>0·05);幼虫水分和脂质含量百分率为LT2组>LT1组>对照组,且随虫龄增加,虫体含水率和脂质含量百分率增高(P<0·05);低温诱导产生了一种分子量约为29·0kD的抗冻特异蛋白。研究结果表明低温诱导可以增强亚洲玉米螟幼虫的抗寒性。
- 冯从经吕文静董秋安陈俊符文俊
- 关键词：亚洲玉米螟抗寒性过冷却点
- 亚洲玉米螟幼虫血淋巴中酚氧化酶原的多克隆抗体制备及免疫学特性分析被引量：2
- 2009年
- 为探讨酚氧化酶原(PPO)的合成转运机制,采用硫酸铵沉淀、Blue Sepharose CL-6B亲和层析和Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析等方法从亚洲玉米螟幼虫血淋巴中纯化得到PPO,纯化倍数为369.85,回收率为35.34%。采用免疫印迹和酶联免疫吸附进行纯化PPO的免疫原性及其多克隆抗体的效价测定,并以透射电镜检测PPO在亚洲玉米螟幼虫体壁和中肠中的分布。结果表明,纯化PPO蛋白全酶相对分子量约为158 kD;免疫2只鼠后所得pAb间接ELISA效价均高达10-5,其中第2号小鼠pAb效价最高为1∶4.08×104;PPO多克隆抗体具有相对较高的特异性;在亚洲玉米螟5龄幼虫中肠和体壁组织中金颗粒呈团状和点状分布。
- 冯从经董长生吕文静董秋安郭晓丽桑守亮
- 关键词：亚洲玉米螟酚氧化酶原多克隆抗体酶联免疫吸附免疫电镜
