周明旭
- 作品数：19 被引量：158H指数：8
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 大肠杆菌鞭毛研究进展被引量：6
- 2019年
- 鞭毛是位于细菌表面的长螺旋形可旋转附属物,长约10μm,主要与细菌的运动有关。鞭毛的驱动力是许多细菌病原体的重要毒力特征,并且是建立感染所必需的。感染发生后,鞭毛有利于细菌到达侵入部位。大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)一般周身鞭毛,具有运动性。鞭毛蛋白,又称为H抗原,是大肠杆菌分类的重要表面抗原。本文对大肠杆菌鞭毛的结构、功能和H抗原分型作一简要综述,旨在为本领域的相关研究提供一定的理论基础和依据。
- 田延丁雪燕岑雪周明旭羊扬羊扬
- 关键词：鞭毛蛋白大肠杆菌表面抗原细菌可旋转病原体
- 江苏某牛场奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定、耐药性及保守抗原分析被引量：17
- 2019年
- 2018年6月对江苏某奶牛场30头隐性乳房炎奶牛的50个发病乳区采集生牛乳进行检测,分离鉴定主要病原菌,其中大肠埃希菌19株(38%)、肺炎克雷伯菌13株(26%)、金黄色葡萄球菌5株(10%)、凝固酶阴性葡萄球菌11株(22%)、无乳链球菌4株(8%)、停乳链球菌1株(2%)。采用PCR和血清学方法对金黄色葡萄球菌分离株进行分型,结果显示5株金黄色葡萄球菌中4株为CP8型(80%),1株为非CP5、CP8或336PS型。耐药性分析结果显示该牛场松鼠葡萄球菌菌株对磺胺类药物复方新诺明和广谱抗菌药甲氧胺嘧啶表现双重耐药,耐药率达100%;肺炎克雷伯菌对利福平和万古霉素表现双重耐药,耐药率达100%。此外,部分葡萄球菌、链球菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对四环素、红霉素、克林霉素和克拉霉素表现出中度敏感。但所有菌株对头孢哌酮、链霉素、庆大霉素、妥布霉素、氯霉素和呋喃妥因表现高度敏感,敏感率100%。通过PCR方法检测发现,在分离菌株中金黄色葡萄球菌TraP和FnbpA,无乳链球菌GapC和Sip,大肠埃希菌Lpf1A等保守抗原检出率高达89%~100%,证明其作为亚单位疫苗候选抗原的普适性。这一研究为该牛场乳房炎的临床用药和综合防控提供了参考依据。
- 周明旭周明旭徐悦徐悦鲍熹张金秋杨章平朱国强
- 关键词：奶牛乳房炎耐药性
- K88ac^+和K88ad^+产肠毒素大肠杆菌hlyA基因缺失株的构建及相关功能初步分析被引量：9
- 2014年
- 为研究产肠毒素大肠杆菌(ETEC)溶血素hlyA基因的相关生物学特性,本研究通过Red同源重组的方法构建了ETEC标准株K88ac+C83902和K88ad+C83903的hlyA基因缺失株。体外生长试验和酵解试验表明:缺失株C83902△hlyA和C83903△hlyA生长速度及生长周期各个阶段的特性与相应野生株相比无差异,其分解发酵糖类和氨基酸的能力也未发生改变。小鼠感染试验显示经野生株和回补株感染的小鼠致死率高,而缺失株不致死,表明hlyA基因可以增强ETEC对ICR小鼠的致病力。从感染小鼠的十二指肠、空肠、回肠分离感染的靶细菌,平板计数和PCR检测表明,ETEC在小鼠回肠的黏附能力强于在十二指肠和空肠,并且基因缺失株黏附能力比野生株显著降低。本研究首次对ETEC溶血素hlyA基因进行研究,为进一步阐释α-溶血素与机体相互作用的分子机制和ETEC的致病机制,以及预防ETEC感染提供了相关的实验依据。
- 姜露聂佳佳杨样羊扬周明旭朱国强
- 关键词：ETEC
- 细菌鞭毛运动、黏附和免疫逃逸机制的研究进展被引量：13
- 2017年
- 鞭毛是细菌表面重要的附属结构之一,很长一段时间以来被认为仅负责细菌的运动。然而随着对鞭毛的结构以及致病性深入研究发现,鞭毛的运动性能够促进细菌与宿主的相互作用,鞭毛介导的黏附在几种动植物病原体对宿主的定植过程中起很重要作用,而促进鞭毛结合到不同宿主组织的特异性互作机制至今仍不清楚。鞭毛素单体的保守区是机体先天性免疫应答的有效诱导剂,能够诱导机体发生免疫应答,然而细菌也进化出多重策略来逃避免疫识别。现对近年来细菌鞭毛在动植物宿主环境中的作用作一综述,为更全面认识和研究鞭毛提供参考。
- 许绵周明旭朱国强
- 关键词：细菌鞭毛运动性免疫逃避
- 不同动物源大肠杆菌gapA看家基因的克隆及序列比较被引量：4
- 2013年
- 3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase,GAPDH/G3PDH)是糖酵解反应的关键酶,为生命体的各种生命活动提供能量。在大肠杆菌中,GAPDH由看家基因gapA编码。本研究对不同动物源的大肠杆菌菌株(包括禽源致病性大肠杆菌(APEC)分离株O1和CE129、人源肠致病性大肠杆菌(EPEC)菌株738、人源益生菌Nissle1917和猪源表达F18菌毛大肠杆菌标准株F107/86的gapA基因进行PCR扩增、克隆测序,并与GenBank中8株菌株序列比较,发现其核酸序列虽有少数位点的突变,但是氨基酸序列仍保持完全一致,从分子基础上保证了GAPDH的酶活性。本研究验证了原核病原微生物,尤其是大肠杆菌gapA基因转录翻译的GAPDH蛋白的高度保守性,为制备大肠杆菌专用内参蛋白抗体提供可能,并进一步为对致病性大肠杆菌的蛋白代谢通路和合成生物学研究提供了基础材料。
- 朱丛睿周明旭陶洁朱国强
- 关键词：3-磷酸甘油醛脱氢酶克隆
- 产肠毒素大肠杆菌研究进展和面临挑战被引量：12
- 2015年
- 产肠毒素大肠杆菌（Enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）可以导致人类和初生幼畜腹泻的重要人畜共患型病原体。每年大约有2．8～4亿例五岁以下儿童感染ETEC相关联的腹泻，导致约30～50万人死亡；还约有4亿例成人腹泻病与ETEC感染相关。
- 陈盼霖周明旭朱国强
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌幼畜腹泻人畜共患ETEC病原体腹泻病
- 肠炎沙门菌Ⅰ型菌毛主要亚单位FimA原核表达及纯化被引量：2
- 2014年
- 为探讨肠炎沙门菌非编码小RNA(non-coding small RNA)IsrE在转录后水平是否参与对fimA的调控作用,在大肠杆菌中构建并表达FimA重组蛋白,并对其培养条件进行优化,制备高纯度FimA重组蛋白。利用原核表达载体p ET-28a(+)构建出能表达fimA的重组质粒,并分别对IPTG浓度、诱导温度和诱导时间等条件进行优化,以提高目的蛋白的产量和增大其可溶性,最后经Ni-NTA亲和层析分离纯化FimA重组蛋白。通过酶切、测序和Western blot鉴定分析,成功构建并表达肠炎沙门菌I型菌毛主要亚单位FimA,蛋白分子质量约为19.3 kDa,且主要以包涵体的形式表达,经Ni-NTA亲和层析纯化后的重组蛋白在SDS-PAGE中显示单一条带。本研究构建、表达并获得纯度较高的重组蛋白FimA,为进一步研究和验证肠炎沙门菌非编码sRNA IsrE是否在转录后水平参与对fimA的调控奠定了基础。
- 王勇祥孟霞段进坤周明旭周明旭杨溢陶洁
- 关键词：肠炎沙门菌ISRE原核表达
- Ⅰ型菌毛对F18ac大肠杆菌粘附性能的影响被引量：3
- 2017年
- 为研究Ⅰ型菌毛在F18ac大肠杆菌(F18ac E.coli)粘附过程中的作用,本研究利用λ-Red同源重组系统构建了F18ac E.coliⅠ型菌毛主亚基编码基因fim A缺失突变株(F18ac△fim A),以野生株为对照,通过体外易感细胞粘附试验和生物被膜(BF)形成定量试验,探索Ⅰ型菌毛在F18ac E.coli粘附宿主细胞过程中的作用。体外易感细胞粘附结果显示,经8%甘露糖封闭Ⅰ型菌毛受体或fim A基因缺失后,F18ac E.coli对易感仔猪上皮细胞IPEC-1的粘附能力均显著下降。BF结晶紫定量试验显示,F18ac△fim A菌株形成BF的能力显著下降,而F18ac△fim A/pfim A回补株的粘附能力以及生物被膜形成能力均得到了恢复。本研究表明Ⅰ型菌毛是F18ac E.coli重要的粘附素,介导了F18ac E.coli对仔猪易感细胞的粘附过程。本研究为进一步阐释F18ac E.coli致病机制中多毒力因子的作用提供了实验依据。
- 段强德王录军周明旭朱国强
- 关键词：粘附因子生物被膜
- 大肠埃希菌内参基因gapA克隆表达及抗体的制备与应用被引量：9
- 2015年
- 针对原核生物细菌作为内参蛋白至今鲜见报道,基于大肠埃希菌gapA基因编码的3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)蛋白高度保守性,PCR扩增出人源大肠埃希菌益生菌Nissle1917的gapA基因并克隆入原核表达载体pET-28a(+),经IPTG诱导表达重组GAPDH蛋白。通过对重组蛋白的纯化并免疫BABL/c小鼠制备大肠埃希菌内参蛋白GAPDH多抗血清,结合SDS-PAGE和Western-blot试验。结果表明:GAPDH对大肠埃希菌及沙门氏菌属细菌代表株均具有良好的特异性识别反应。证明GAPDH蛋白可应用于原核生物细菌一类的内参蛋白,为深入研究肠杆菌,尤其是致病性大肠埃希菌和肠炎沙门氏菌的代谢通路以及合成生物学提供基础材料。
- 朱丛睿周明旭朱国强
- 关键词：大肠埃希菌3-磷酸甘油醛脱氢酶
- 肠炎沙门菌fimA、flhD基因启动子克隆及其LacZ报告质粒的构建被引量：4
- 2014年
- 肠炎沙门菌是引起人食源性疾病的主要人兽共患病原菌之一,其感染机制与细菌染色体上特定的毒力岛以及毒力质粒上的某些毒力基因有关。基于对肠炎沙门菌毒力基因的前期研究,以毒力因子SEF21菌毛编码基因fim A和鞭毛调控基因flh D为研究对象,通过PCR从肠炎沙门菌50336中扩增靶基因的上游启动子序列Pfim A和Pflh D,克隆到质粒p RS551中构建lac Z报告质粒,并将其转化入肠炎沙门菌50336中,再通过β-半乳糖苷酶试验检测其活性,为进一步利用Lac Z报告系统定量研究肠炎沙门菌内SEF21菌毛和鞭毛的毒力表达奠定基础平台。
- 陈盼霖刘凯周明旭朱国强
- 关键词：肠炎沙门菌
