唐光霞
- 作品数：11 被引量：18H指数：3
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- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目珠海市软科学研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肾纤维囊作为载体培养角膜基质细胞的研究被引量：2
- 2009年
- 目的探索以脱细胞的肾纤维囊作为载体培养角膜基质细胞并研究培养角膜基质细胞特性。方法将培养扩增的兔角膜基质细胞分别接种到培养板和肾纤维囊上进行体外培养,采用倒置显微镜、免疫组化(波形蛋白)和免疫荧光(AO、PI和Hoechst)的方法进行检测,观察兔角膜基质细胞在培养板和肾纤维囊上的生长情况。结果倒置显微镜和免疫荧光显微镜观察结果显示角膜基质细胞在肾纤维囊上快速贴壁生长并增殖,细胞形态呈多角形树枝状,多次传代后细胞仍维持原有的形态和功能,细胞能长期培养。在培养板上培养的细胞呈长梭形,细胞贴壁生长和增殖情况稍差。在肾纤维囊上的活细胞较在培养板上培养的细胞多。结论角膜基质细胞在脱细胞的肾纤维囊载体上生长良好,细胞形态结构明显。本研究为角膜基质细胞的体外培养,提供了简单和高效的方法。
- 唐光霞陈建苏徐锦堂夏潮涌丁勇
- 关键词：角膜基质细胞细胞培养
- 高浓度葡萄糖对培养兔角膜上皮细胞增殖活性的影响
- 2011年
- 目的研究高浓度葡萄糖对体外培养兔角膜上皮细胞增殖活性的影响,建立糖尿病性兔角膜上皮细胞培养模型。方法按照析因设计方法将葡萄糖浓度(25、40、60 mmol/L)和培养时间(24、48、72 h)进行全面组合,应用SunBioTM Am-Blue细胞增殖与活性检测试剂检测兔角膜上皮细胞增殖活性,倒置显微镜观察细胞形态。结果高浓度葡萄糖对兔角膜上皮细胞增殖活性的影响有统计学意义(F=276.318,P<0.01),作用时间对细胞增殖活性的影响有统计学意义(F=38.727,P<0.01),葡萄糖浓度和作用时间之间有交互作用(F=2.687,P<0.05)。结论高浓度葡萄糖对体外培养兔角膜上皮细胞增殖活性有抑制作用,随时间的延长抑制作用加强。
- 宋子宣陈剑王彦平阮余霞陈建苏吴静唐光霞高松哲
- 关键词：高浓度葡萄糖角膜上皮细胞增殖活性
- 房水对培养的角膜基质细胞的影响被引量：3
- 2010年
- 目的观察房水对角膜基质细胞生长的作用。方法将新西兰大白兔的角膜去除后弹力层、内皮层和上皮层后,得到基质层,用组织块培养法体外培养角膜基质细胞。在实验组的培养基中加入10%房水,对照组使用常规培养基培养。通过CCK8实验测得角膜基质细胞的吸光度(A)值以分析细胞增生的情况。分别在培养基中加入2.5%、5%、10%、15%、20%的房水,用明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶(MMPs)的活性。结果倒置显微镜观察可见培养的角膜基质细胞呈多角形或树枝状,与对照组相比,实验组的细胞生长状态良好,培养的角膜基质细胞数量明显增加。明胶酶谱法显示实验组的条带比对照组清晰。实验第1～5天分别测角膜基质细胞的A值,实验组的检测条带明显强于对照组,>10%的房水培养组检测的条带明显强于2.5%、5%房水培养组。CCK8检测表明,培养1～5d实验组的角膜基质细胞A值明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论房水作用于角膜基质细胞后,可促进角膜基质细胞的生长,10%房水对体外培养角膜细胞有促细胞增生的作用。
- 唐光霞陈建苏徐锦堂吴连胜潘红卫林熙唐建军
- 关键词：房水角膜基质细胞细胞培养
- 灌注动物细胞培养及其在组织工程中的应用进展被引量：1
- 2010年
- 灌注培养方法是在传统的培养方法基础上发展起来的新的动物细胞的培养方法。目前,组织工程方面有关灌注培养条件下细胞体外生长的研究表明,灌注培养提供的动态培养环境有利于细胞体外生长和增殖,可以得到与活体组织相似的体外组织,用灌注培养所得的细胞或组织进行体内移植的成功率较高。灌注培养方法为组织工程的研究和应用开辟了新的前景,本文对灌注动物细胞培养及其在组织工程中的应用研究进展进行综述如下。
- 唐光霞陈建苏
- 关键词：灌注培养细胞培养
- 碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人羊膜间充质干细胞增殖的影响被引量：5
- 2011年
- 目的观察不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养人羊膜间充质干细胞(HAMSCs)增殖的影响,以探索体外培养HAMSCs的最适条件。方法分离、培养HAMSCs,选取第3代细胞进行鉴定及检测。实验组将bFGF分为0.1、0.5、1、5、10、20、40、80ng/ml共8个浓度组;阴性对照组只加HAMSCs,不加bFGF;空白对照组只加培养基。各组孵育48h后加入Am-Blue试剂,继续孵育,待培养基由靛青蓝色开始变成粉红色时取出用酶标仪测量各组的吸光度(OD),重复3次实验。结果 0.5、1、5、10、20、40、80ng/ml浓度组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);10ng/ml组与0.5、1、5ng/ml组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);10ng/ml组与40、80ng/ml组相比,差异无统计学意义(P=0.067),表明bFGF促增殖作用最强的最小浓度为10ng/ml。结论 bFGF能够促进HAMSCs增殖,且促增殖作用最强的最小浓度为10ng/ml。
- 高松哲陈剑王彦平肖盼宋子宣阮余霞杨筱曦吴静唐光霞
- 关键词：羊膜间充质干细胞碱性成纤维细胞生长因子增殖力
- EDTA对兔角膜内皮细胞增殖的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察不同浓度的EDTA对兔角膜内皮细胞（corneal endothelial cells,CECs）增殖的影响。方法采取揭取角膜后弹力层联合酶消化法分离培养兔CECs;分别用0.5mmol.L-1、2.5mmol.L-1、5.0mmol.L-1的EDTA作用于体外培养的兔CECs1h。然后于24h、48h、72h、96h观察不同浓度的EDTA对兔CECs的影响。采用CCK-8检测方法测定在450nm处各吸光度（A值）来判断CECs的增殖状况。采用流式细胞检测仪对各组细胞周期进行检测。同时采用倒置显微镜观察细胞形态的变化。结果揭取带内皮细胞的后弹力层联合酶消化法培养的兔CECs可很快贴壁、增殖,并在4~5d融合为单层。CCK-8检测结果显示0.5mmol.L-1、2.5mmol.L-1、5.0mmol.L-1的EDTA作用后各个时间点均能使CECs的吸光度发生改变,同一时间点0.5mmol.L-1的EDTA对细胞增殖的作用最为显著,各摩尔浓度的EDTA对兔CECs作用后96h吸光度改变最明显（A值分别为：2.5952±0.0530、2.0904±0.1592、0.9391±0.0772）。作用48h后0.5mmol.L-1组兔CECs的S＋G2/M期细胞所占比例（A值为1.2925±0.0183）与阴性对照组比较,差异有统计学意义,而2.5mmol.L-1、5.0mmol.L-1组与阴性对照组（A值为0.9212±0.0848）比较,差异均无统计学意义。结论 0.5mmol.L-1的EDTA作用于兔CECs1h后的不同时间均有明显的促进增殖的作用。
- 贾晓静侯光辉吴静徐锦堂唐光霞
- 关键词：乙二胺四乙酸角膜内皮细胞细胞培养增殖
- 肾纤维囊为载体培养角膜内皮细胞的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的探索以脱细胞的肾纤维囊作为载体培养角膜内皮细胞并研究角膜内皮细胞特性。方法将培养扩增的角膜内皮细胞分别接种到培养板和肾纤维囊上进行体外培养,采用倒置显微镜、免疫荧光、HE染色和扫描电镜的方法进行检测,观察角膜内皮细胞在培养板和肾纤维囊上的生长情况。结果角膜内皮细胞在肾纤维囊上快速贴壁生长并增殖,细胞形态为多角形或六边形,多次传代后细胞仍维持原有的形态和功能,细胞能长期培养。在培养板上培养的角膜内皮细胞贴壁生长和增殖情况稍差。结论角膜内皮细胞在脱细胞的肾纤维囊载体上生长良好,细胞形态结构明显。本研究为角膜内皮细胞的体外培养提供了简单和高效的方法。
- 唐光霞陈建苏徐锦堂
- 关键词：角膜内皮细胞细胞培养
- 兔角膜重度碱烧伤后异种猫前板层角膜移植重建角膜眼表被引量：3
- 2010年
- 目的研究猫新鲜前板层角膜移植治疗兔右眼角膜重度碱烧伤的疗效。方法将16只5个月龄的健康雄性新西兰白兔右眼制作重度角膜碱烧伤模型,随机分成A、B两组,每组各8只兔,其中A组为猫(4只)→兔异种前板层角膜移植组,植片直径为11.0mm,植床直径为10.0mm;B组未行手术。A组兔术后及B组造模后用500g.L-1葡萄糖及复方氯霉素滴术眼直至处死,记录两组疗效指数,并分别于术后1个月、2个月、3个月取材进行术眼角膜病理学及扫描电镜检查。结果3个月内A组8只角膜碱烧伤兔经异种猫前板层角膜移植后,7只移植角膜保持透明,1只出现局限性角膜混浊和角膜新生血管;而B组未手术的8只兔中出现角膜白斑、新生血管4只,角膜溃疡、穿孔3只,角膜溶解穿孔1只,并且有4只发生睑球粘连等并发症。A、B两组治疗后1个月、2个月、3个月平均疗效指数差异均有统计学意义(均为P<0.05)。A组透明角膜中组织学及扫描电镜下的结构特征清晰;B组兔角膜中有明显的角膜水肿和炎性细胞浸润,组织学及扫描电镜下的结构特征显示细胞连接混乱、消失。B组扫描电镜还提示随着时间的延长,上皮细胞部分生长、增多,细胞连接差,角膜上皮排列紊乱;角膜内皮细胞数量明显减少或无,细胞连接混乱、消失。结论用异种猫新鲜前板层材料对重度兔碱烧伤角膜进行板层移植手术治疗在一定程度上可减轻伤后炎症反应,防止严重并发症的发生,维持眼表结构并可达到一定的光学治疗效果。
- 吴连胜陈建苏徐锦堂丁勇唐光霞郑佩娥雷自鸣
- 关键词：异种角膜移植角膜碱烧伤
- 组织工程角膜的构建及其细胞转化诱导研究
- 目的:（1）探索以脱细胞的肾纤维囊作为载体培养角膜基质细胞并研究培养角膜基质细胞特性;（2）探讨眼房水对角膜基质细胞生长的作用;（3）体外培养脐静脉血管内皮细胞,通过在肾纤维囊上和基质细胞双面共培养、加入10%的房水和b...
- 唐光霞
- 关键词：脐静脉血管内皮细胞角膜基质细胞角膜内皮
- 文献传递
- 人羊膜上皮细胞的体外培养及标记
- 2011年
- 目的改良人羊膜上皮细胞的培养方法,检测生长特性,观察荧光染料4,-6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记人羊膜上皮细胞(HAECs)的效率。方法取足月剖宫产术后羊膜经胶原酶和胰蛋白酶消化获得上皮细胞。MTT法绘制细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞的生长周期,免疫组化对细胞角蛋白进行鉴定。并用DAPI标记,测1、2周荧光阳性率。结果培养的HAECs多角形,生长分为缓滞期、对数增长期和平台期,近80%处于细胞周期的静止期G0。细胞角蛋白keratin阳性表达。DAPI标记1周标记率为100%;2周细胞形态好,标记率不变,荧光强度减弱。结论该实验方法成功培养人羊膜上皮细胞。DAPI短期标记效果理想。
- 阮余霞周清陈剑王彦平杨筱曦李红唐光霞吴静
- 关键词：人羊膜上皮细胞细胞培养
