张长弓
- 作品数：50 被引量：219H指数：10
- 供职机构：厦门大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学理学更多>>
- 猪瘟病毒EO蛋白的原核表达及其重组蛋白活性测定被引量：1
- 2006年
- 通过重叠PCR合成猪瘟病毒EO基因,将该片段定向插入到pET-22b载体中,构建原核表达载体pET-22b／EO,转化大肠杆菌BL21 (DE3),IPTG诱导表达,比较不同诱导条件下的蛋白表达,确定其最佳表达条件。重组蛋白主要以包涵体的形式表达,Ni2+亲和层析柱纯化蛋白,逐步透析法复性。通过方阵试验确定包被抗原的最适工作浓度,为了测定EO蛋白的活性,本文初步建立了检测猪瘟血清抗体水平的间接 ELISA方法,为开发检测猪瘟抗体诊断试荆奠定基础。
- 王生育颜江华张长弓李文珠庄国洪黄印尧
- 关键词：EO包涵体间接ELISA
- 以pH敏感相分离高分子为载体的酶联荧光免疫分析法测定人IgG被引量：12
- 2003年
- pH敏感高分子因其独特的pH敏感性质而在药物的控制释放[1,2]、分子分离[3]以及生物传感器[4]等方面得到应用. 应用于免疫分析时, 要求pH敏感高分子在溶液pH 7.4左右波动时做出响应, 过多偏离生理pH会对免疫反应生成的抗原-抗体复合物造成不同程度的破坏. 目前, pH敏感高分子并未在免疫分析中广泛应用, 这主要是由于高分子的相转变pH大多在4或10左右[5,6]. 我们[7]曾合成了37 ℃下相转变pH在5.6左右的pH敏感高分子, 并将其作为免疫反应载体, 建立了乙肝表面抗原的分析系统, 虽然其相转变pH比以往的高分子更接近于中性[5], 但并没有达到生理pH值7.4范围, 分离时仍可能对免疫复合物造成一定的损害.
- 林鹏郑洪杨黄浩杨薇张长弓许金钩
- 关键词：人IGG免疫复合物
- 诱骗受体DcR3的基因构建、表达及特异性鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的:构建适于原核表达的人诱骗受体DcR3基因,并进行重组蛋白的表达纯化及特异性鉴定。方法:查得人DcR3cDNA全序列,将其分段设计引物,通过重叠PCR获得DcR3基因。构建pET-22b(+)/DcR3表达载体,转化大肠杆菌Rosseta-gami,IPTG诱导表达,Ni柱纯化。采用ELISA进行特异性鉴定。结果:通过重叠PCR获得了编码正确氨基酸序列的目的基因。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后,蛋白纯度达95%以上。ELISA结果表明所纯化的蛋白可与抗DcR3抗体发生特异结合。结论:诱骗受体DcR3基因的成功构建、表达及纯化,为进一步的功能研究奠定了基础。
- 李文珠陶惠然颜江华张长弓苏金华王阶平杨桂旺庄国洪
- 关键词：DCR3基因构建基因表达
- 口蹄疫抗体免疫金标快速检测试纸法的建立被引量：28
- 2004年
- 应用免疫学原理与胶体金层析技术,采用双抗原夹心ELISA建立了检测口蹄疫(O型)抗体水平的“口蹄疫抗体(O型)免疫胶体金快速检测试纸法”。应用该法与“口蹄疫正向间接血凝抗原法”对300份猪、鸡、鸭、牛、羊等血液或血清进行口蹄疫抗体水平检测试验,符合率达100%。试验结果显示,该法与间接血凝法一样,具有微量、特异、准确等优点,且操作简易,不需要任何仪器,检测时间短,结果直观,容易判定,适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积口蹄疫抗体普查。
- 张长弓金颜辉黄印尧方莹梁全顺
- 关键词：口蹄疫抗体检测
- cagA(+)Hp圆球体实验动物模型的建立
- 2003年
- 目的 建立Hp圆球体动物模型。 方法 通过去营养法来培养cagA(+)Hp圆球体 ,定期用MTT和SCC方法来检测细菌的代谢活性 ,用吉姆萨染色和电镜负染色来观察细菌在不同时期的形态和变化。在圆球体培养的第 7周 ,进行幽门螺杆菌及其圆球体经口感染裸鼠的实验。结果 通过细菌学、尿素酶实验、16SRNA、cagA(+)PCR检测和电镜负染色等方法确定从已喂服幽门螺杆菌及其圆球体的裸鼠胃里分离到的细菌克隆 ,经证实为cagA(+)Hp。 结论 首次在裸鼠上证实了Hp圆球体是Hp“粪—口”传播链上不可缺少的一环。
- 方莹张长弓陈福杨善民王昆
- 关键词：圆球体实验动物模型幽门螺杆菌
- 猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合症抗体免疫金标检测试纸的研制和应用
- 黄印尧张长弓金颜辉颜江华孔凡德方莹张春安陈信忠洪于准
- 本成果是针对当前开展的猪伪狂犬病（PR）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）抗体监测所使用的ELISA法，LAT二种所存在不足之处而开展的。ELISA虽然具有微量、特异、准确的优点，但需要有设备完整的实验室和专业技术人员操作...
- 关键词：
- 关键词：猪伪狂犬病猪繁殖呼吸综合征
- 等速电泳-高效液相色谱联用分离复杂样品的研究被引量：3
- 1999年
- 将ＯＣＥＰ－１型等速电泳仪和Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪主要部件联用，配以自制的接口，建立高效液相色谱－等速电泳新联用系统，成功地研究了含蛋白质和一些金属离子的复杂样品的分离分析。
- 阮源萍刘文远胡荣宗穆纪千洪少群张长弓
- 关键词：等速电泳高效液相色谱蛋白质金属离子
- 应用金免疫层析技术检测猪瘟抗体的研究被引量：21
- 2004年
- 用金标免疫层析技术测试30份标准阳性血清和18份标准阴性血清 ,结果阳性 ,阴性符合率100 %。用该方法与ELISA试剂、dot-ELISA试剂及正向间接血凝进行比对试验检测血清样品205份 ,结果阳性率ELISA为86.8% ,金标层析法为85.4% ,dot-ELISAO81.5% ,正向间接血凝为58.5% ,结果显示该方法特异性强 ,敏感性高 ,操作简单 ,使用方便。既可用血清 ,也可以用全血测猪瘟抗体 ,可广泛应用于猪场和个体养猪户现场检测。
- 金颜辉黄印尧张长弓梁全顺方莹关育芳丘建华洪英黄雁
- 关键词：猪瘟抗体
- 用于检测猪瘟抗体的免疫金标试纸条的研制与应用研究被引量：46
- 2002年
- 以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜的检测区,在其下端附着胶体金标记的猪瘟抗原,组成免疫金标试纸条,根据胶体金免疫层析原理,用该试纸条建立检测猪瘟抗体水平的免疫金标检测法。再用本试纸条检测法与Dot-ELISA及间接血凝法对298份猪、鸡、鸭、鹌鹑、兔、鼠、羊血清进行猪瘟抗体检测,结果符合率达100%。试验结果表明,本法与Dot-ELISA及间接血凝法一样特异、敏感和微量,而且检测时间短、直观,结果容易判定,适用于大面积猪瘟抗体监测普查。
- 黄印尧张长弓方莹金颜辉
- 关键词：猪瘟抗体检测
- 纳氏测氨法半定量诊断HP感染的方法及其应用被引量：2
- 1997年
- 对纳氏测氨法尿素酶试验（ＮＵＴ法）进行半定量标准化后，进一步建立了纳氏测氨半定量诊断人胃粘膜中幽门螺杆幽（ＨＰ）感染程度的方法，使ＮＵＴ法可同时用于定性及半定量诊断ＨＰ感染及感染程度．对经过半定量检测的３５０例患者作分析，显示轻、中、重度感染比率分别为５４．６％、３４．０％及１１．４％，另对其中１８２例慢性浅表性胃炎进行病变程度与ＨＰ感染程度的相关性分析，表明慢性浅表性胃炎的病变程度与ＨＰ的感染程度呈明确的正相关性（ｐ＜０．０５），提示胃部疾病的恶性演变尚与感染程度有关．
- 陈瑞川吴艳环张长弓杨善民林炳珍
- 关键词：幽门螺杆菌尿素酶试验纳氏试剂HP感染
