方伟
- 作品数：31 被引量：108H指数：7
- 供职机构：广东省水生动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金上海市科技兴农重点攻关项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 一种氯霉素免疫原的制备方法
- 一种氯霉素免疫原的制备方法。其特征在于包括下列主要步骤：将牛血清蛋白、氯霉素琥珀酸钠、碳二亚胺，以摩尔比1∶50∶1200分别溶解在磷酸盐缓冲液中，然后将三种溶液混合，在室温下反应2小时，期间缓慢摇动使溶液充分反应；将反...
- 方伟杨先乐胡鲲黄宣运姜有声
- 文献传递
- 微生物饲料添加剂在南美白对虾养殖中的应用被引量：2
- 2015年
- 目前,微生态制剂、大蒜素、有机酸、植酸酶等饲用抗生素替代添加剂产品成功地投入市场。其中,微生态制剂以其成本低、效果显著等特点成为目前人们公认的、最有发展潜力替代抗生素的饲料添加剂。
- 安健陈百尧伏光辉唐兴本孙苗苗薛学坤方伟
- 关键词：南美白对虾养殖微生物添加剂饲用抗生素替代抗生素中试试验东辛农场
- 氯霉素人工抗原的合成与鉴定被引量：7
- 2009年
- 采用重氮化法和碳二亚胺(EDC)法合成了氯霉素人工抗原。经紫外光谱法、电泳鉴定表明偶联成功;采用三硝基苯磺酸法测得载体蛋白-εNH3+残基利用率分别为31.02%、22.27%,偶联物的结合比为18.9、13.6;制备的抗原分别免疫小白鼠获得多克隆抗体,血清效价可达10-6以上。经比较,碳二亚胺法更适于氯霉素人工抗原的制备。
- 方伟胡鲲姜有声黄宣运杨先乐
- 关键词：氯霉素人工抗原
- 杂交鳢舒伯特气单胞菌弱毒疫苗候选株筛选及其免疫效果评价被引量：2
- 2019年
- 为获得一种安全、高效的舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii)弱毒疫苗候选株,通过鱼体攻毒实验筛选天然弱毒株,用筛选的弱毒株制备弱毒疫苗,对杂交鳢进行免疫后,采用荧光定量RT-PCR方法评价免疫相关基因表达情况,同时采用强毒株攻毒免疫的杂交鳢测定相对免疫保护率(relative percentage survival,RPS),综合评价弱毒株作为活疫苗侯选株的潜力。结果显示:筛选到一株舒伯特气单胞菌天然弱毒株OM170701,其对靶动物杂交鳢与非靶动物大口黑鲈均无明显致病性;该弱毒疫苗候选株能诱导杂交鳢肝脏中IL-8、IL-1β、补体C3表达量上调,免疫后72 h相对表达量达到最高,分别是对照组的相对表达量的4.95倍、5.57倍、3.94倍;免疫组IgM的相对表达量显著高于对照组,其中第28天时免疫组IgM相对表达量是对照组的17.26倍;攻毒后免疫组成活率显著高于对照组,其RPS为65%。结果表明,该弱毒株通过注射免疫能引发杂交鳢非特异性和特异性免疫应答,并提供良好的免疫保护。
- 胡蕾刘礼辉杨圆圆方伟林强付小哲梁红茹刘山桂李宁求
- 关键词：杂交鳢弱毒疫苗免疫基因
- 环丙沙星偶联物的制备及其产物的鉴定被引量：7
- 2008年
- 采用碳二亚胺法,制备了环丙沙星-小牛血清蛋白偶联物,评价了pH、环丙沙星和碳二亚胺浓度对偶联结合比率的影响。同时采用红外光谱、紫外光谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳和质谱方法对偶联产物的基团、分子量等特征进行分析鉴定。正交试验结果表明,pH对环丙沙星-小牛血清蛋白的偶联结合比率具有显著性差异,碳二亚胺和环丙沙星浓度差异性不显著。在pH5.0,碳二亚胺和环丙沙星浓度分别为60mg/mL和5mg/mL的条件下,环丙沙星-小牛血清蛋白偶联结合比率为30∶1。该方法条件下的偶联反应成功。结论:该方法可用于环丙沙星-小牛血清蛋白的偶联,且简便易行。
- 黄宣运胡鲲方伟金怡杨先乐
- 关键词：环丙沙星偶联
- 噬菌体在水产养殖动物细菌性病害防控中的应用被引量：2
- 2018年
- 据联合同粮农组织（FAO）估计，随着捕捞渔业资源的逐渐衰退而导致捕捞产量的下降，到2020年全球的水产品供应将有一半来自水产养殖业。然而，大规模高密度集约化的养殖模式引发的细菌性病害的暴发与蔓延逐渐成为妨碍水产养殖业可持续发展的重要因素。
- 倪军杨圆圆林汉群方伟
- 关键词：水产养殖动物细菌性病害水产养殖业捕捞产量粮农组织
- 乌伦古河流域克孜赛水库浮游植物群落组成被引量：11
- 2011年
- 克孜赛水库是乌伦古河源头的一个小型水库,2008年7月(夏季平水期)、2008年10月(秋季枯水期)和2009年5月(春季丰水期)对水库内浮游植物群落进行了调查分析,共鉴定出浮游植物102种(属),隶属于8个门,以硅藻门和绿藻门为主。3个时期浮游植物密度变化趋势为:枯水期(25.221±3.605×106ind/L)>平水期(12.539±1.064×106ind/L)>丰水期(1.052±0.077×106ind/L)。各季节优势种的组成因气候温度差异而变化,其中以夏季平水期最多,达9种。克孜赛水库温度和水量的变化共同导致了水库浮游植物种类组成、密度、优势种和生物多样性指数的季节变化。Shannon-Weaver多样性指数(H)和Pielou均匀度指数(J)变化趋势较一致:平水期>枯水期>丰水期,而Margalef丰富度指数(D)则于丰水期达最大值。
- 薛俊增方伟蔡桢王琼陈文银黄硕琳朱新英李周永吴惠仙
- 关键词：浮游植物群落生态生物多样性
- 氯霉素单克隆抗体的研制及其特性分析被引量：1
- 2010年
- 为了研制氯霉素单克隆抗体,建立氯霉素的简便有效的检测方法。采用碳二亚胺(EDC)方法制备氯霉素免疫抗原和包被抗原,经SDS-PAGE凝胶电泳,三硝基苯磺酸(TNBS)法鉴定表明偶联成功。采用制备的抗原CAP-HS-BSA((CAP-HS,氯霉素琥珀酸酯;BSA,牛血清白蛋白)免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了2株抗氯霉素的杂交瘤细胞株,细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。经体内诱生法产生腹水,ELISA检测纯化腹水的效价为1∶106。抗体的亲和常数分别为:1.13×1010L/mol,1.41×1010L/mol。ELISA检测显示这2株单克隆抗体与氯霉素琥珀酸交叉反应率为300%,与其他抗生素及结构类似物的交叉反应小,表明该单抗可满足建立免疫学检测方法的需要和开发应用的要求。
- 方伟姜有声黄宣运胡鲲杨先乐
- 关键词：氯霉素单克隆抗体
- 淀山湖养殖围网拆除后昆山水域浮游生物生态现状初步研究被引量：11
- 2010年
- 为了研究淀山湖昆山水域养殖围网拆除后的浮游生物生态现状,于2008年春季围网全部拆除后在淀山湖昆山水域设置5个断面进行了相关研究。结果显示研究期间淀山湖昆山水域各样点温度分布基本一致,水体呈弱碱性,pH值在8.39～8.85之间,电导值为0.87～1.02μs/cm,水体溶解氧在8.92～12.71mg/L之间,透明度值较小,多在0.35～0.60m间,总氮均值高于3mg/L,总磷在0.11～0.57mg/L之间,重金属浓度很低。调查期共采集到浮游植物8门215种,平均密度2.119×107ind/L,采集到轮虫9科30种,优势种为针簇多肢轮虫(Polyarthratrigla);采集到枝角类8属10种,优势种为简弧象鼻溞(Bosmina coregoni);采集到桡足类8属10种,优势种为广布中剑水蚤(Mesocyclops leuckarti)。分析表明淀山湖昆山水域水质已呈富营养化状态,拆围后应加强水质管理,进行生态调控和治理已刻不容缓。
- 薛俊增蔡桢方伟吴惠仙陆建红
- 关键词：淀山湖浮游生物生态
- 基于病毒mRNA监测的传染性脾肾坏死病毒灭活快速检验方法建立及其应用被引量：1
- 2017年
- 为建立传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)灭活快速检验方法,从ISKNV感染CPB细胞系转录谱筛选并经q RT-PCR验证表达量最高的病毒ORF099基因作为快速检测靶基因。以质粒p MDORF099为标准品,采用q PCR方法绘制了CT值与质粒拷贝数的标准曲线,其线性方程为CT=–3.42lgx+39.455,最低检测限为3拷贝/μL,结果显示组间和组内变异系数均小于2%,表明该方法具有较高的灵敏度和较好的重复性。将ISKNV病毒悬液10倍稀释成100~103拷贝/m L,分别取1 m L病毒稀释液接种CPB细胞,在第7、9和11天提取细胞总RNA,经基因组DNA去除试剂盒去除残留DNA后采用qRT-PCR方法检测ORF099基因转录本,结果显示在第7天即可从接种1个拷贝病毒的细胞中检测出ISKNV ORF099转录本。将3个浓度梯度(0.05%、0.1%、0.2%)的甲醛灭活ISKNV制备的模拟样品以及实验室制备的3批次ISKNV细胞灭活疫苗样品接种CPB细胞9 d,采用上述快速检验方法进行检测。0.05%、0.1%甲醛灭活模拟样品可检测到ISKNV ORF099基因转录本,其他样品均未检测到。而细胞盲传实验显示,0.1%终浓度甲醛灭活ISKNV接种细胞盲传3代未出现CPE,鱼体安全实验显示接种鱼体后无临床发病症状和实验鱼死亡,表明本研究建立的病毒灭活快速检验方法比细胞盲传法和鱼体安全实验具有更高的灵敏度,与传统检测方法相比具有灵敏度高、耗时短、检测效率高等优点,对提高ISKNV灭活疫苗生产效率具有重要意义。
- 张醴溪杨圆圆方伟付小哲林强林强刘礼辉梁红茹刘礼辉吴志新梁红茹
- 关键词：传染性脾肾坏死病毒灭活疫苗MRNA荧光定量RT-PCR
