朱冠忠
- 作品数:12 被引量:20H指数:2
- 供职机构:南京医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省医学领军人才基金更多>>
- 相关领域:医药卫生电气工程更多>>
- LYRM1基因小干扰RNA表达载体的构建及干扰效率验证
- :构建LYRM1基因的沉默表达载体并在3T3-L1脂肪细胞中验证其干扰效率.方法:针对LYRM1 mRNA设计并合成三条siRNA干扰片段,以3T3-L1前体脂肪细胞为工具细胞分别单独转染siRNA干扰片段,共同转染si...
- 朱冠忠傅君芬曹新国郭锡熔
- 关键词:肥胖症
- LYRM1基因过表达对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响
- 目的:观察LYRM1基因过表达对脂肪细胞线粒体代谢的影响.方法:以3T3-L1前体脂肪细胞为工具,分别构建LYRM1基因过表达细胞株(LYRM 1-pcDNA3.1/myc-His B)和空载对照细胞株(pcDNA3.1...
- 季晨博史春梅郭锡熔徐广峰赵亚萍陈小慧朱冠忠朱金政张春梅
- LYRM1基因沉默对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响
- 目的:观察LYRM1基因沉默对脂肪细胞线粒体代谢的影响.方法:以3T3-L1前体脂肪细胞为研究对象,分别构建LYRM1基因沉默细胞株(pGPU6/NeoLYRM 1-shRNA)和空载细胞株(pGPU6/Neo-shRN...
- 季晨博史春梅郭锡熔徐广峰赵亚萍陈小慧朱冠忠朱金政张春梅
- LYRM1基因小干扰RNA表达载体的构建及干扰效率验证
- <正>目的儿童肥胖及其并发症的发病机制近年来受到儿科工作者的高度关注,其过程与遗传因素密切相关。LYRM1基因是本研究小组通过抑制性差减杂交技术发现并克隆到的一条新基因,其在肥胖者脂肪组织中表达显著上调。前期研究发现LY...
- 朱冠忠傅君芬曹新国郭锡熔
- 文献传递
- NYGGF4(PID1)基因表达沉默对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响
- 目的探讨NYGGF4(PID1)基因沉默对脂肪细胞线粒体代谢的影响。方法以3T3-L1前体脂肪细胞为研究对象,体外培养稳定转染NYGGF4(PID1)基因沉默载体(pGPU6/GFP/Neo-shRNA,NYGGF4-R...
- 史春梅季晨博朱冠忠陈玲杨蕾郭锡熔
- 多氯联苯暴露对斑马鱼脊柱形态及BMP-2、BMP-4基因表达的影响被引量:6
- 2011年
- 目的:探讨环境有机污染物多氯联苯暴露对斑马鱼生存率、脊柱形态及骨形态发生蛋白(bone morphogenetic pro-tein,BMP)-2、BMP-4基因表达的影响。方法:以斑马鱼为模式动物,配制0.125、1.000 mg/L 2个不同浓度的多氯联苯对斑马鱼胚胎进行暴露处理,同时设空白对照,观察多氯联苯暴露对斑马鱼幼鱼存活率、脊柱形态及BMP-2、BMP-4基因表达的影响。结果:①低浓度(0.125 mg/L)多氯联苯暴露120 hpf对斑马鱼幼鱼的存活率、脊柱形态无明显影响;②高浓度(1 mg/L)多氯联苯暴露120 hpf后,斑马鱼存活率明显下降且存活的斑马鱼大多出现了脊柱弯曲畸形的现象;③低、高浓度的多氯联苯暴露120 hpf后BMP-2及BMP-4基因表达均较空白对照组明显降低(P<0.05)。结论:不同浓度的多氯联苯暴露对斑马鱼骨骼发育均有一定的毒害作用,提示我们必须加强对多氯联苯等环境有机污染物的监测和控制。
- 鞠黎楼跃王艳萍史春梅朱冠忠郭锡熔
- 关键词:多氯联苯斑马鱼脊柱畸形BMP-2BMP-4
- NYGGF4基因过表达对成熟脂肪细胞线粒体形态及动力学的影响被引量:11
- 2011年
- 目的探讨NYGGF4基因过表达对成熟3T3-L1脂肪细胞线粒体形态及动力学的影响。方法以3T3-L1前体脂肪细胞为载体,建立NYGGF4基因稳定过表达细胞株,以空载质粒转染的细胞为对照,将前体脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞。采用透射电镜观察成熟脂肪细胞的线粒体形态,采用荧光定量PCR技术检测成熟脂肪细胞中线粒体融合基因(Mfn)1 mRNA、Mfn2 mRNA、线粒体动态相关基因(Drp)1 mRNA的表达水平。采用Western blot方法检测Mfn1蛋白、Mfn2蛋白、Drp1蛋白的表达水平。结果 1.电镜观察发现NYGGF4基因过表达的成熟脂肪细胞线粒体体积变小、数量明显减少,线粒体嵴断裂、减少、消失,部分线粒体肿胀,甚至呈空泡状;对照组成熟脂肪细胞的线粒体形态基本正常,线粒体嵴清晰可见,线粒体无明显肿胀、皱缩。2.NYGGF4基因过表达成熟脂肪细胞Mfn1 mRNA及Mfn1蛋白表达水平均显著高于对照组。3.NYGGF4基因过表达成熟脂肪细胞的Mfn2 mRNA、Drp1mRNA及相应蛋白表达水平与对照组比较差异均无统计学意义。结论在3T3-L1成熟脂肪细胞中,NYGGF4基因过表达可导致线粒体形态发生变化、数量减少,同时上调Mfn1 mRNA和Mfn1蛋白表达水平,提示NYGGF4基因在成熟脂肪细胞中过表达能影响细胞线粒体形态及动力学。
- 朱冠忠张春梅朱春朱金改赵亚萍秦大妮寇春兆郭锡熔
- 关键词:线粒体3T3-L1脂肪细胞
- NYGGF4(PID1)基因表达沉默对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响
- <正>目的探讨NYGGF4(PID1)基因沉默对脂肪细胞线粒体代谢的影响。方法以3T3-L1前体脂肪细胞为研究对象,体外培养稳定转染NYGGF4(PID1)基因沉默载体(pGPU6/GFP/Neo-shRNA,NYGGF...
- 史春梅季晨博朱冠忠陈玲杨蕾郭锡熔
- 关键词:线粒体代谢基因表达
- 文献传递
- STEAP4基因蛋白铁氧化还原酶活性分析被引量:1
- 2011年
- 目的分析肥胖相关基因STEAP4的铁氧化还原酶活性。方法体外温箱培养昆虫细胞株(Sf9),分别将pAcSec1-STEAP4转移载体和pAcSec1-vector转移载体与SapphireTM杆状病毒基因组混合后共转染Sf9昆虫细胞,通过G418药物筛选稳定表达STEAP4蛋白的细胞株,并抽提细胞总蛋白进一步应用Western blot技术验证其转染情况。应用分光光度计法检测铁氧化还原酶活性。应用SPSS11.5软件进行统计学分析。结果 Western blot技术证实STEAP4过表达细胞株构建成功;分光光度计法检测STEAP4铁氧化还原酶活性,STEAP4过表达组A值为5.182 5±0.230 4,空载组A值为1.615 0±0.822 6,STEAP4过表达组铁氧化还原酶活性明显高于空载组,差异有统计学意义(Pa<0.001)。结论 STEAP4基因蛋白具有铁氧化还原酶活性。
- 秦大妮季晨博张春梅史春梅朱冠忠郭锡熔
- 关键词:肥胖
- LYRM1基因沉默对成熟脂肪细胞线粒体形态及其相关基因的影响被引量:2
- 2012年
- 目的探讨LYRM1基因沉默对成熟脂肪细胞线粒体形态及相关基因的影响。方法以3T3-L1前体脂肪细胞为工具细胞,建立LYRM1基因沉默细胞株,以转染空载质粒的3T3-L1脂肪细胞作为阴性对照,将前体脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,采用油红O染色观察脂肪细胞分化状态,采用透射电镜观察成熟脂肪细胞的线粒体形态,采用荧光定量PCR技术检测成熟脂肪细胞中线粒体融合基因(Mfn)1/2 mRNA、线粒体动态相关基因(Drp)1 mRNA、线粒体分裂基因(Fis)1 mRNA的表达水平。结果 1.油红O染色诱导分化第8天的脂肪细胞,发现85%以上脂肪细胞已分化为成熟脂肪细胞,细胞形态大而圆,胞质含大量被油红O染成亮红色的脂滴,比较发现2组细胞无论脂滴的大小、数量均无显著差异。2.透射电镜观察发现2组细胞的线粒体形态基本正常,线粒体无明显肿胀、皱缩,线粒体嵴清晰可见,2组细胞间线粒体数目无明显差异。3.LYRM1基因沉默成熟脂肪细胞的Mfn2 mRNA表达水平显著高于对照组成熟脂肪细胞。4.LYRM1基因沉默成熟脂肪细胞的Mfn1 mRNA、Drp1 mRNA和Fis1 mRNA表达水平与对照组成熟脂肪细胞的表达水平无明显差异。结论 LYRM1基因沉默能够引起成熟脂肪细胞Mfn2 mRNA表达水平升高,对线粒体形态结构并无显著影响,提示LYRM1基因沉默可部分影响成熟脂肪细胞线粒体形态相关基因。
- 朱冠忠朱金改史春梅张敏曹新国郭锡熔
- 关键词:线粒体3T3-L1脂肪细胞