李三华
- 作品数：27 被引量：131H指数：6
- 供职机构：遵义医学院更多>>
- 发文基金：贵州省科学技术基金国家自然科学基金贵州省优秀青年科技人才计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 小鼠孤雌胚胎体外共培养体系的建立被引量：1
- 2011年
- [目的]在输卵管上皮细胞和/或垂体细胞饲养层下培养小鼠孤雌胚胎,探讨促进小鼠孤雌胚发育突破2-cell阻滞的机制,建立完善的培养体系。[方法]复式激活小鼠卵母细胞后分别在不同饲养层的CZB培养液中进行培养,并观察、比较各培养条件下孤雌胚胎的发育情况。[结果]培养至24 h,各组无显著差异,都有较高卵裂率。培养至48 h,2类饲养层细胞下的孤雌胚胎48-cell发育效果好,与单独一类饲养层细胞培养差异显著,与对照组比较差异极显著。培养至96 h,2类饲养层细胞下有49.4%（42/85）孤雌胚胎发育为桑囊胚,与其他各组比较差异极显著。[结论]含有输卵管上皮细胞＋垂体细胞的CZB培养液可有效促进小鼠孤雌胚胎发育突破2-cell阻滞,并进一步提高其发育率。
- 何志全陈伟李三华刘淑娟
- 关键词：共培养输卵管上皮细胞垂体细胞孤雌胚胎
- 医学基础综合实验技术课程教学改革探讨
- 2016年
- 医学基础综合实验技术是医学类硕士研究生阶段非常重要的学习内容,遵义医学院通过加强师资队伍建设、优化教学内容、调整教学方法和改革评价方式等改革措施,使学生在有限的时间内不仅掌握了实验技术,还培养了创新意识,提高了分析问题解决问题的能力,教学质量和效果得到明显改善。
- 李三华刘云
- 关键词：研究生教育教学改革
- 一种木兰脂素和SB590885联合组合物制备抗肝癌的药物
- 一种木兰脂素，英文名称：magnolin，和SB590885联合组合物制备抗肝癌的药物，本发明联合组合物能有效治疗肝癌，效果明显优于木兰脂素和SB590885单药使用。两者联用能促进肝癌细胞凋亡和造成肝癌细胞的细胞周期阻...
- 刘云肖毅王文洪喻昌燕李三华朱欣婷
- 文献传递
- 小鼠肌肉抑制素基因打靶载体的构建(英文)被引量：2
- 2012年
- [目的]构建小鼠肌肉抑制素(MSTN)基因打靶载体。[方法]从小鼠后肢肌肉组织中提取总RNA并合成cDNA,以cDNA为模板克隆MSTN的编码区,以5’UTR及上游共3kb区域和3’UTR及下游共1.4kb区域分别作为长同源臂和短同源臂插入到质粒pBluescript_SK+中,以neo基因和HSV-tk基因作为正负筛选基因构建MSTN基因的打靶载体pLoxP-5N3T-M。[结果]经酶切和测序鉴定,构建的小鼠MSTN基因打靶载体pLoxP-5N3T-M符合设计要求。[结论]成功构建小鼠MSTN基因打靶载体pLoxP-5N3T-M。
- 李三华何志全陈全利凌锌
- 关键词：打靶载体同源重组
- 近似体腔温度不宜体外培养大鼠A型精原细胞被引量：3
- 2011年
- 背景:温度会影响体外培养精原细胞的增殖与凋亡。目的:观察不同体外培养温度对A型精原细胞细胞周期及增殖相关基因c-kit、CyclinD3的影响。方法:通过两步酶消化法分离大鼠生精细胞,分别置于32,37℃条件下与支持细胞进行体外共培养,观察其形态及细胞数变化等生长特性;培养第8天采用非连续密度梯度离心、差异性贴壁分离富集A型精原细胞。结果与结论:体外培养第1天,32,37℃组均可见悬浮的呈圆形或卵圆形的生精细胞和贴壁的呈长梭形或不规则形的支持细胞;从第4天开始,37℃组生精细胞数、生长状态逐渐降低,第8天时,37℃生精细胞数明显低于32℃组(P<0.05);体外培养第8天,32℃组处于S期A型精原细胞所占比例明显高于37℃组(P<0.05),32℃组A型精原细胞c-kit、CyclinD3 mRNA及蛋白的相对表达量均高于37℃组(P<0.05)。说明在37℃这种近似体腔的温度下体外培养生精细胞会抑制精原细胞的增殖。
- 邓呈亮王达利李三华朱晶晶唐修俊龚德彰
- 关键词：体外培养细胞周期C-KIT
- 医学基础综合实验技术教学现状与对策被引量：6
- 2018年
- 培养一名适应科研需求的医、药类硕士研究生是医学院校的重要任务。医学基础综合实验技术是研究生学习阶段的重要课程。为了培养具有一定科研素养的研究生,以医学基础综合实验技术课程教学为例,分析了研究生的学习现状,并从优化教学内容、加强师资队伍建设、丰富教学手段、建立合理评价体系等方面探讨如何以学生为主体,通过教学改革激发学生的学习主动性和创造性。
- 刘云刘云姜念李三华
- 关键词：研究生教学教学改革
- 近红外成像用于双向电泳前的蛋白质快速定量
- 2017年
- 双向电泳(Two-dimensional Electrophoresis,2D)是蛋白质组学研究过程中的常用技术,而蛋白质样品的准确定量是做好双向电泳的前提条件。由于双向电泳的蛋白质样品在定量时存在试剂兼容性的问题,故需使用GE或Bio-rad公司研发的双向电泳专用蛋白质定量试剂盒,但此类试剂盒价格高昂且操作繁琐,因此亟待开发一种快速、准确、成本低廉的蛋白质定量方法。通过研究发现,蛋白质溶液与考马斯亮蓝-G250混合后,在近红外荧光成像系统680nm波长下可以被激发出荧光,且当蛋白质浓度在0.01~0.2mg·mL^(-1)范围内时,其荧光强度与蛋白质浓度具有很好的线性关系。基于此特点,建立了一种以96孔板为载体,利用近红外成像技术对蛋白质样品进行定量的方法,该方法可用于双向电泳前蛋白质样品的快速定量。
- 刘云曹嵩李科李三华宋长伟覃成朱欣婷
- 关键词：考马斯亮蓝双向电泳
- 半乳糖基化壳聚糖-聚乙烯亚胺递送siRNA对肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu中MRE11表达的影响被引量：2
- 2017年
- 背景:壳聚糖是一种常用的非病毒载体,具有良好生物相容性、生物可降解性、低毒等优点,但其基因递送能力相对较弱,常需要进行结构衍生修饰。目的:观察半乳糖基化壳聚糖-聚乙烯亚胺(LA-CS-PEI)在肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu中递送si RNA的能力及对减数分裂重组蛋白11(MRE11)表达的影响。方法:1将肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu或人肝细胞HL-7702分别与0,10,20,40,80,100 mg/L的LA-CS-PEI或壳聚糖-聚乙烯亚胺共培养24 h,检测细胞存活率;2将LA-CS-PEI与si RNA-FAM分别以0,2,4,8,16,32的质量比混合,制备复合转染颗粒。以复合转染颗粒转染肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu,48,72,96 h后,以转染效率筛选最佳质量比与转染时间,进行下步实验;3以复合转染颗粒、LA-CS-PEI、si RNA分别转染肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu 48 h后,以未转染的细胞为空白对照,检测MRE11基因及蛋白的表达。结果与结论:1与壳聚糖-聚乙烯亚胺相比,LA-CS-PEI毒性更低,且当LA-CS-PEI质量浓度高达100 mg/L时,仍表现出很低的细胞毒性;2LA-CS-PEI与si RNA-FAM质量比为4和8时转染效率均达95%以上,入胞效率极高,转染48 h转染效果最好,所以后续实验选择质量比为8,转染时间为48 h的复合转染颗粒;3复合转染颗粒组MRE11基因及蛋白表达低于LA-CS-PEI组、si RNA组、空白对照组(P<0.05);4结果表明,LA-CS-PEI能实现si RNA的有效递送,并能沉默肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu中的MRE11基因。
- 刘云潘杰董伟惠景李三华范芳朱欣婷
- 关键词：壳聚糖聚乙烯亚胺去唾液酸糖蛋白受体
- 一种同时多点切取菌饼的装置
- 同时多点切取菌饼的装置，能一次性对整个培养皿或者目标区域的培养物切取相同规格菌饼。包括耐热棒状手柄，有一定隔热的金属板和带弹簧切取菌饼管。在其最上端有一个可进行高温灭菌的橡胶棒状手柄体，通过螺栓与一个耐反复灼烧圆柱形金属...
- 潘峰李三华刘云惠景姜念喻昌燕
- 文献传递
- 杜仲总黄酮对成骨细胞增殖及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响被引量：34
- 2011年
- 目的了解杜仲总黄酮对新生大鼠颅骨体外培养成骨细胞的增殖及合成胶原蛋白的影响。方法杜仲总黄酮以质量浓度10,100,200和400μg·mL-1分别加入从2 d的SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用MTT法评价对成骨细胞增殖的影响;采用激光共聚焦扫描显微镜检测Ⅰ型骨胶原蛋白的表达情况。结果与对照组比较,质量浓度10200μg·mL-1的杜仲总黄酮能明显促进成骨细胞的增殖（P〈0.05）,但并不能显著地促进成骨细胞合成Ⅰ型胶原蛋白。
- 李三华何志全陈全利凌锌刘坤祥
- 关键词：黄酮成骨细胞
