李冰香
- 作品数：10 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理更多>>
- 一种检测血清中抗EV‑D68病毒抗体的方法
- 本发明公开了一种检测血清中抗EV‑D68病毒抗体的方法。提取EV‑D68病毒基因组RNA，通过反转录和PCR扩增反应得到VP1基因的cDNA，将其克隆到克隆载体，再将转入表达载体得到重组表达质粒，转化宿主菌并用IPTG诱...
- 刘龙丁郑惠文孙明王晶晶郭磊李冰香龙海亭李洪哲范海涛杨泽宁储曼曼黄星
- 文献传递
- 浅析制药企业中验证管理工作的开展
- 2011年
- 制药企业验证管理意义重大，但在执行中面临执行力度不够等方面的问题，可以从加强培训，强化管理，强化监督等方面推动验证管理工作的深入。
- 李冰香
- 肠道病毒EV-D68表面结构蛋白VP2、VP3的原核表达及其特异性分析
- 2018年
- 目的原核表达肠道病毒68型(enterovirus D68,EV—D68)表面结构蛋白VP2、VP3,分析其亲和力和结合力,得到具备高结合力的、可结合特异性记忆性B细胞的EV-D68病毒表面结构蛋白。方法采用PCR法扩增EV-D68病毒的VP2、VP3蛋白基因,插入原核表达载体pGEX-5X-1,构建重组表达质粒pGEX-5X-1-VP2和pGEX-5X-1-VP3,转化到工程菌Rosetta(DE3)pLy中,异丙基硫代半乳糖苷(i-sopropyl β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,表达的重组蛋白形成包涵体,经超声洗涤、透析复性;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel immunosorbent,SDS-PAGE)电泳、westem-blot鉴定重组蛋白;竞争性酶联免疫吸附检测(eIlzyme linked immunosorbent assay,EusA)检测蛋白VP2、VP3的蛋白活性和亲和力;藻红蛋白荧光素(phycoeryth面,PE)标记VP2和VP3重组蛋白,结合CD19-APC、CD27-nTc抗体,流式细胞术检测VP2、VP3蛋白结合特异性记忆性B细胞的情况。结果成功构建出重组表达质粒pGEX-5X-1-VP2和pGEX-5X-1-VP3,通过双酶切鉴定及测序分析,确认表达载体构建正确,通过表达纯化,成功获得EV-D68的VP2、VP3蛋白,SDS-PAGE电泳灰度扫描显示,VP2蛋白的纯度可达80%,VP3蛋白的纯度可达75%;经westem-blot和EusA鉴定,均有抗原特异性;通过竞争EusA检测,VP2亲和力常数为2.7×10^7M^-1,为中等亲和力;VP3亲和力常数为3.25×10^6M^-1,为低亲和力;通过流式细胞术可以检测到病毒攻击小鼠后脾脏细胞中的特异性记忆性B细胞。结论成功原核表达,复性纯化得到EV-D68VP2、EV-D68VP3蛋白,两个蛋白均具有较强的抗原特异性,利用流式细胞仪能检测到特异性记忆性B细胞。最终获得了具有较强结合能力,可用于分选抗原特异性记忆性B细胞的EV-D68表面结构蛋白VP2、VP3,为研究VP2、VP3蛋白的中和抗原表位及其广谱中和抗体的分选检测打下了基础。
- 龙海亭孔璟郑惠文李冰香张寒李恒刘玉斌范海涛于丽廖国阳孙明刘龙丁
- 关键词：VP2蛋白VP3蛋白原核表达
- HIV1型C/B亚型DNA、MVA疫苗免疫原性和免疫策略研究
- 研究背景:HIV的基因组中含有gag、pol和env等基因,gag基因为组成病毒核心的核酸核蛋白的编码,pol基因为复制逆转录酶的编码,其编码的蛋白是联接包膜与核心的跨膜蛋白,这些基因编码蛋白在各种类型的艾滋病毒中是一致...
- 孙明蒋国润周东霞王玺李冰香黄小琴史荔褚嘉祐
- 文献传递
- 基于受体结合域的新型冠状病毒亚单位疫苗的研发策略
- 2023年
- 2019年底由新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒感染疫情暴发,为预防病毒感染,降低病毒的感染率,减少重症率及死亡病例,各国持续加快推进多种类型的疫苗研发及接种。其中,蛋白亚单位疫苗以其安全、高效、可规模化生产等优点,受到了广泛的关注。截至2023年初,全球共有36种亚单位疫苗进入Ⅲ期临床研究,19种亚单位疫苗已被授权紧急使用。本文通过分析比较新型冠状病毒不同蛋白组分作为新型冠状病毒疫苗靶点设计的优缺点,聚焦基于受体结合域(receptor binding domain,RBD)的亚单位疫苗设计策略,从蛋白结构、表达系统、纯化方法、佐剂类别及预防效果等方面,对不同的RBD亚单位疫苗的研究进展及临床结果进行了概述,并对RBD亚单位疫苗开发中可能遇到的挑战进行了探讨,以期为新型冠状病毒及其他病原体亚单位疫苗的设计研发提供可行思路。
- 马良李冰香王红叶孙明
- 关键词：新型冠状病毒佐剂
- 一种利用高密度CHO-S细胞无血清培养表达制备双因子抗体的方法
- 本发明公开了一种利用高密度CHO‑S细胞无血清培养表达制备双因子抗体的方法，包括以下步骤：S1：首先从液氮中取出装CHO‑S细胞离心管，并在37℃水浴中快速解冻；S2：将CHO‑S细胞离心管完全解冻后，再用70％乙醇清洁...
- 孙明王红叶李冰香朱小永
- 文献传递
- HIV-1 C/B’亚型多价重组MVA病毒疫苗免疫原性的研究
- 2008年
- 目的:检测人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)C/B’亚型与痘苗病毒安卡拉株(MVA)的多价重组疫苗的免疫原性,此疫苗中包含HIV-1C/B’CRF株的5个基因,分别是env,gag,pol,nef,tat。方法:设105pfu/ml,106pfu/ml,107pfu/mlADMVA3个剂量组,用ELISPOT方法检测细胞免疫反应。同时,以Gag蛋白作为包被抗原,使用间接ELISA的方法检测体液免疫反应。结果:免疫后的小鼠对插入基因env,gag,pol和nef所表达蛋白均产生了特异性细胞免疫应答,且免疫效果与免疫剂量呈正相关。ELISA结果表明,MVA重组疫苗免疫诱导产生了特异性体液免疫,抗HIV-1Gag的抗体滴度与免疫次数和免疫剂量都存在正相关性。结论:多价MVA重组疫苗能有效地诱导小鼠产生特异的细胞免疫和体液免疫反应。
- 高燕孙明蒋国润张银川王玺李冰香黄小琴陈丹周东霞褚嘉祐
- 关键词：HIV-1免疫原性
- 抗HIV痘苗病毒载体(MVA)生产及纯化工艺的研究
- 研究背景:MVA是一种宿主自限性的病毒株,来自疫苗病毒Ankara株,是痘苗病毒科正痘病毒属成员,是目前已知结构最为复杂的病毒之一,其在鸡胚成纤维细胞(CEF)中进行多代次传代后,失去了包括宿主决定基因在内的大量DNA片...
- 孙明李冰香王玺蒋国润张银川黄小琴史荔周东霞褚嘉祐
- 文献传递
- 非特异性抗体80R的改造对SARS-CoV-2识别增强的研究
- 2022年
- 目的利用抗体工程技术快速获得严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的识别抗体。方法针对SARS-CoV抗体80R,因其不能很好地识别SARS-CoV-2-S蛋白,通过不同长度氨基酸重复和延伸等策略对80R的重链功能区进行了突变改造。结果改造共获得了12个突变抗体,通过ELISA检测表达的抗体,发现Mu8对SARS-CoV-2的S蛋白识别增强,微量热泳动检测显示Mu8具备了相应的抗体亲和力,K_(d)为(7.29±2.34)μmol/L。结论获得的突变抗体Mu8能够识别、结合SARS-CoV-2的S抗原,该策略为新发病原体识别抗体的快速制备提供了一种可行思路。
- 李冰香王红叶朱小永王晶晶孙明
- 一种抗EV-D68病毒的单克隆抗体及其制备和应用
- 本发明公开了一种抗EV‑D68病毒的单克隆抗体及其制备和应用。首次运用单个B细胞分离技术对EV‑D68病毒感染的恒河猴进行特异性单个记忆B细胞的分选，获得了配对的抗体轻重链基因，并进一步筛选得到具有中和活性的EV‑D68...
- 刘龙丁孙明郑惠文郭磊王晶晶李冰香李恒杨泽宁李洪哲范海涛储曼曼黄星李楠杨瑾溪吴琼雯
- 文献传递
