李建芳
- 作品数：42 被引量：39H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金国家科技支撑计划昆明市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 壬二酸的应用、含有壬二酸的佐剂和疫苗剂
- 本发明涉及壬二酸的应用、含有壬二酸的佐剂和疫苗剂，所述壬二酸作为佐剂在疫苗中的用量为：每单份疫苗液中含有0.5～3mg的壬二酸。含有壬二酸的佐剂，由5～30μL的浓度为75v/v%的乙醇和0.5～3mg的壬二酸组成。本发...
- 胡云章李晓红王海漩胡凝珠乌美妮孙静李彦涵李建芳施建东
- 重组人LIF融合蛋白表达纯化及其活性鉴定
- 2013年
- 目的:原核表达重组hLIF融合蛋白并进行诱导表达、纯化及活性鉴定。方法:将hLIF基因克隆至pThioHisA载体,构建融合表达载体pThioHisA-hLIF,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经亲和层析后,Western blot检测目的蛋白的特异性。用小鼠胚胎干细胞脱饲养层培养对纯化后的重组hLIF融合蛋白进行生物活性的鉴定。结果:降低诱导温度和延长诱导时间能增加hLIF融合蛋白的可溶性表达,纯化后的重组蛋白纯度大于95%,Western blot检测显示了良好的特异性。在脱饲养层细胞培养条件下,添加纯化的hLIF融合蛋白能够有效的维持小鼠胚胎干细胞的未分化状态。结论:重组hLIF融合蛋白可在大肠杆菌中高效表达,具有良好的特异性,为干细胞研究及hLIF蛋白的其他功能研究奠定了基础。
- 孙静王斌段志青胡凝珠李建芳李彦涵胡云章
- 关键词：小鼠胚胎干细胞生物活性鉴定
- 幽门螺杆菌napA基因在乳酸菌中的表达及免疫原性分析被引量：14
- 2008年
- 实验目的是在乳酸菌中表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)中性粒细胞激活蛋白(NAP),口服免疫小鼠后检测其免疫原性。在实验中利用了分子克隆技术构建携带nap基因的重组原核表达质粒pNICE:sec-nap,将重组质粒转化乳酸菌NZ9000株,筛选鉴定阳性菌落,诱导表达的NAP蛋白用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。将雌性ICR(CV级)小鼠随机分为4组,分别用PBS、携带空质粒的乳酸菌、携带pNICE:sec-nap的乳酸菌、灭活的H.pylori灌胃。免疫7次后检测其特异性IgG和IgA的产生。成功扩增了nap基因并构建了重组原核表达质粒pNICE:sec-nap,转化乳酸菌NZ9000后经nisin诱导可表达Mr约17kDa的重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白量的9.5%,表达的蛋白能与兔抗H.pylori血清特异性反应,具有良好的免疫原性。携带pNICE:sec-nap质粒的乳酸菌刺激产生的IgG水平明显高于携带空质粒组,与灭活H.pylori组没有明显的差异,但其刺激产生的IgA水平明显高于其他组。结果说明表达NAP蛋白的乳酸菌口服免疫小鼠后,能够刺激小鼠产生特异的IgG和IgA,对幽门螺杆菌疫苗的研究开发具有理论的意义。为乳酸菌作为抗原递送载体的研究和H.pylori口服疫苗的开发提供一定的实验基础。
- 李建芳彭正华肖红剑罗娜杨增福李健峰徐维明
- 关键词：幽门螺杆菌乳酸乳球菌中性粒细胞激活蛋白
- 新型疫苗佐剂关键技术创建及应用
- 胡云章胡凝珠孙静王海漩乌美妮施建东李彦涵李建芳孙晓梅段志清兰芸
- 项目组自2003年至今，在“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”等6项国家及云南省科技计划项目支持下，针对传统疫苗佐剂筛选仅靠“试错法”筛选的简单模式、缺乏充分理论依据的问题，建立了新型佐剂主动筛选理论模式，为筛选疫苗佐...
- 关键词：
- 关键词：疫苗佐剂中医药理论分子标志物传染病防治
- 甲磺酸去铁胺佐剂及含甲磺酸去铁胺佐剂的疫苗
- 本发明提供一种甲磺酸去铁胺佐剂及含有甲磺酸去铁胺佐剂的疫苗。所述含甲磺酸去铁胺佐剂的疫苗是：每单份疫苗剂中含有0.6～8mg的甲磺酸去铁胺佐剂。甲磺酸去铁胺佐剂长期应用于临床治疗，毒副作用小，在免疫剂量范围内使用是安全可...
- 胡凝珠罗婷王海漩胡云章李彦涵李建芳
- 文献传递
- 甘草酸二铵佐剂及含甘草酸二铵佐剂的疫苗
- 本发明提供一种甘草酸二铵佐剂及含有甘草酸二铵佐剂的疫苗。所述含有甘草酸二铵佐剂的疫苗是：每单份疫苗剂中含有0.1mg～1mg的甘草酸二铵佐剂。本发明提供的佐剂效果良好、成本低廉、性质稳定、安全可靠，可以作为疫苗佐剂。该佐...
- 胡凝珠王霄王海漩胡云章李彦涵李建芳
- 文献传递
- 一种1型糖尿病疫苗及其制备方法
- 本发明涉及一种1型糖尿病疫苗及其制备方法，属于生物技术领域。本发明将GAD65的190‑320位氨基酸序列及HSP60的437‑460位的P277肽通过辅助性Th通用表位及间隔子序列插入T7噬菌体DNA衣壳蛋白10B编码...
- 孙静胡云章胡凝珠李建芳乌美妮施建东李彦涵李志远马春丽
- 文献传递
- 一种2型糖尿病疫苗的构建和制备方法
- 本发明提供一种2型糖尿病疫苗的构建和制备方法，是在含有启动子ATG的人CXCL5活性蛋白编码基因插入酵母DNA，使之分泌表达人CXCL5活性蛋白，该蛋白经免疫进入机体后，诱导针对噬菌体和CXCL5或其表位的特异性抗体，抗...
- 胡云章胡凝珠王海漩李彦涵李建芳
- 文献传递
- 一种新型广谱流感病毒亚单位疫苗的表达与纯化被引量：2
- 2007年
- 通过引物设计,利用重叠延伸PCR(OE-PCR)和搭桥PCR方法扩增得到A型流感病毒M2蛋白缺失跨膜区基因以及HA多表位基因,分别克隆测序后以pET28a+为表达载体构建重组质粒pET28a+-M2d-HA。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选获得了高效表达流感病毒缺失跨膜区M2蛋白和HA多表位蛋白片段重组融合蛋白的工程菌,表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的45%左右。表达的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经亲和层析和阴离子交换层析纯化后复性,得到纯度在90%以上的目的蛋白。Westernblot结果显示纯化的重组蛋白具有较好的抗原性和特异性。为进一步研究广谱型流感病毒亚单位疫苗奠定了基础。
- 魏义举龙海亭杨旭李建芳毕研伟李健峰徐维明
- 关键词：流感病毒亚单位疫苗多表位表达纯化抗原性
