李柏良 作品数:42 被引量:197 H指数:9 供职机构: 东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 医药卫生 更多>>
胆盐水解酶基因在植物乳杆菌KLDS1.0386中的表达研究 被引量:4 2016年 本文从转录水平上研究了四种胆盐水解酶基因在植物乳杆菌KLDS1.0386中不同生长阶段的表达情况,并且分别以不同浓度的牛磺脱氧胆酸盐和甘氨脱氧胆酸盐为底物,以16s r RNA作为内参基因,利用实时荧光定量PCR技术研究不同浓度底物下的胆盐水解酶基因(bsh1、bsh2、bsh3、bsh4)表达的变化规律。结果显示,内参基因和目的基因的扩增效率均在90%~105%之间,说明目的基因的表达量可以被很好的反应出来。通过实时荧光定量PCR结果分析可知,植物乳杆菌KLDS1.0386中的4种胆盐水解酶基因随着生长时间的延长,表达量显著增加,而且在两种胆盐中都表达,基因表达量都被不同剂量(1%、2%、3%)的胆盐上调,上升幅度随着胆盐浓度的增加表现出极显著的增加趋势,而且胆盐不同,同浓度时每个基因的表达量也各不相同,在甘氨脱氧胆盐中的表达量普遍高于牛磺脱氧胆盐。 唐雅茹 李柏良 李婉 于上富 霍贵成关键词:胆盐水解酶 基因表达 响应面法优化乳酸乳球菌KLDS4.0325产叶酸的培养基成分及发酵条件 被引量:12 2020年 探究并提高实验室保藏的分离自新疆酸马奶的乳酸乳球菌KLDS4.0325的产叶酸能力。首先基于实验室前期对KLDS4.0325的全基因组测序结果,对其在基因水平表现出的产叶酸能力进一步运用高效液相色谱法进行测定。然后,以叶酸产量为响应值,通过响应面法对发酵条件进行优化,确定最优发酵条件。利用单因素试验,确定最佳氮源为酵母浸粉,最佳碳源为葡萄糖,主要影响因素为初始pH值、对氨基苯甲酸(p-aminobenzoic acid,pABA)添加量、谷氨酸添加量与温度。通过Box-Behnken响应面试验,确定最优发酵条件为初始pH 5.40、pABA添加量42.0 mg/L、谷氨酸添加量6.30 g/L、温度35.40℃,在此条件下叶酸产量为0.814μg/mL,是优化前(0.260μg/mL)的3.13倍。通过对乳酸乳球菌KLDS4.0325培养基成分及发酵条件的优化,得出该菌株产叶酸的最优培养基成分及发酵条件,为天然叶酸的产业化生产与应用提供了理论支持。 焦雯姝 关嘉琦 史佳鹭 李柏良 陆婧婧 闫芬芬 李娜 占萌 霍贵成关键词:响应面法 培养基成分 发酵条件 产细菌素乳酸菌的筛选及相关基因分析 被引量:1 2016年 以Escherichia coli为指示菌,采用双层平板法从7株乳酸菌中筛选出一株高产细菌素的优良菌株KLDS 4.0325;通过菌体形态观察及16S r RNA序列分析鉴定菌株KLDS 4.0325为乳酸乳球菌,通过分析该菌株全基因组序列,预测其细菌素合成基因簇有AOI_1和AOI_2,并分别做了简要介绍,在细菌素数据库中比对,均属于二类细菌素中的Lactococcin_B_(LCN-B)型细菌素;最后通过向指示菌菌液中添加无细胞发酵上清液进一步证明了该菌株所产细菌素对指示菌的作用方式是杀菌。 王娜娜 梁宏彰 李婉 李柏良 丁秀云 霍贵成关键词:细菌素 可溶性大豆多糖的功能特性与应用研究进展 2024年 可溶性大豆多糖是从大豆原料中提取的水溶性多糖类物质,在我国作为食品添加剂进行管理,国内应用领域主要集中在酸性饮料产品中,国外市场还应用于调制乳、液体配方乳、调制乳粉、酱料、寿司等产品中。文章对其生产工艺、与酪蛋白的相互作用机制、在食品医药领域上的应用及国内外市场上代表性产品进行了概述对比分析,从分子结构上对比分析了与果胶、羧甲基纤维素钠的不同,列举了现有的生产企业,对比分析他们生产工艺,分析了乳化稳定性、品质改良、成膜性以及其他四个功能特性方面的研究状况,并分析可溶性大豆多糖在产品中可能所起的作用,最后就实际应用方面开发研究提出参考建议,以期为后续理论研究、生产研究和实际开发应用研究提供参考。 于上富 李柏良 刘文慧 申寒 李绍振关键词:可溶性大豆多糖 生产工艺 乳化稳定性 成膜性 益生菌对促进肠道发育作用的研究进展 被引量:14 2020年 肠道细胞的正常增殖分化、黏膜屏障完整性作为评价肠道发育的重要指标,很大程度上决定了人和动物的能量稳态和整体生长性能,是决定人和动物生理稳态的根本因素。而良好的微生物-宿主通讯机制及其共生关系对肠道发育及稳态具有积极作用。近年来国内外大量研究显示肠道微生物参与调控肠道增殖分化,其中益生菌(主要是乳酸菌)发挥了极重要的益生作用。本文详述了肠道组成及发育机制,并从益生菌的自身组分(如菌毛蛋白、细胞壁成分等)、代谢产物(丁酸及其盐类)、肠道菌群的多样性和定植状态3个方面对益生菌促进肠道上皮细胞与肠道干细胞增殖分化、增强黏膜屏障功能、维持肠道良好形态的功能及其干预机制的研究进展进行综述,旨在加深和完善关于益生菌调控肠道发育的认识。 关嘉琦 李柏良 焦雯姝 李慧臻 岳莹雪 李娜 史佳鹭 赵莉 霍贵成关键词:益生菌 肠道发育 细胞壁成分 丁酸盐 肠道菌群 动物双歧杆菌乳亚种XLTG11对小鼠肠道的益生作用 2024年 该研究探讨了动物双歧杆菌乳亚种XLTG11对小鼠肠道的益生作用。将48只BALB/c小鼠适应性喂养7 d后,随机分成空白对照组、XLTG11低剂量组、XLTG11中剂量组和XLTG11高剂量组。其中受试组每只分别灌胃1.6×10^(6)、1.6×10^(7)和1.6×10^(8)CFU的动物双歧杆菌乳亚种XLTG11菌粉,空白对照组小鼠灌胃等体积的生理盐水。灌胃14 d后,测定小鼠体质量、肠道菌群、组织病理、肠道屏障、肠道通透性和短链脂肪酸含量。结果表明,与空白对照组相比,高剂量组小鼠体质量增加14.51%,小鼠肠道的菌群丰度和菌群结构发生改变,小鼠粪便中双歧杆菌和乳杆菌的数量分别增加29.32%和33.88%,产气荚膜梭菌的数量下降24.49%,并且低、中、高剂量组紧密连接蛋白和黏蛋白的表达量增加,小鼠血清中LPS和D-乳酸含量下降,表明动物双歧杆菌乳亚种XLTG11可以增强肠道屏障功能,降低肠道通透性。此外,小鼠盲肠中短链脂肪酸的含量分别升高13.66%、43.04%、48.58%。综上,该研究表明动物双歧杆菌乳亚种XLTG11能够对小鼠肠道产生健康益处,并对肠道菌群具有调节和改善作用。 汪小东 刘铭洋 翟纯毅 唐宏伟 李柏良关键词:肠道菌群 组织病理 肠道屏障 短链脂肪酸 具有抑制大肠杆菌作用的乳酸菌的初步筛选及其益生潜能的研究 被引量:9 2016年 为了筛选出具有抑制致病性大肠杆菌作用的乳酸菌,本实验以大肠杆菌ATCC25922作为指示菌,抑菌实验采用牛津杯法。通过发酵上清液对大肠杆菌ATCC25922的抑菌实验,初步筛选出三株乳酸菌发酵上清液对大肠杆菌ATCC25922具有抑制作用,经过对16S rRNA基因进行系统发育分析,发现这三株乳杆菌均为嗜酸乳杆菌。随后又对这三株嗜酸乳杆菌进行了耐酸、耐胆盐及抗生素敏感性实验。结果表明:KLDS1.0901酸耐受性最强,而KLDS1.0902和KLDS1.1003与Lactobacillus acidophilus NCFM酸耐受性接近;对照菌株Lactobacillus acidophilus NCFM胆盐耐受能力最强,KLDS1.0901和KLDS1.1003与Lactobacillus acidophilus NCFM胆盐耐受能力差异不显著,KLDS1.0902胆盐耐受能力最弱;对于抗生素敏感性,三株嗜酸乳杆菌展现出类似的结果,对氨基糖苷类的抗生素展现出耐受;相比于KLDS1.0902,KLDS1.0901和KLDS1.1003有着更好的益生作用潜能,因此随后将对这两株菌在细胞和动物模型中对抗病原菌的作用进行进一步的研究。 杜金城 徐敏 李柏良 丁秀云 霍贵成关键词:嗜酸乳杆菌 基于基因组学分析嗜热链球菌KLDS SM的蛋白质水解系统和氨基酸合成途径 被引量:5 2018年 为从遗传水平上探究嗜热链球菌KLDS SM蛋白质水解和氨基酸合成的能力,首先基于Illumina Hiseq 2500与Pacbio RSII测序平台对嗜热链球菌KLDS SM进行全基因组测序并绘制基因组图谱;随后从胞外蛋白酶、转运系统、胞内肽酶以及氨基酸合成等方面所涉及的基因进行生物信息学分析;最后对15株已完成全基因组测序的嗜热链球菌的氨基酸合成能力进行比较基因组学研究。结果表明:菌株KLDS SM的基因组由一个1 856 787 bp环状染色体组成,GC含量为39.08%,含有1 732个蛋白质编码基因;菌株KLDS SM具有完整的蛋白水解系统和8种氨基酸的合成能力;15株嗜热链球菌在氨基酸合成方面上相对保守,仅在组氨酸合成途径存在较大的差异。本研究为该菌株氮代谢能力的挖掘提供了理论依据,并在将其开发为发酵剂方面上具有一定指导意义。 李柏良 丁秀云 靳妲 刘飞 刘飞 李娜 李娜 赵莉关键词:嗜热链球菌 基因组 生物信息分析 蛋白质水解 混合乳杆菌对脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞的抗炎作用 2021年 利用细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞形成炎症模型,评价混合乳杆菌对RAW264.7细胞的抗炎效果。在LPS刺激的RAW264.7细胞培养基中,添加混合乳杆菌,分析一氧化氮(Nitric oxide,NO)、前列腺素E2(PGE2)、白介素(Interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)-α的分泌量;利用Real-time PCR法检测诱导型一氧化氮合成酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环氧化酶(Cyclooxygenase-2,COX-2)、IL-1β、IL-6、TNF-α和Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)的mRNA表达水平。结果显示,与LPS组比较,混合乳杆菌可以显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO、PGE2、IL-1β、IL-6和TNF-α的含量;RT-PCR结果显示混合乳杆菌能抑制iNOS、COX-2、IL-1β、IL-6和TNF-α和TLR4的mRNA的表达。综上所述,混合乳杆菌可以有效抑制LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应,抑制炎症因子的分泌和表达。 史佳鹭 李柏良 岳莹雪 关嘉琦 赵莉 梁胜男 赵丽娜 霍贵成关键词:RAW264.7细胞 炎症因子 抗炎 肠道内产丁酸细菌及其产物丁酸生理功能的研究进展 被引量:25 2021年 产丁酸细菌是利用糖类发酵产生丁酸的一类细菌,代表种是丁酸梭菌。在动物及人类肠道内存在的产丁酸细菌主要是梭菌属、柔嫩梭菌属、罗斯式菌属、真菌属及丁酸弧菌属。本文一方面介绍部分肠道内产丁酸细菌的种类、特点及膳食纤维的摄入和肠道益生菌对产丁酸细菌的影响,另一方面对其主要代谢产物丁酸在体内的生理功能进行探讨,以期为产丁酸细菌的应用及产品开发提供理论依据。 梁胜男 柯楚新 黄鹤 关嘉琦 赵丽娜 李柏良 霍贵成关键词:生理功能