杨秋波
- 作品数:27 被引量:44H指数:5
- 供职机构:首都医科大学附属北京口腔医院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市教育委员会科技发展计划面上项目更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学更多>>
- 检测牙龈卟啉单胞菌胶体金试纸条的制备与应用
- 2024年
- 目的制备简单、快速检测唾液P.gingivalis的胶体金试纸条。方法采用识别P.gingivalis不同表位的单抗E10、G3建立双抗夹心ELISA体系,鉴定双抗夹心ELISA识别P.gingivalis的特异性及敏感性。利用单抗E10、G3制备胶体金试纸条,检测胶体金试纸条识别P.gingivalis的特异性。应用胶体金试纸条与实时定量PCR检测受试者唾液P.gingivalis并比较二者检测P.gingivalis的差异。结果单抗E10、G3建立双抗夹心ELISA体系可特异性识别P.gingivalis,识别敏感性≥5×10^(7)CFU/mL。单抗E10和G3制备的胶体金试纸条特异性识别P.gingivalis。胶体金试纸条与实时定量PCR分别检测受试者唾液P.gingivalis,试纸条与PCR检测对牙周炎的检出效果无统计学差异,检测P.gingivalis的细菌数量无统计学差异。胶体金试纸条检测唾液P.gingivalis,牙周炎组、牙周健康组阳性率分别为40%、10%。结论制备出检测P.gingivalis的胶体金试纸条,可特异性检测P.gingivalis,具有检测唾液中P.gingivalis的潜力。
- 徐玉陈园园朱斐然宋琳李华杨秋波
- 关键词:胶体金试纸条牙周炎牙龈卟啉单胞菌单克隆抗体
- 牙龈卟啉单胞菌血红素结合蛋白的研究被引量:3
- 2006年
- 牙龈卟啉单胞菌是慢性牙周病重要病原菌之一,它的生长和毒性与血红素有着密切的联系。作为绝对需铁菌,在人体中,P.g主要利用血红蛋白来源的血红素获得铁源,通过特异性外膜受体直接与血红素中的铁离子或卟啉环结合,并将其转运至细胞内。本文将主要讨论P.g与血红素结合的相关蛋白的研究进展。
- 张绮霞杨秋波杨圣辉
- 关键词:牙龈卟啉单胞菌血红素结合蛋白铁离子膜受体细胞内
- 多肽内切酶鉴定牙龈卟啉单胞菌血凝素2结合位点被引量:5
- 2010年
- 目的利用多肽内切酶分析牙龈卟啉单胞菌凝血素2(Porphyromonas gingivalishemagglutinin-2,PgHA-2)与氯化血红素结合位点的氨基酸序列。方法Endoproteinase Lys-C多肽内切酶水解获得与氯化血红素结合的功能性的多肽片段,质谱技术鉴定多肽片段的氨基酸序列。结果质谱鉴定与氯化血红素结合的多肽片段的氨基酸序列为YAVNDGFPGDHYAVMISK。结论进一步明确了HA-2与氯化血红素结合位点的氨基酸序列,为牙周病的预防和治疗方法的改进奠定基础。
- 余飞燕杨秋波杨圣辉
- 关键词:牙龈卟啉单胞菌血凝素氨基酸序列分析
- 牙龈卟啉单胞菌血凝素2基因缺陷型突变株的构建被引量:1
- 2009年
- 目的构建牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)血凝素2(hemagglutinin—adhesin2,HA-2)基因缺陷型突变株,为研究HA-2基因功能奠定基础。方法PCR扩增PgHA-2基因两翼片段HAu、HAl,将抗性基因ermF—ermAM连接到两者之间构建打靶载体HA—ermF—ermAM。将HA—ermF—ermAM电转化PgATCC33277,基因同源重组整合进入PgATCC33277染色体,用选择性培养基筛选获得PgATCC33277HA-2基因缺陷型突变株。进行PgATCC33277HA.2基因缺陷型突变株与其野生株凝血功能试验,比较二者的凝血功能差异。结果PCR、酶切和测序鉴定结果表明,打靶载体HA—ermF—ermAM成功构建。经PCR鉴定,打靶载体HA—ermF—ermAM通过同源重组整合进入PgATCC33277染色体,成功获得PgATCC33277HA-2基因缺陷型突变株。凝血实验结果表明,PgATCC33277HA-2基因缺陷型突变株与野生株相比凝血能力明显减弱。结论成功获得PgATCC33277HA-2基因缺陷型突变株,为进一步研究HA-2的生物学性质奠定了基础。
- 林梅杨秋波杨圣辉
- 关键词:紫单胞菌血凝素类基因打靶血液凝固
- 牙龈卟啉单胞菌血凝素2与氯化血红素结合多肽的序列分析被引量:5
- 2009年
- 目的明确牙龈卟啉单胞菌血凝素2(Porphyromonas gingivalis hemagglutinin-2,PgHA-2)与氯化血红素结合的多肽片段氨基酸序列,为牙周病保护性抗体的制备奠定基础。方法提取Pg ATCC33277基因组DNA,原核克隆重组表达HA-2,质粒测序,蛋白质印迹法及质谱分析法鉴定重组HA-2(recombinant HA-2,rHA-2)。利用氯化血红素琼脂糖珠验证rHA-2的氯化血红素结合功能。利用多肽内切酶水解与氯化血红素结合的rHA-2,获得与氯化血红素结合的多肽片段,质谱分析多肽片段的氨基酸序列。结果PCR鉴定、质粒测序、蛋白质印迹法及质谱分析结果均证实原核表达蛋白为Pg的HA-2。氯化血红素结合实验明确了rHA-2具有与氯化血红素结合的功能。质谱分析与氯化血红素结合的多肽片段的氨基酸序列为DHYAVMISKTGTNAG。结论成功基因克隆重组与原核表达了具有与氯化血红素结合功能的PgHA-2,明确了与氯化血红素结合的多肽片段的氨基酸序列,为针对Pg的牙周病免疫预防和治疗药物的开发奠定了基础。
- 杨秋波余飞燕杨圣辉
- 关键词:紫单胞菌血凝素类
- 乳牙慢性根尖周病损组织细菌组成的初步研究
- 目的:检测乳牙慢性根尖周病损组织中菌群构成,以期进一步阐明乳牙慢性根尖周感染细菌病因学特点.
方法:收集13例乳牙慢性根尖周炎患儿的根尖周病损组织,采用16S rDNA克隆测序法检测样本中菌群构成.
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- 蔡爽杨秋波赵焕英周焱杨宁燕时清尚佳健
- 关键词:乳牙病因机制细菌感染
- 文献传递
- 唾液牙龈卟啉单胞菌、MMP-8及TIMP-1水平与牙周炎的相关性分析被引量:1
- 2021年
- 目的探讨唾液生物标志物牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)、基质金属蛋白酶-8(MMP-8)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)水平与牙周炎的相关性。方法选取2020年10月至2021年1月首都医科大学附属北京口腔医院牙周科收治的牙周炎患者25例作为牙周炎组,另外同期该院牙周健康者22名作为牙周健康组。记录所有研究对象牙周临床参数,收集非刺激性唾液,实时定量PCR测定P.gingivalis水平,ELISA测定MMP-8及TIMP-1水平。比较牙周炎组和牙周健康组唾液P.gingivalis、MMP-8、TIMP-1水平及MMP-8/TIMP-1比值,分析生物标志物单独或联合应用对牙周炎的诊断效能。结果牙周炎组唾液P.gingivalis、MMP-8水平及MMP-8/TIMP-1比值高于牙周健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组TIMP-1水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。唾液P.gingivalis、MMP-8水平及MMP-8/TIMP-1比值与牙周临床参数均呈正相关。P.gingivalis和MMP-8单独对Ⅱ期及以上牙周炎的预测价值中等,MMP-8/TIMP-1比值单独、P.gingivalis联合MMP-8和P.gingivalis联合MMP-8/TIMP-1比值对Ⅱ期及以上牙周炎的预测价值均较高。结论唾液P.gingivalis,MMP-8,尤其是MMP-8/TIMP-1比值及其联合是检测Ⅱ期及以上牙周炎的潜在候选,唾液生物标志物的联合应用进一步提高了牙周诊断的准确性。
- 李明霞徐玉朱斐然宋琳李华刘颖张子路杨秋波
- 关键词:牙周炎唾液牙龈卟啉单胞菌基质金属蛋白酶-8金属蛋白酶组织抑制剂-1
- 引导性组织再生术细菌感染的动物实验研究被引量:1
- 2014年
- 目的检测引导性组织再生术(guided tissue regeneration,GTR)生物膜上和术区牙槽骨表面细菌种属、数量,分析菌群构成特点及异同点,为开发GTR抗菌性生物膜提供实验依据。方法 Beagle犬下颌前磨牙根分叉区做骨缺损形成二壁骨袋,行GTR术,术后8周2次取出GTR膨化聚四氟乙烯膜(expanded polytetrafluoroethylene,ePTFE膜),采集术区牙槽骨表面细菌标本。洗脱生物膜上和牙槽骨表面标本中细菌,进行培养,对每种培养基进行菌落计数,计算每种菌属构成比。结果 GTR术区牙槽骨表面和GTR生物膜上检测到的细菌包括:产黑色素菌、具核梭杆菌、放线菌、伴放线放线杆菌和变形链球菌,但是菌群特点并不相同,GTR术区牙槽骨区和生物膜上细菌构成比中,具核梭杆菌构成比均最大。结论应同时检测GTR术区牙槽骨区细菌种类,本研究中GTR术区牙槽骨表面和生物膜上细菌包括:革兰阳性菌、革兰阴性菌、厌氧菌和微需氧菌,提示抗菌性生物膜上的抗菌剂的选择应该为多种抗菌剂联合应用。
- 孙晓妮刘瑞杰刘颖张子路杨秋波
- 关键词:引导性组织再生术细菌
- 口腔微生物学教学感想被引量:1
- 2017年
- 微生物是口腔科两大常见疾病——龋病、牙周病的最主要的发病原因。口腔微生物学是口腔科一门重要的基础学科。精选教学内容,合理安排授课顺序,以临床为导向教学,充分调动学生学习主动性,结合国外临床诊疗经验开展教学,具有科研能力的教学团队,增强所学知识的感性认识的实习课,是口腔微生物学教学取得良好效果的关键。
- 杨秋波
- 关键词:口腔微生物学教学质量教学过程
- 特异性识别牙龈卟啉单胞菌的单克隆抗体及试纸条、试剂盒
- 本发明涉及生物医药领域,特别涉及特异性识别牙龈卟啉单胞菌的单克隆抗体及试纸条、试剂盒。本发明应用P.gingivalis和rHA2免疫小鼠制备了识别P.gingivalis不同位点的单克隆抗体,并从中筛选了配对抗体构建了...
- 杨秋波陈园园
- 文献传递