梁小兵
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 铜绿假单胞菌外毒素A的抗原性及其与辅助细胞的关系被引量：2
- 2000年
- 目的 研究铜绿假单胞菌外毒素A(PE)的某些抗原性及其与辅助细胞的关系。方法用MTT法观察PE在有无辅助细胞参与条件下对鼠脾淋巴细胞的刺激作用 ,并用鼠细胞毒性T细胞株CTLL进行证实。结果 PE在 0 0 1～ 10 0ng/ml浓度范围能刺激鼠脾淋巴细胞增殖 ,PE的丝裂原作用无需粘附细胞的辅助 ,但粘附细胞及其粘附细胞的PE刺激上清能协同PE对鼠脾淋巴细胞的刺激作用。PE在丝裂原作用范围内能刺激CTLL细胞生长 ,并与IL 2有协同作用。PE在体内能使小鼠脾淋巴细胞自发淋转率增高 ,对ConA刺激的增殖反应增强 ,但对淋巴细胞自发分泌IL 2和ConA诱导IL 2的产生水平无影响。
- 梁小兵庄汉澜周洁詹轶群郭庆福
- 关键词：抗原辅助细胞
- 一个高效表达且纯化简单的重组蛋白载体系统被引量：2
- 1996年
- 目前已发展了几种快速、有效地纯化细菌表达重组蛋白的方法。谷胱甘肽转硫酶（ＧＳＴ）融合表达系统是通过非变性条件下亲和吸附到谷胱甘肽－琼脂糖上，从细菌粗提物中纯化融合蛋白的。为便于从融合蛋白中解离出目的多肽，这个载体中含有特异的蛋白酶裂解位点。本研究比较了这个系统中的两个不同的载体。结果表明，它们都能高效表达谷胱甘肽转硫酶－白介素１受体拮抗剂（ＧＳＴ－ＩＬ－１ｒａ）融合蛋白，但凝血酶对融合蛋白的裂解效率有很大区别，ｐＧＥＸ－ＫＧ载体不仅大大提高了凝血酶的裂解效率，而且简化了纯化过程。因此，它为大批量用细菌表达真核蛋白的制备纯化提供了一种简便、廉价而有效。
- 刘学博李胜华梁小兵孔祥英
- 关键词：重组蛋白基因表达基因载体
- 登革病毒E蛋白区段基因克隆及高效表达被引量：2
- 1999年
- 目的进行登革病毒Ｅ蛋白区段的高效表达，制备抗原，为分析Ｔ、Ｂ细胞表位及免疫功能的研究奠定基础。方法以含有Ｄ２ＶＥ区的质粒ｐ３０．ＶＤ２为模板，ＰＣＲ扩增了编码Ｄ２ＶＥ蛋白３０８～４６８ａａ区段的基因片段，以ｐＭＹ为表达载体，构建了表达质粒ｐＤＥ１，并用酶切法使之缺失跨膜区疏水ａａ较多的编码序列，又构建了表达质粒ｐＤＥ２，分别转化大肠杆菌，获得了不同的工程菌株。经诱导培养，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，免疫印迹及酶联检测分析表达产物。结果含ｐＤＥ１质粒工程株只能表达微量的特异性蛋白；而含ｐＤＥ２质粒的工程菌株则能高效表达Ｄ２Ｖ特异性Ｅ蛋白，重组表达产物占菌体蛋白的２５．３１％。用４ｍｏｌ／Ｌ尿素溶解包涵体，上清中Ｅ蛋白纯度可达８０％。以粗提物包板进行酶联检测，结果表明，该重组Ｅ蛋白具有ＤＶ４个型交叉抗原的特性。结论缺失Ｃ末端疏水区编码序列的Ｄ２ＶＥ基因片段，可在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得高效表达，其表达产物具有ＤＶ属特异性。
- 郭庆福詹轶群逯好英周洁李胜华梁小兵
- 关键词：登革病毒基因克隆病毒抗原
- 卵泡刺激素受体主动免疫对雄性小鼠生育力影响的初步研究被引量：5
- 2000年
- 探索卵泡刺激素受体 (FSHR)作为男性免疫避孕疫苗的可能性。利用分子生物学方法克隆表达卵泡刺激素受体 -谷胱甘肽转硫酶 (FSHR- GST)融合蛋白 ,以此作为免疫原免疫雄性小鼠 ,观察免疫应答反应及其对生育力的影响。结果表明 ,在大肠杆菌中表达出 FSHR- GST融合蛋白 ,免疫家兔及小鼠后均产生免疫应答 ,免疫后的雄性小鼠仍具生育能力 ,免疫小鼠睾丸精曲小管出现生精细胞减少现象。提示
- 梁小兵周洁刘学博詹轶群彭虹李胜华郭庆福高杰英
- 关键词：卵泡刺激素受体主动免疫生育力睾丸小鼠
- 登革病毒感染动物模型的研究被引量：3
- 1998年
- 登革病毒（ｄｅｎｇｕｅｖｉｒｕｓ，ＤＶ）感染引起机体免疫应答是发生登革出血热或登革休克综合征（ＤＨＦ／ＤＳＳ）的主要原因，现已被公认，但机理仍不清楚。为探讨免疫反应在ＤＶ感染中的保护和致病作用，首先应有合适的感染动物模型。以往的报道只能感染灵长类的黑...
- 郭庆福詹轶群李胜华周洁梁小兵代庆华
- 关键词：登革病毒动物模型
- 登革病毒感染后小鼠细胞免疫功能的动态变化被引量：2
- 1997年
- 以登革Ｉ型病毒感染成年ＢＡＬＢ／ｃ小鼠为模型，观察感染后不同时间机体细胞免疫反应的变化。结果表明：感染后７～１４ｄ免疫功能处于激活状态，表现为腹腔巨噬细胞的吞噬功能和脾淋巴细胞对ＣｏｎＡ的反应及ＩＬ－２产生水平都明显高于对照组，感染２１ｄ后免疫功能则转为抑制状态，上述免疫反应明显低于对照组，脾中的Ｌ３Ｔ４＋细胞亚群的百分比逐渐下降；相反，ＬＹＴ２＋细胞亚群的百分比逐渐升高，这种抑制现象可维持到２８ｄ以上。
- 郭庆福詹轶群周洁李胜华代庆华梁小兵
- 关键词：登革热病毒IL-2细胞免疫功能
- 铜绿假单胞菌外毒素A的生产、分离纯化和鉴定被引量：10
- 2000年
- 通过对培养基组成、种子活化、接种量和培养条件进行优化 ,使铜绿假单胞菌外毒素A(PE)产量达到每毫升 5～ 10 μg和 192小鼠LD50 ,不低于国外报道水平。经二步纯化 ,PE蛋白回收率为33.33% (PE)和 16.67% (LD50 ) ,提纯系数为 4 38.5 (PE)或 2 18.5 (LD50 ) ,SDS PAGE呈现一条带 ,相对分子质量为 660 0 0 ,琼脂糖扩散鉴定与兔抗PE产生一条沉淀线 ,小鼠半数致死量为 0 .16μg ,PE对小鼠成纤维母细胞L92 9有毒性作用 ,能被兔抗PE血清所中和。
- 梁小兵庄汉澜周洁詹轶群郭庆福
- 关键词：铜绿假单胞菌外毒素A纯化
- 绿脓杆菌外毒素A的制备和对细胞免疫的影响
- 梁小兵
