段春燕
- 作品数:46 被引量:120H指数:5
- 供职机构:泸州医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省科技支撑计划四川省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- ONO-AE-248诱发中性粒细胞非凋亡性程序化死亡的蛋白质组学分析方法的建立被引量:3
- 2006年
- 目的:建立双向电泳技术和质谱技术在探索ONO-AE-248诱发的中性粒细胞(neutrophil,PMN)非凋亡性程序化死亡的分子机理研究中的应用,为深入认识“非凋亡性程序化死亡”这种新的死亡方式提供新的有效的研究途径。方法:将采用梯度离心法分离的,人正常PMN,分为正常对照组和实验组,实验组用ONO-AE-248刺激12小时建立非凋亡性坏死模型,提取对照组和实验组全蛋白,双向电泳分离蛋白质,采用PDQuest2-DE软件分析找出两组间差异表达的蛋白质斑点,用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果:双向电泳图谱显示:ONO-AE-248诱导的人PMN非凋亡性程序化细胞死亡与PMN的自发性凋亡的蛋白质组存在差异显著,质谱鉴定初步得到其中12种差异表达的蛋白质。结论:双向电泳和质谱鉴定技术可以有效的分离和分析ONO-AE-248诱发的PMN非凋亡性坏死的蛋白质组,为进一步探索“非凋亡性程序化死亡”方式提供了新的方法和途径,为丰富细胞死亡方式带来了新的前景。
- 郑小莉段春燕何涛刘佳佳
- 关键词:PMN蛋白质组双向电泳MALDI-TOF-MS
- 阻断PI3K/AKT通路抑制棕榈酸诱导的肝癌细胞凋亡被引量:2
- 2014年
- 目的:探讨三磷酸酰肌醇蛋白激酶(PI3K)信号通路与棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导肝癌细胞凋亡的关系。方法:培养人肝癌细胞系PLC、SMMC-7721及LM3,经PA及三磷酸酰肌醇蛋白激酶(Phosphotidylinsitol-3-Kinase,PI3K)抑制剂LY294002处理细胞后,利用倒置相差显微镜观察细胞形态;通过Western blotting分析阻断PI3K/AKT信号通路与PA诱导PLC、SMMC-7721及LM3细胞凋亡之间的关系。结果 :PA处理明显诱导PLC、SMMC-7721及LM3细胞发生凋亡;阻断PI3K/AKT信号通路抑制了PA对上述肝癌细胞凋亡的诱导。结论:阻断PI3K/AKT信号通路可抑制PA诱导的肝癌细胞凋亡。
- 段春燕代荣阳张春燕冯春红刘友平李洪
- 关键词:PI3K/AKT信号通路棕榈酸肝癌细胞凋亡
- 内质网应激下肝癌细胞Akt和ERK通路间的cross-talk研究被引量:6
- 2011年
- 目的研究内质网应激介导的肝癌细胞PI3K/AKt和M EK/ER K途径间的信号交流。方法采用PI3K抑制剂LY 294002/Akt激活型突变载体m yr-Akt和M EK抑制剂U 0126分别阻断/激活内质网应激介导的Akt和ER K活化,并利用W estern blot分析内质网应激条件下PI3K/Akt和M EK/ER K途径间的信号交流。结果阻断PI3K/Akt明显促进内质网应激介导的M EK/ER K活化,而过度激活PI3K/Akt则抑制内质网应激介导的M EK/ER K活化。阻断M EK/ER K对内质网应激介导的PI3K/Akt活化无影响。结论 PI3K/Akt和M EK/ER K信号途径间在内质网应激肝癌细胞中存在信号交流。
- 严冬梅李敏军刘友平段春燕
- 关键词:内质网应激AKTERKCROSS-TALK
- 医学院校生物化学教学中多媒体的应用被引量:2
- 2012年
- 生物化学是医学院校各专业一门重要的基础课程。多媒体教学作为一种先进的教学手段,在生物化学教学中具有传统教学手段无法比拟的优势。在课堂教学中运用多媒体技术,可形象演示生物化学教学内容,激发学生学习兴趣,培养学生思维能力和创新能力。
- 刘寒张春燕严冬梅段春燕杨烨李洪
- 关键词:生物化学多媒体教学方法
- 脊柱结核个体化综合治疗的思考
- 2009年
- 近年来脊柱结核迅速增多,严重威胁着人类的健康。本文分析目前脊柱结核治疗中存在的问题,围绕这些问题,从脊柱结核的化疗、手术、围手术期处理、术后督导治疗方面综合思考个体化综合治疗在脊柱结核中的应用。通过这些分析和思考,以期引导我们用系统全面的观点治疗脊柱结核,并最终控制其流行。
- 王松段春燕王清
- 关键词:脊柱结核个体化
- 青果作用后大鼠肝星状细胞蛋白质组双向电泳技术的建立被引量:1
- 2013年
- [目的]建立青果作用后大鼠肝星状细胞蛋白质组双向电泳分离体系,提高其分辨率和重复性。[方法]青果作用于大鼠肝星状细胞,提取全蛋白,按标准条件对蛋白质进行双向电泳分离,并对各关键因素进行优化。[结果]最终选择的裂解液配方是1%TBP、4%CHAPS、0.2%Bio-Lyte、40 mmol/L Tris、8 mol/L尿素、2 mol/L硫脲;使用pH 4~7的IPG胶条进行被动水化上样,等电聚焦采用缓慢升压模式,电泳参数根据Bio-Rad公司的预设方案进行调整;使用改良硝酸银法进行蛋白质斑点染色,从而获得了满意的蛋白质组双向电泳图谱。[结论]成功建立了青果作用后大鼠肝星状细胞蛋白质组双向电泳分离体系,具有较高的分辨率和重复性,为进一步较为系统、全面、准确的评价青果及其复方制剂的作用机制和药效提供方法学基础。
- 张春燕严冬梅段春燕杨烨刘秋均
- 关键词:双向电泳蛋白质组青果肝星状细胞
- 卵巢恶性肿瘤组织蛋白质的双向电泳及初步分析
- 2005年
- 目的:初步构建卵巢恶性肿瘤组织细胞的蛋白质表达谱,为进行卵巢良、恶性肿瘤组织细胞蛋白质表达的差异分析及临床早期诊断奠定基础.方法:取人卵巢恶性肿瘤组织,提取蛋白质,双向电泳分离,银染获得全细胞蛋白质的电泳分离图谱,利用PDQuest 2D分析软件进行图像分析,结合Swiss-Prot蛋白质数据库对蛋白质斑点进行初步鉴定.结果:双向电泳图谱显示2-DE图谱上有212个蛋白质斑点,主要集中在pH 4.95~6.81之间,其中高丰度蛋白有36个点,低丰度的蛋白质有176个,对其中3个高丰度蛋白质斑点初步鉴定可知这些蛋白质分别为:PSE1,IRX5,RN5A.结论:本实验构建了人卵巢恶性肿瘤组织细胞蛋白质的双向电泳图谱,其分离、染色效果好,能满足2-DE专业软件分析的要求,为后续卵巢良、恶性肿瘤组织细胞的蛋白质组研究奠定了基础.
- 段春燕甘淋林海蕤何涛
- 关键词:卵巢恶性肿瘤组织双向电泳蛋白质组
- 多元化考核体系在医学生物化学教学改革中的实践初探被引量:9
- 2014年
- 改革五年制临床医学生物化学考试内容、形式以及评价体系,以"形成性考试+实验考核+终结性考试"的多元化考核方式代替现有的传统的"一张试卷、一次考试定成绩"的考试制度,从知识掌握、自觉学习、技能培训、团队协作等多方面提高学生的综合学习能力。以此建立并完善相应的评价体系,为适应以"胜任能力"培养为核心目标的第三代临床医学生培养目标的改革,为推动高等学校本科教学质量与教学改革工程提供一个较好的借鉴。
- 陈川宁严冬梅张春燕段春燕
- 关键词:考试改革
- 急性淋巴细胞白血病白细胞蛋白质双向电泳技术的建立被引量:2
- 2006年
- 目的建立急性淋巴细胞白血病的白细胞蛋白质组研究的双向电泳技术,提高其分辨率及重复性。方法提取急性淋巴细胞白血病人的血液白细胞蛋白质,以固相pH梯度等电聚焦为第一向,再以垂直SDSPAGE进行第二向分离,银染显色。结果通过实验条件的多次筛选获得了较为满意的急性淋巴细胞性白血病的白细胞蛋白质双向电泳图谱。结论初步建立了急性淋巴细胞性白血病的白细胞蛋白质组双向电泳分析方法,具有较好的分辨率和重复性,为进一步较为系统、全面地确定正常及急性淋巴细胞性白血病的细胞ERK底物谱组成成分,并从中寻找出对急性淋巴细胞性白血病早期诊断有价值的肿瘤标志物和有效治疗的“分子靶点”奠定基础。
- 段春燕郑小莉王松景莉何涛
- 关键词:蛋白质组双向电泳急性淋巴细胞白血病
- 乙型肝炎核心抗原基因的合成及其原核表达载体的构建
- 2009年
- 目的:合成乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因并构建原核表达载体。方法:根据大肠杆菌偏嗜性密码子,利用SyntheticGeneDesigner软件对HBcAg基因进行密码子优化,分成24条相互重叠的寡核苷酸片段,采用PCR法扩增获得完整的HBcAg基因,经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到pET30a(+),得pET30a(+)-HB-cAg,经PCR扩增、酶切及测序鉴定后,定点突变法改正错误位点。之后将重组子转入BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达情况,WesternBlot检测蛋白抗原性。结果:成功构建了重组质粒pET30a(+)-HBcAg,SDS-PAGE分析显示目的蛋白主要以包涵体的形式在大肠杆菌表达,表达效率64%左右;WesternBlot显示表达产物具有较好的抗原性。结论:成功合成HBcAg基因并构建了原核表达载体。
- 王丽刘金波段春燕龚舒何涛
- 关键词:乙型肝炎病毒核心抗原基因合成定点突变原核表达