汪晓华
- 作品数：8 被引量：27H指数：2
- 供职机构：复旦大学上海医学院免疫学系分子医学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市科学技术发展基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SARS-CoV N蛋白的原核表达及其免疫原性研究被引量：1
- 2005年
- 为了研究SARS-CoV病毒N蛋白基因的原核表达及其免疫原性,为进一步的研究奠定基础,我们以PCR方法在全病毒基因组文库中获得全长N基因,分别克隆到pcDNA3和pET32a载体中获得重组质粒pcDNA3-N和pET32a-N。以亲和层析方法分离纯化pET32a-N转化的BL21细菌裂解液中的重组N融合蛋白,并以ELISA方法检测pcDNA3-N质粒基因免疫小鼠诱导后血清中的特异性抗体。结果pET32a-N转化BL21细菌后可检测到重组SARS-CoVN融合蛋白表达并分离纯化,pcDNA3-N基因免疫能够诱导产生N特异的体液免疫应答。研究的结果表明,SARS-CoVN蛋白可以在原核细胞中有效表达并有良好免疫原性,可以为进一步的功能研究和血清学诊断提供条件。
- 高海峰熊凌云汪晓华储以微王缨熊思东
- 关键词：SARS-COVN蛋白基因免疫
- 斑马鱼:一种新的免疫学研究模式生物被引量：17
- 2003年
- 斑马鱼作为遗传、发育生物学模式生物已经得到了较广泛的应用。近年来随着对该生物免疫系统的深入研究 ,人们发现其存在着较为完整的特异性免疫系统并且具备血液系统发育过程透明、对特异性免疫系统依赖性低等特点 。
- 汪晓华熊思东
- 关键词：斑马鱼模式生物免疫学研究发育生物学
- SARS-Cov M蛋白的真核表达及其免疫原性研究被引量：1
- 2005年
- 目的 初步研究SARS-Coy病毒M蛋白基因的真核表达效率和免疫原性为进一步的疫苗研究奠定基 础。方法 以PCR方法在全病毒基因组文库中获得全长M基因,分别克隆至pcDNA4-his／myc和pVAON33载 体获得重组质粒pcDNA4-his／myc-M和pVAON33-M。以Western Blot方法利用融合分子羧基段的myc表位检 测pcDNA4-his／myc-M转染的293T细胞中M蛋白的真核表达。以ELISA方法检测pVAON33-M质粒基因免 疫小鼠诱导产生特异性抗血清。结果pcDNA4-his／myc-M转染后48 h可检测到SARS-Cov M蛋白表达。 pVAON33-M基因免疫能够诱导产生M特异的体液免疫应答。结论 本研究的结果表明SARS-Cov M蛋白可 以在真核细胞中有效表达并有良好免疫原性,可以作为SARS-Cov疫苗研制的候选抗原之一。
- 童德妍汪晓华郑秀娟关庆东熊思东
- 关键词：M蛋白SARS-COV真核表达免疫原性研究转染真核细胞
- SARS病毒:非典型肺炎相关病毒被引量：4
- 2003年
- SARS是目前在世界范围内流行的严重呼吸系统疾病。SARS病毒是有包膜的正链RNA病毒 ,属冠状病毒科 ,为新近分离鉴定的该疾病相关病原体。初步预测该病毒的复制周期与其他冠状病毒类似 ,但其细胞膜受体结合蛋白S的S1区、M跨膜糖蛋白等部分则存在较大的变异 ,可能是该病毒发生宿主改变的原因之一。此外 ,对SARS病毒的检测、临床诊断等方面也取得了一定的进展。
- 童德妍汪晓华王缨储以微熊思东
- 关键词：SARS病毒冠状病毒非典型肺炎
- SARS-Cov膜结合蛋白抗原表位的预测和多表位嵌合体的原核表达被引量：1
- 2004年
- SARS Cov是引起非典型性肺炎的病原体。S和M蛋白都是SARS冠状病毒主要的膜结构蛋白。研究显示 ,冠状病毒感染细胞过程中 ,病毒表面膜结合蛋白起决定性作用。通过网络数据库结合生物软件分析的方法预测可能在SARS Cov感染过程中起重要作用并具较好抗原性参数的膜结合蛋白结构区域作为抗原表位。构建多表位串联基因片段 ,接入载体pET 32a后验证表明 ,该多表位串联基因可以在原核细胞内高效表达 ,从而为基于表位的SARS
- 汪晓华童德妍徐焕宾熊凌云熊思东
- 关键词：SARS-COV抗原表位
- 含多抗原表位的嵌合SARS-CoV基因疫苗的构建和免疫原性研究被引量：2
- 2005年
- 目的 研制基于表位的SARS- CoV基因疫苗 ,为传统灭活或减毒疫苗提供有益的配伍选择。方法 通过网络数据库结合生物软件分析的方法 ,确定可能在SARS- CoV感染过程中起重要作用并具较好抗原性参数的结构区域作为候选抗原表位 ,以密码子优化的方法提高表位串联蛋白的真核表达效率 ,构建了含多抗原表位的嵌合SARS- CoV基因疫苗。结果 多表位串联基因接入真核表达载体后 ,可在真核细胞内高效表达。多表位嵌合SARS -CoV基因疫苗免疫小鼠后 ,可诱导融合蛋白特异的体液免疫反应。结论 该基于多抗原表位的嵌合SARS- CoV基因疫苗可以诱导抗体应答 ,为该疫苗的深入研究奠定了基础。
- 汪晓华童德妍徐焕宾熊思东
- 关键词：SARS-COV基因疫苗免疫原性研究嵌合抗体应答结构区
- C3d对基因免疫诱导的HBV特异性体液免疫应答的调节作用被引量：1
- 2004年
- 观察补体C3d对HBV基因免疫诱导的特异性体液免疫应答的调节作用 ,为增强HBV基因疫苗免疫效果寻求新途径。将HBV preS2 /S编码基因分别插入真核表达载体TR4 2 1和含有 3拷贝C3d编码基因的TR4 2 1 C3d3质粒 ,构建重组质粒TR4 2 1 preS2 /S和TR4 2 1 preS2 /S C3d3。采用肌肉注射法对BALB/c小鼠实施基因免疫 (10 0 μg/ 10 0 μl/只小鼠 ) ,以空质粒为对照 ,定期采集血清。ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗 HBs IgG及其亚型 ,并采用NaSCN竞争ELISA法检测其亲合力。结果表明 ,TR4 2 1 preS2 /S C3d3重组质粒免疫组诱导的特异性抗 HBs IgG水平明显高于TR4 2 1 preS2 /S重组质粒免疫组 (P <0 0 5 ) ;而且TR4 2 1 preS2 /S C3d3重组质粒免疫组诱导的抗 HBs IgG抗体的亲合力 (ED50 :1 375 )显著高于TR4 2 1 preS2 /S重组质粒组 (ED50 :0 875 ) ,但C3d并不改变基因免疫诱导的特异性抗HBs IgG各亚型水平的格局 ,仍以IgG2b和IgG2a为主。提示C3d可增强基因免疫诱导的HBV特异性体液免疫应答 ,并促进特异性抗体亲和力的成熟 ,这为提高HBV基因疫苗的免疫效果提供了新的途径。
- 关庆东王立新汪晓华郭强郑秀娟熊思东
- 关键词：基因免疫C3D乙型肝炎病毒表面抗原
- SARS—Cov M蛋白的真核表达及其免疫原性研究（摘要）
- 2005年
- 童德妍汪晓华郑秀娟关庆东熊思东
