沈立新 作品数:49 被引量:296 H指数:10 供职机构: 西北大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省自然科学基金 陕西省教育厅规划基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 轻工技术与工程 更多>>
耐利福平作为筛选耐多药结核病指标的评估 被引量:15 2013年 目的探讨耐利福平作为耐多药结核病筛选指标的可行性。方法对结核分枝杆菌临床分离株采用美国BD公司BACTEC MGIT 960全自动快速分枝杆菌培养鉴定药敏仪进行药敏试验,并对数据进行分析。应用诊断性试验评价指标评价耐利福平作为耐多药结核病筛选指标的科学性。结果在621株结核分枝杆菌临床分离株中,177株对利福平菌耐药,其中172株至少同时对异烟肼耐药,结核分枝杆菌的耐多药率为27.7%。若以至少同时耐异烟肼和利福平作为诊断MDR-TB的参考标准,以耐利福平作为MDR-TB筛选指标的敏感性为100%、特异性为98.9%、准确度为99.2%、阳性预测值为97.2%、阴性预测值为100%、阳性似然比为34.4、阴性似然比为0。结论我市耐多药结核病发生率高;耐利福平可以作为耐多药结核病的初步筛选指标。 阴灵芳 孙惠平 周永 沈立新关键词:利福平 药物耐药性 耐多药结核病 乳腺癌中ASS1的表达及其与临床病理特征和预后的相关性 2023年 探究乳腺癌组织中尿素循环关键分子及其与乳腺癌临床病理特征和预后的关系。首先,通过TCGA及GTEx数据库筛选乳腺癌中差异表达的尿素循环关键分子,分析其与乳腺癌患者预后的关系。然后,收集2010年11月至2016年12月在西京医院进行手术治疗的97例乳腺癌患者以及54例非肿瘤(乳腺腺病)患者的手术标本,制作组织芯片,利用免疫组化染色法研究乳腺癌和正常乳腺(乳腺腺病)组织中精氨酸代琥珀酸合成酶(argininosuccinate synthase 1,ASS1)的表达情况,并确定其与临床病理特征和预后之间的关系。分析TCGA及GTEx数据库发现,尿素循环关键分子ASS1在乳腺癌中表达下降,并与患者的预后显著相关(p<0.05)。免疫组化染色显示ASS1主要定位于胞浆,在乳腺癌中表达下降,且与Ki-67表达及分子分型显著相关(p=0.0215,0.0005)。ASS1在乳腺癌中表达显著下降,与肿瘤的分子分型、Ki-67表达密切相关,推测其在肿瘤发生发展中起着重要的作用。因此,ASS1低表达可以作为评估乳腺癌预后的潜在指标。 聂雅婷 丁兰 袁媛 刘磊 沈立新关键词:尿素循环 乳腺癌 预后 重组大肠杆菌催化合成谷胱甘肽的研究 被引量:9 2003年 利用PCR技术扩增编码γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSH )及谷胱甘肽合成酶(GSH )的基因,并进行了部分序列分析,分别构建了表达质粒pTrc-gsh 和pTrc-gsh ,它们在E.coliBL21中的稳定性很好。在E.coliBL21(pTrc-gsh )∶E.coliBL21(pTrc-gsh )=3∶1的情况下,谷胱甘肽的合成达3.31g/L,高于工程菌E.coliBL21(pTrc-gsh)催化合成的谷胱甘肽的量(2.51g/L)。利用E.coliBL21(pTrc-gsh )与E.coliBL21(pTrc-gsh )将γ-谷氨酰半胱氨酸的合成与谷胱甘肽的合成分步进行,谷胱甘肽的合成达3.78g/L,比利用E.coliBL21(pTrc-gsh)采用两步法合成的谷胱甘肽高42.1%,解决了GSH对GHI的反馈抑制,并降低了ADP对第二步反应的抑制程度。 沈立新 魏东芝 尧辉关键词:Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 谷胱甘肽合成酶 克隆 代谢工程—生物工程学科的新兴研究领域 被引量:10 2000年 代谢工程包括推理性代谢工程及逆代谢工程。针对限制生物活性的因素 ,从不同的途径设计代谢改变策略 ,采用重组DNA技术解除或削弱该影响 ,提高目的产物的产率 ,是生化工程学科提高生物活性的新兴研究领域。讨论了推理性代谢工程及逆代谢工程的设计及应用。 沈立新 魏东芝 叶勤关键词:代谢工程 生物工程 细菌降解萘、菲的代谢途径及相关基因的研究进展 被引量:19 2010年 多环芳烃(Polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)是一类在环境中广泛存在的具有毒性的污染物,微生物降解是其在自然界中降解的主要途径,因而尤为重要。随着研究的深入,关于微生物降解PAHs的分子降解机制、途径等的认识逐渐积累。以下对细菌降解萘、菲的研究进展进行了概述,介绍了萘的水杨酸降解途径,菲的水杨酸、邻苯二甲酸及其他降解途径,同时也包括降解过程中涉及的降解基因簇,如nah-like、phn、phd、nid和nag等以及细菌在PAHs胁迫条件下其他相关基因的表达与调节等方面的最新进展。这些进展可为降解菌株的分子及遗传机制研究提供理论依据,将促进通过基因工程优化降解菌、更有效地检测PAHs环境污染及实现PAHs污染的生物修复。 张丹 李兆格 包新光 李江波 梁海华 段康民 沈立新关键词:多环芳烃 微生物降解 降解途径 降解基因 半枝莲对铜绿假单胞菌群体感应系统的抑制作用 被引量:11 2014年 目的在中药中筛选并研究铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)群体感应系统抑制物(quorum-sensing inhibitor,QSI)。方法利用铜绿假单胞菌QS系统相关基因lasI、lasR、rhlI和rhlR的启动子与报道子荧光素酶(Luciferase)基因lux CDABE的融合子为筛选系统,通过检测化学发光反应不同中药对群体感应系统基因表达的影响,并检测中药对铜绿假单胞菌毒性相关表型的影响。结果研究结果表明中药半枝莲的水提物在不影响铜绿假单胞菌生长的条件下,可抑制PA中QS系统基因lasI、lasR、rhlI和rhlR的表达,并可抑制铜绿假单胞菌的运动性。结论中药半枝莲对铜绿假单胞菌群体感应系统有抑制作用,结果有助于新型抗生素的研究。 肖骏 沈立新 赵琳 武玉婷 段康民 郭俏关键词:铜绿假单胞菌 群体感应系统 半枝莲 大肠杆菌BL21(pTrc-gsh)与酵母耦联合成谷胱甘肽的研究 被引量:7 2001年 During synthesis of GSH by the engineered strain E.coli BL21(pTrc-gsh) coupled with Saccharomyces cerevisiae producing ATP from adenosin,the inconsistency of two systems in the concentration of phosphate buffer was solved by decreasing concentration to 250mmol/L.The conditions under 250mmol/L phosphate buffer were optimized and the yield of GSH was 1.6g/L,which was higher than that of summation by two systems under the same conditions respectively.Addition of glycine later after glutamate and cysteine weakened the inhibition of GSH to GSHI.It made the yield of GSH reach to 2.13g/L which was 30.7% higher than the control. 沈立新 魏东芝 张嗣良 王二力关键词:谷胱甘肽 ATP 工程菌 酵母 固定化E.coliBL21(pTrc-gsh)细胞催化合成谷胱甘肽 被引量:18 2002年 分别以卡拉胶、明胶、海藻酸钠包埋 E.coli BL 2 1 ( p Trc- gsh)细胞催化合成谷胱甘肽( GSH)。从酶活收率及机械强度方面进行比较 ,选择卡拉胶为包埋载体 ,其最适 p H为 7.0 ,最适温度为 40°C。相关物质对 GSH的合成均有影响 :半胱氨酸、甘氨酸的最适浓度为 2 0 mmol/ L,谷氨酸的最适浓度为 60 mmol/ L;Mg2 + / ATP为 1~ 5 ( V/ V)较合适 ;腺苷二磷酸 ( ADP)浓度为 5 mmol/ L时对酶活的抑制为 2 0 %。优化条件下罐式反应器中 GSH的产量为 0 .84g/ L,操作稳定性较好 ;延迟加入甘氨酸时 GSH产量可提高 1 7.5 % ;与酵母生产 ATP体系相耦联的共固定化体系在填充床中反应 ,GSH合成量达 1 .2 4 g/ L,收率比直接加入 ATP提高 2 4 .2 % 沈立新 魏东芝 张嗣良 王二力关键词:重组大肠杆菌 谷胱甘肽 固定化细胞 巯基化合物 铜绿假单胞菌随机启动子库的构建及受铁调控基因的筛选和鉴定 被引量:3 2008年 【目的】针对铁这种几乎所有微生物都必需的,对病原菌尤为重要的营养元素,在全基因组水平上检测铜绿假单胞菌的铁感应基因。【方法】采用含LuxCDABE报道子的质粒pMS402为载体,构建了铜绿假单胞菌的随机启动子库,建立了特定条件下研究铜绿假单胞菌全基因组基因表达变化的高通量平台。【结果】验证了2个已知的受铁调控的基因,并发现了尚未报道的二氢叶酸还原酶,磷酸葡萄糖脱水酶和柠檬酸铁转运蛋白受铁调控的现象,发现与铁相关的四个功能未知的基因和3个假定蛋白的基因。【结论】研究结果对于阐明铁在铜绿假单胞菌中的调控作用,揭示铁对细菌生理及致病性的作用机制提供了理论基础。随机启动子库的构建也为细菌基因组水平研究基因表达提供了一个有用的工具。 王琰 魏金花 沈立新 段康民关键词:铜绿假单胞菌 铁 基因调控 香菇柄中多糖的提取分离及LH-2的纯化与分析研究 沈立新