沙芳
- 作品数：15 被引量：26H指数：4
- 供职机构：山东中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省科技发展计划项目山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 氯化锌对体外培养人晶状体上皮细胞生长的抑制作用及其机制
- 2015年
- 背景 锌离子有抑制肿瘤细胞增生、诱导癌细胞凋亡的作用,眼科常用于结膜炎和沙眼治疗的局部用药.迄今为止,关于锌离子对人晶状体上皮细胞（LECs）增生的研究较少.目的 研究氯化锌（ZnCl2）对人LECs细胞株HLEB-3增生的影响及其作用机制.方法 对HLEB-3进行常规细胞培养和传代,在培养基中加入不同质量浓度的ZnCl2,使终质量浓度分别为5、10、20、40和80 mg/L,继续培养细胞24、48和72 h,未添加ZnCl2的细胞作为对照组.采用MTT法检测各组培养细胞的活力;采用JC-1荧光染色法测定细胞线粒体膜电位（△Ψm）的变化;采用流式细胞仪检测不同细胞周期的细胞比例;采用实时荧光定量PCR法和ELISA法分别检测细胞中bcl-2 mRNA及其蛋白的表达量,并对各组检测结果进行比较.结果 对照组培养的细胞呈镶嵌多边形,排列紧密;不同质量浓度ZnCl2组细胞数目均减少,形态不规则,细胞排列紊乱.随着ZnCl2质量浓度的增加和ZnCl2作用时间的延长,细胞生存率均明显降低,总体比较差异均有统计学意义（F质量浓度=173.949,P=0.000;F时间=16.997,P=0.000）.对照组细胞膜呈橙红色荧光,随着ZnCl2质量浓度的增加,不同质量浓度ZnCl2处理后橙红色荧光逐渐减弱,绿色荧光逐渐增强.不同质量浓度ZnCl2组处于S期和G2/M期的细胞比例明显多于对照组,而Go/G1期的细胞明显少于对照组,总体差异均有统计学意义（S期：F=15.594,P=0.000; G2/M期：F=12.792,P=0.000;Go/G1期：F=43.366,P=0.000）.对照组细胞中bcl-2mRNA的相对表达量为1.00±0.00,而5、10、20、40和80 mg/L ZnCl2组bcl-2 mRNA的相对表达量分别降至0.32±0.13、0.07±0.03、0.14±0.05、0.01±0.00和0.12±0.06,差异均有统计学意义（均P＜0.01）;对照组细胞中bcl-2蛋白的表达水平为（138.57±32.80）pg/mg,5、10、20、40和80 mg/L ZnCl2组分别为（79.20±5.70）、（79.95±6.21）、（61.02±10.74）、（72.05±11.61）和（55.97±10.53�
- 杜宇翔郭大东唐凯司俊康沙芳吴秋欣毕宏生
- 关键词：锌离子晶状体BCL-2基因细胞增生
- 电针对透镜诱导性近视豚鼠闪光视网膜电图的影响
- 目的:探讨电针对透镜诱导性近视(lens-induced myopia,LIM)豚鼠闪光视网膜电图(flash electroretinogram,F-ERG)的影响.方法:24只3周龄健康三色短毛豚鼠随机分为透镜诱导组...
- 丁美华叶翔毕宏生沙芳
- 电针对透镜诱导性近视豚鼠闪光视网膜电图的影响被引量：10
- 2015年
- 目的探讨电针对透镜诱导性近视豚鼠闪光视网膜电图(electroretinogram,ERG)的影响。方法 24只3周龄健康三色短毛豚鼠随机分为透镜诱导组(12只)与透镜诱导+电针组(12只)。两组豚鼠右眼戴-10 D透镜,左眼不戴镜作为自身对照。透镜诱导+电针组在戴镜的同时,电针刺激豚鼠两侧合谷穴与太阳穴。4周后测量2组屈光度、眼轴长度及ERG波形的变化。结果 4周后,与自身对照眼比较,透镜诱导眼近视屈光度增加(P<0.01),眼轴延长(P<0.01);同时其暗适应振荡电位的OS2波振幅及总振幅下降(均为P<0.01),暗适应最大混合反应、明适应视锥细胞反应的b波振幅下降(均为P<0.01)。电针干预后,透镜诱导眼的屈光度和眼轴长度没有变化(P>0.05);但与透镜诱导组右眼相比,透镜诱导+电针组透镜诱导眼暗适应振荡电位的OS2波振幅及总振幅,暗适应最大混合反应、明适应视锥细胞反应的b波振幅均增高(均为P<0.05),达到与其自身对照眼相似的水平(均为P>0.05)。结论电针刺激合谷穴与太阳穴影响透镜诱导性近视豚鼠ERG,可使其恢复至正常水平。
- 沙芳丁美华叶翔吴建峰毕爱玲张瑾毕宏生
- 关键词：电针视网膜电图
- 电针对负透镜诱导型近视豚鼠视网膜M1受体表达的影响被引量：8
- 2015年
- 目的探讨电针对负透镜诱导型近视豚鼠视网膜中毒蕈碱样乙酰胆碱M1受体表达的影响。方法 48只3周龄豚鼠随机分为4组:正常对照组、近视模型组、近视电针组与近视假穴组,后3组豚鼠右眼配戴-10.00 D透镜片,建立透镜诱导型近视豚鼠动物模型,近视电针组戴镜同时给予针刺豚鼠的合谷穴和太阳穴,近视假穴组针刺臀部无穴位处。于造模前及造模后4周测量各组眼轴长度和屈光度,同时取视网膜组织,利用RT-PCR的方法检测各组豚鼠视网膜中M1受体mRNA的相对表达量,ELISA法检测M1受体的蛋白含量。结果造模4周后,近视模型组右眼屈光度为(-3.40±0.55)D,明显低于正常对照组右眼的(1.20±0.24)D和自身对照眼左眼的屈光度(1.25±0.32)D(均为P<0.05);近视模型组右眼眼轴长度为(8.74±0.38)mm,明显大于正常对照组的右眼眼轴长度(8.23±0.21)mm,也大于自身对照眼左眼的眼轴长度(8.16±0.43)mm(均为P<0.05);近视模型组、近视电针组和近视假穴组右眼的眼轴长度和屈光度比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。正常对照组、近视模型组、近视电针组、近视假穴组视网膜中M1受体的mRNA相对表达量分别为59.17±4.02、74.50±4.64、64.83±6.05和74.67±3.93,M1受体蛋白含量分别为(984.67±44.69)ng·L-1、(1172.00±41.91)ng·L-1、(1027.00±41.08)ng·L-1和(1153.50±56.40)ng·L-1,统计学分析显示正常对照组与近视电针组相比差异无统计学意义(P>0.05),两组分别与近视模型组和近视假穴组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论负透镜诱导型近视豚鼠视网膜中M1受体表达增高,针刺合谷穴和太阳穴可以减少其视网膜中M1受体表达,这可能是针刺改善近视患者远视力的机制之一。
- 王玲沙芳吴建峰叶翔毕爱玲毕宏生
- 关键词：视网膜
- 肾阳虚体质对负透镜诱导豚鼠眼球生物参数及后极部巩膜厚度的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨肾阳虚体质对负透镜诱导豚鼠的屈光度、眼轴长度及后极部巩膜厚度的影响。方法选取24只3周龄雄性健康三色短毛豚鼠,随机分为正常对照组、透镜诱导组和肾阳虚+透镜诱导组,每组各8只。肾阳虚+透镜诱导组每日腹腔注射氢化可的松注射液,剂量10 mg·kg-1,正常对照组和透镜诱导组则注射等量生理盐水,每日1次,连续2周。第3周起,透镜诱导组、肾阳虚+透镜诱导组右眼均戴-10.00 D透镜,左眼作为自身对照眼,正常对照组则不作任何处理,透镜诱导2周后各组进行屈光度、眼轴长度及后极部巩膜厚度的测量。结果透镜诱导组自身对照眼屈光度、眼轴长度和后极部巩膜厚度分别为(1.52±0.45)D、(8.52±0.04)mm、(291.25±18.08)μm,与之相比透镜诱导组造模眼近视屈光度增加为(-2.16±0.09)D,眼轴延长为(8.61±0.03)mm,后极部巩膜厚度降低为(233.75±23.26)μm(均为P<0.01);肾阳虚+透镜诱导组自身对照眼屈光度、眼轴长度和后极部巩膜厚度分别为(1.56±0.18)D、(8.53±0.09)mm、(296.25±22.64)μm,与之相比肾阳虚+透镜诱导组造模眼近视屈光度增加为(-2.73±0.55)D,眼轴延长为(8.70±0.10)mm,后极部巩膜厚度降低为(180.00±16.04)μm(均为P<0.01);与透镜诱导组造模眼相比,肾阳虚+透镜诱导组造模眼近视屈光度增加更多,眼轴延长更显著,后极部巩膜厚度降低更明显(均为P<0.05)。结论在负透镜诱导下,肾阳虚豚鼠较正常豚鼠眼轴延长和近视度增加更加显著,肾阳虚体质与近视的发生发展可能有密切联系。
- 丁美华沙芳吴建峰叶翔毕宏生
- 关键词：近视肾阳虚屈光度眼轴长度
- 负透镜诱导豚鼠视网膜中γ-氨基丁酸及其受体的表达被引量：4
- 2015年
- 背景 研究表明,抑制性氨基酸神经递质γ-氨基丁酸（GABA）在近视的发生和发展过程中发挥关键作用,GABA及GABA受体拮抗剂对近视发生的抑制作用已被证实,但相关作用机制的研究鲜见报道.目的 探讨负透镜诱导性近视（LIM）豚鼠视网膜中GABA及其受体亚型表达的变化,探讨GABA及GABA受体拮抗剂抑制近视发生的机制.方法 采用随机数字表法将40只3周龄健康三色短毛豚鼠随机分为正常对照组和模型组.正常对照组取右眼作为正常对照眼,模型组右眼佩戴-10 D透镜4周以诱导近视模型作为实验眼,左眼不戴镜作为对照眼.分别于造模前及造模后4周用A型超声法和带状光检影法测量各组豚鼠的眼轴长度和屈光度;于造模后4周断颈法处死豚鼠并分离视网膜,采用高效液相色谱分析（HPLC）法检测豚鼠视网膜中GABA含量的变化,采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测豚鼠视网膜中GABA受体mRNA的相对表达量. 结果 造模后4周,模型组实验眼、正常对照眼和模型组对照眼屈光度分别为（-3.39±0.70）、（1.03±0.68）和（0.77±0.64）D,模型组实验眼近视屈光度较正常对照眼和模型组对照眼均明显增大,差异均有统计学意义（t=-16.382、-17.113,均P＜0.05）;模型组实验眼、正常对照眼和模型组对照眼眼轴长度分别为（8.62±0.08）、（8.31±0.05）和（8.32±0.05） mm,模型组实验眼眼轴较正常对照眼和模型组对照眼明显延长,差异均有统计学意义（t=10.981、15.838,均P＜0.05）;豚鼠正常对照眼、模型组实验眼、模型组对照眼视网膜中GABA含量分别为（14.83±1.20）、（18.63±1.58）和（15.74±0.96） μmol/g,模型组实验眼视网膜中GABA含量明显高于正常对照眼和模型组对照眼,差异均有统计学意义（t=-6.045、6.876,均P＜0.05）;模型组实验眼视网膜中GABAA受体、受体GABAC受体mRNA的相对表达量明显高于正常对照眼,差异均有统计学�
- 沙芳赵雯徐超立王玲张小燕吴建峰毕爱玲郭大东毕宏生
- 关键词：Γ-氨基丁酸Γ-氨基丁酸受体视网膜
- 电针对透镜诱导性近视豚鼠闪光视网膜电图的影响
- 目的:探讨电针对透镜诱导性近视(lens-induced myopia,LIM)豚鼠闪光视网膜电图(flash electroretinogram,F-ERG)的影响。方法:24只3周龄健康三色短毛豚鼠随机分为透镜诱导组...
- 丁美华叶翔毕宏生沙芳
- 文献传递
- 电针对透镜诱导型近视豚鼠视皮层中M1受体表达的抑制作用
- 2016年
- 背景近视的进展中视皮层M受体是否有变化，针灸治疗后视皮层M受体如何变化至今鲜见报道。目的观察电针对透镜诱导型近视（LIM）豚鼠视皮层中M1受体表达的影响。方法采用随机数字表法将48只3周龄三色短毛豚鼠随机分为正常对照组、近视模型组和近视电针组。正常对照组豚鼠未进行任何干预，近视模型组和近视电针组豚鼠右眼配戴-10D负性透镜共4周，近视电针组豚鼠造模即日开始每日针灸太阳穴和合谷穴30rain，共持续4周。分别于造模前和造模后4周采用检影法和A型超声仪测定各组豚鼠的屈光度和眼轴长度。测量完毕后采用过量麻醉法处死豚鼠并获取两侧视皮层组织，采用荧光定量PCR法检测各组豚鼠视皮层中M1受体mRNA的相对表达量；采用ELISA法检测各组视皮层上清液中M1受体蛋白质量浓度。结果造模后4周正常对照组、近视模型组和近视电针组豚鼠右眼的屈光度分别为（0．83±O．36）、（-3．24±0．28）和（-3．30±0．45）D，近视模型组和近视电针组豚鼠右眼的近视屈光度均明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（均P=0．000），近视模型组和近视电针组豚鼠右眼的近视屈光度差异无统计学意义（t=O．200，P=0．659）。正常对照组、近视模型组和近视电针组豚鼠右眼的眼轴长度分别为（8．33±0．08）、（8．67±0．14）和（8．60±0．06）mm，其中近视模型组和近视电针组豚鼠右眼的眼轴明显长于正常对照组，差异均有统计学意义（均P=0．000）。正常对照组、近视模型组和近视电针组豚鼠左侧视皮层M1受体mRNA的相对表达量分别为0．79±0．18、1．36±0．23和1．13±O．13，近视模型组豚鼠左侧视皮层M1受体mRNA的相对表达量均明显高于正常对照组，而近视电针组豚鼠左侧视皮层M1受体mRNA的相对表达量明显高于正常对照组而低于近视模型组，差异均�
- 王玲沙芳吴建峰叶翔毕爱玲毕宏生
- 关键词：针刺穴位受体
- 氯化锌对紫外线损伤的人晶状体上皮细胞的保护作用
- 2014年
- 目的研究适当浓度的ZnCl2对紫外线(ultraviolet B,UVB)损伤的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)的保护作用及其作用机制。方法用MTT法检测空白对照组、单纯紫外照射组和2 mg·L-1、3 mg·L-1、4 mg·L-1ZnCl2预处理后UVB照射(实验组)HLEC B-3的生存率;实时细胞电子分析系统(RT-CES)动态监测ZnCl2(2mg·L-1、3 mg·L-1、4 mg·L-1)预处理对UVB照射后HLEC B-3细胞增殖的影响;DAPI染色法检测各组细胞核的变化;实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HLEC B-3中caspase-12 mRNA和蛋白质表达的变化。结果 MTT结果表明,单纯紫外照射组和ZnCl2(2 mg·L-1、3 mg·L-1、4 mg·L-1)预处理实验组24 h细胞生存率分别为34.47%±9.31%、65.91%±12.46%、64.30%±16.24%和46.36%±6.28%;48 h细胞生存率分别为8.31%±1.38%、53.82%±11.34%、59.25%±7.58%和36.57%±8.41%;72 h细胞生存率分别为6.75%±3.71%、48.29%±10.06%、56.53%±8.47%和39.57%±8.93%。RT-CES分析结果显示,ZnCl2(2 mg·L-1、3mg·L-1、4 mg·L-1)预处理可抑制UVB照射诱发的HLEC B-3的坏死和凋亡;DAPI染色结果表明,ZnCl2可减少UVB照射引起的HLEC B-3细胞核固缩和碎裂;RT-PCR和ELISA检测结果表明,ZnCl2可抑制UVB照射诱发的caspase-12 mRNA和蛋白质的表达升高。结论适当浓度的ZnCl2可抑制UVB照射后HLEC B-3中caspase-12的表达上调,进而对体外培养的HLEC B-3细胞UVB损伤起到保护作用。
- 杜宇翔郭大东唐凯司俊康沙芳毕宏生
- 关键词：锌离子晶状体上皮细胞紫外线CASPASE-12
- 透镜诱导性近视豚鼠生物参数及巩膜胶原含量的改变
- 2014年
- 目的探讨生物参数和巩膜胶原在透镜诱导性近视（LIM）发生发展过程中的变化及其机制。方法实验研究。选取3周龄英国种雄性三色短毛豚鼠36只，随机分为透镜诱导组（24只）和空白组（12只）。透镜诱导组右眼戴-10D透镜诱导4周后进行检影验光和眼轴测量，并检测后极部和前部／赤道部巩膜干重、厚度。盐酸水解后检测2组相同面积后极部巩膜水解液中羟脯氨酸及氨基酸总量的改变。数据采用t检验分析。结果透镜诱导4周后豚鼠模型眼与对侧眼相比发生轴性近视（t=-14.90，P〈0.01），并伴有眼轴的明显延长（t=14．76，P〈0．01），差异有统计学意义，后极部巩膜干重和巩膜厚度较空白组均有明显降低（t=3．98、6.67，P〈0．01），同时后极部氨基酸总量呈下调趋势（t=3．29，P〈0．01）。结论透镜诱导可以引起豚鼠玻璃体腔的延长、后极部巩膜干重减轻、厚度变薄、胶原合成减少等一系列改变，减弱了巩膜的抵抗力，使眼轴易于延展而发生近视。
- 赵雯徐超立毕宏生沙芳张小燕杜然然吴建峰毕爱玲
- 关键词：近视巩膜胶原羟脯氨酸动物
