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熊炜: 作品数：45 被引量：188H指数：8; 供职机构：上海出入境检验检疫局更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家高技术研究发展计划上海出入境检验检疫局科研基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>

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小鼠肝炎病毒核酸快速检测方法的建立和应用被引量：11: 2013年; 为满足口岸对入境噬齿类动物快速检疫的需要,建立小鼠肝炎病毒(Mouse hepatitis virus,MHV)快速核酸检测方法。方法使用引物和TaqMan荧光探针设计软件,针对MHV保守基因设计引物和探针,建立了RT-PCR和Real-time RT-PCR方法检测噬齿类动物临床样本中MHV的方法。结果本研究建立的RT-PCR和Real-time RTPCR检测MHV方法具有良好的特异性和敏感性,通过将建立的方法应用于MHV阳性鼠临床样品的检测,证实两种MHV核酸检测方法具有良好的稳定性。结论本研究建立的RT-PCR和Real-time RT-PCR检测MHV的方法,适用于动物粪便、尿液等易于获得样本的检测。; 熊炜蒋静张强刘俊平魏晓锋黄忠荣李健胡建华; 关键词：小鼠肝炎病毒 RT-PCR REAL-TIME RT-PCR

口蹄疫病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量：28: 2009年; 利用逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP),建立了口蹄疫病毒快速检测方法,同时评价了该方法的灵敏性和特异性。结果表明,根据口蹄疫病毒多聚蛋白基因保守区段设计的LAMP引物能够在65℃下,1 h内实现目标核酸区段的大量扩增,检测结果可直接用肉眼判断。该检测体系具有极高的特异性,只能检测到目标病毒,与其他类似病毒如猪水泡病病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒等无交叉反应,可检测到10-5稀释度的目标病毒核酸量,比普通RT-PCR的灵敏性高100倍,比荧光PCR高10倍。; 李健陈沁熊炜方雪恩; 关键词：口蹄疫病毒

猴逆转录病毒RT-PCR和Real-time RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 2013年; 猴逆转录病毒(Simian type D retrovirus,SRV)是引起猴获得性免疫缺陷综合征(Simian acquired immunodeficiency syndrome,SAIDS)的病原之一,其严重危害猴的健康,并威胁与猴接触人员的健康,是无特定病原体(SPF)猴必须排除的病毒之一。为了应对口岸对进出境野生及实验用灵长类动物SRV感染情况的监测和流行病学调查的需要,建立了RT-PCR和real-time RT-PCR检测SRV的方法,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行了验证。; 熊炜蒋静张强盘宝进李健魏晓锋黄忠荣胡建华; 关键词：RT-PCR REAL-TIME RT-PCR TAQ

Real-time PCR方法和PCR方法检测虾白斑综合征病毒被引量：3: 2007年; 由白斑综合征病毒引起的虾白斑综合征是国际兽医局(OIE)规定的必须上报的水生动物二类疫病。本研究首先通过设计新的PCR引物,提高了PCR检测白斑综合征病毒的阳性检出率。为进一步提高白斑综合征病毒检测的灵敏度,本研究采用TaqMan探针技术建立了快速检测白斑综合征病毒的real-time PCR方法,通过与常规PCR方法比较,证实其检测灵敏度显著提高。; 熊炜邱璐李健蒋静王巧全李树清杨锡佺胡永强; 关键词：白斑综合征病毒 REAL-TIME PCR PCR

裸鼠过度角化症牛棒状杆菌的分离鉴定被引量：6: 2011年; 2010年8月一批进口入境的裸鼠在隔离期间发生了疑似国外文献报道的过度角化性皮炎,为了确诊该病及鉴定该病的病原,本研究从患病裸鼠皮肤组织分离到一株革兰氏阳性杆菌。细菌纯化后经Biolog自动生物鉴定仪系统初步鉴定为牛棒状杆菌(C.bovis);提取细菌基因组,PCR扩增16S rRNA基因,测序结果经比对与GenBank中的C.bovis同源性在99%以上;培养物感染裸鼠没有出现临床症状,但组织学检查显示,感染裸鼠表皮棘皮层增厚,表现出轻微的C.bovis感染特有的棘皮症。由此可以确认这次入境裸鼠暴发的疫病为过度角化症,病原为C.bovis。本研究首次报道了在我国实验动物设施暴发的裸鼠过度角化症,提示裸鼠感染C.bovis导致的过度角化症是实验动物质量监测中不可忽视的传染病。; 张强熊炜李健李树清王巧全黄忠荣陈粹; 关键词：裸鼠病原分离鉴定

液相芯片技术及其在水产病毒病检疫中的应用展望: 2012年; 液相芯片技术是20世纪90年代中期发展起来的,集合流式细胞技术、激光技术、数字信号处理技术及传统化学技术为一体的新型生物分子检测技术。具有高通量、高灵敏度、高准确度、高精密度、宽的线性范围及操作简便等众多优势,可用作蛋白质和核酸等生物分子的高通量检测平台。现对液相芯片的发展、原理及该技术在水产品检疫中的应用前景作一简介。; 王艳李雯雯陈政晓熊炜; 关键词：液相芯片水产品检疫

体外胞质分裂阻滞微核试验和体外染色体畸变试验检测甲基硝基亚硝基胍（MNNG）遗传毒性研究: 目的应用体外胞质分裂阻滞法微核试验和体外染色体畸变试验研究MNNG的遗传毒性,并探讨其剂量效应关系,研究体外微核和染色体畸变试验应用于化学物遗传毒性检测的可行性。方法应用MTT试验检测不同浓度MNNG对CHL,细胞生存率...; 李小林邱璐蒋静刘俊平李健熊炜卞俐娜; 关键词：MNNG 体外微核遗传毒性; 文献传递

鼠脑心肌炎病毒TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立: 2017年; 目的建立快速诊断鼠脑心肌炎病毒感染的荧光定量RT-PCR方法。方法根据鼠脑心肌炎病毒(EMV)PEC9毒株全基因组序列(Gen Bank登录号:DQ288856.1),设计一对特异性引物和TaqMan探针,建立EMV的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法,进行条件优化,检测其特异性,敏感性,稳定性。结果建立的荧光定量PCR方法,标准曲线的线性关系良好,r2值可达0.99,敏感性最低检测限为1个拷贝数,高于普通PCR方法 1000倍,其特异性强,与其他常见感染的小鼠病毒株均无特异性扩增,批内和批间变异系数均小于2%。利用该方法对上海市120份小鼠心肌样品进行检测,未检测到阳性感染。结论本研究为鼠脑心肌炎病毒感染的分子检测,为制定国家标准提供良好的方法。; 蔡骁垚张泉陈懿斐林颖峥熊炜魏晓锋陈鸿军; 关键词：EMV TAQMAN探针荧光定量RT-PCR

大鼠疑似泰勒氏病毒荧光定量检测方法的建立: 2017年; 目的建立一种能在临床上快速、准确地检测大鼠疑似泰勒氏病毒(Theiler’s-like virus of rats,TLV)的方法,采用TaqMan探针荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)技术,特异性针对TLV病毒核酸进行检测。方法通过基因合成序列作为质粒标准品的模板,同时选择特异性的序列在3622~3729 nt处,设计一对引物和TaqMan性探针,优化反应体系及条件,进行qPCR扩增,从而建立TLV TaqMan探针qPCR方法,并对其灵敏度、稳定性和特异性进行评价。结果建立的TLV qPCR检测方法,标准曲线线性关系良好,R^2值可达到0.99,灵敏性最低能够检测到10个拷贝数/μL,对比普通PCR方法,高出其100倍;对其他常见大鼠病毒均无非特异反应;重复性良好,批内和批间变异系数均小于1%。结论利用TaqMan探针建立快速检测TLV的荧光定量PCR方法,该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性好等特点。; 蔡骁垚魏晓锋熊炜陈懿斐林颖峥张泉陈鸿军; 关键词：TAQMAN 荧光定量PCR

水产品中主要禁用药物和毒素快速检测新型技术标准研究: 李健王艳王权陈沁王巧全熊炜陈政晓张强; 1)在建立单通道液相芯片检测己烯雌酚、甲孕酮、氯霉素和孔雀石绿的基础上，率先自主研制同时检测水产品中孔雀石绿、氯霉素、己烯雌酚、甲孕酮的新型生物液相芯片.2)采用针对隐性孔雀石绿(为孔雀石绿在鱼体内的主要代谢产物)单抗研...; 关键词：; 关键词：水产品试剂盒

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