王东
- 作品数：14 被引量：51H指数：5
- 供职机构：南通医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 神经再生素对皮层细胞基因表达影响的基因芯片研究被引量：10
- 2003年
- 目的 :采用基因芯片技术 ,观察神经再生素对体外培养的胚鼠大脑皮层细胞基因表达的影响。方法 :取ICR胚鼠 (15d)大脑皮层细胞 ,无血清培养。实验组加入神经再生素 (2 μg/ml) ,对照组加入等量基础培养液。培养 6h后 ,抽提实验组和对照组皮层细胞总RNA ,经反转录分别用Cy5、Cy3荧光标记成cDNA探针。将荧光标记的cDNA与MGEC 40s基因表达谱芯片杂交 ,芯片扫描、数据处理。结果 :实验组和对照组大脑皮层细胞出现 64条差异性表达的基因。呈现上调的基因有 :钙调素结合蛋白、锌指蛋白激酶、核糖体蛋白等基因 ;下调基因有 :抑制细胞分裂因子等基因。结论 :神经再生素可作用于体外培养的胚鼠大脑皮层细胞 。
- 丁斐顾星星王东顾晓松
- 关键词：神经再生素皮层细胞基因表达基因芯片
- 神经再生素对体外培养的小鼠皮层神经元活性的影响被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨中药提取物———神经再生素对小鼠大脑皮层神经元噻唑蓝 (MTT)代谢率的影响。方法 :以原代培养的小鼠大脑皮层神经元为模型 ,MTT微量比色法观察神经再生素不同浓度对大脑皮层神经元的存活率的影响。结果 :培养的大脑皮层神经元的MTT微量比色法的OD570 值指标 ,在神经再生素和神经生长因子组间无明显差异 ;而与空白组间差异有显著性意义。结论
- 王东于彬
- 关键词：神经再生素体外培养小鼠中药提取物
- 在小鼠活体内建立离子电泳模型的实验研究被引量：1
- 2004年
- 目的 :建立一种动物体内离子电泳的实验模型。方法 :采用常规电泳仪和自制特殊的正负极插针以及示踪染液 ,在一定的电场强度和时间内进行活体内离子电泳。结果 :能将离子和 (或 )小分子物质从某一部位泳向另一部位 ,使用经特殊处理的染液能显示出到达的部位和到达靶组织 (器官 )的量。结论
- 王东孟凡迅
- 关键词：离子电泳电泳仪药物导入小鼠
- 周围神经43kDa蛋白的免疫化学研究
- ＜正＞ 制备周围神经43kDa蛋白单克隆抗体,并检测该蛋白在正常及损伤坐骨神经中的表达。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳系统,从周围神经组织中分离回收43kDa蛋白作为抗原,免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术,点膜印迹法...
- 顾晓松何江虹王东丁斐张沛云
- 文献传递
- 中药神经再生素作用于背根神经节细胞过程中基因的表达变化被引量：7
- 2003年
- 目的 探讨中药神经再生素 (NRF)作用的分子生物学机制。 方法 采用半定量PCR方法 ,观察和比较NRF组、NGF组和空白对照组中生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)、低分子量神经丝蛋白 (NF L)、翻译延伸因子 2A3 2(EF Ts ,RRAJ5 16 1)和锌指样蛋白DDP2 (F196 315 )基因水平的表达变化。 结果 在NRF作用于离体培养的DRG细胞过程中 ,GAP 4 3、NF L、2A3 2和DDP2基因表达在不同时间呈不同程度的上调。 结论 NRF促神经生长的作用与NGF相似 ,可作用于蛋白翻译水平 ,促进神经细胞的生长 ;作用于细胞骨架蛋白水平 ,维持神经细胞的形态和神经细胞正常生理活动 ;作用于神经细胞特异的蛋白水平 ,具有维持细胞生存及促进神经细胞突起生长的作用 ;还可以作用于反式因子调控水平 ,影响相关基因的表达 。
- 刘梅王林芳丁斐王东顾晓松
- 关键词：神经再生素背根神经节细胞分子生物学生长相关蛋白43
- 神经再生素对大鼠大脑皮层细胞的作用被引量：1
- 2003年
- 目的 :观察神经再生素 (NRF)作用于离体培养的SD大鼠大脑皮层细胞过程中细胞活性、基因的表达变化 ,探讨NRF促神经生长机制。方法 :SD大鼠大脑皮层细胞分离、培养于含NRFL15培养基 ,采用RT PCR方法检测培养细胞生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)、神经丝蛋白 (NF L)和锌指样蛋白 (DDP2 )基因经NRF作用后基因表达变化 ,MTT法检测细胞活力。结果 :2 μg/mlNRF作用于培养大脑皮层细胞为较佳使用浓度 ;NRF作用 6～ 12h ,GAP 4 3、NF L和DDP2基因表达分别上调至峰值 2 0 0 % ,15 0 % ,135 % ;NRF作用 2 4h后 ,基因表达回复至正常值 ,而细胞活力仍上调 2 3 2 %。结论 :NRF可通过上调神经生长相关基因表达 ,提高细胞活力达到促神经生长。
- 顾星星丁斐王林芳王东顾晓松
- 关键词：神经再生素基因表达细胞活性大脑皮层细胞
- 肺腺癌细胞株培养方法改进被引量：1
- 2001年
- 目的 :探讨培养条件及冻存方法对肺腺癌细胞株的影响。方法 :在培养基中放弃使用抗生素 ,控制细胞传代、消化条件 ,采用快速冻存法保存细胞。结果 :37℃ ,5 % CO2 孵箱培养 2 h左右开始贴壁 ,8h左右完全贴壁 ,48～6 0 h可形成单层。结论 :(1)只要切实注意无菌操作规程 ,培养基中无需常规使用抗生素 ;(2 )控制胰酶条件、离心速度可减少细胞培养过程中的损伤 ;(3)细胞快速冻存法优于传统的慢速冻存法。
- 王亚非王东谢晓谦杨莉
- 关键词：肺腺癌细胞株细胞培养肺肿瘤
- 培养的雪旺氏细胞S-100蛋白酶联免疫细胞化学染色法被引量：5
- 1999年
- 目的：以酶联免疫细胞化学技术显示培养的雪旺氏细胞。方法：采用抗Ｓ－１００蛋白的小鼠单克隆抗体，以酶联抗小鼠抗体，联苯胺、过氧化氢显色。结果：雪旺氏细胞整个胞体及突起呈深棕褐色，成纤维细胞未见着色呈透明状态。结论：Ｓ－１００蛋白的单克隆抗体酶联免疫细胞化学技术，可特异性地显示培养的雪旺氏细胞。
- 王东王晓冬张沛云顾晓松
- 关键词：细胞培养雪旺氏细胞S-100蛋白
- 周围神经65KD蛋白单克隆抗体的制备被引量：1
- 1998年
- 神经化学诱向生长的研究是神经科学中的一个重要方向。本文以自然系统聚丙酰胺凝胶电泳,分离提取坐骨神经损伤后的远侧端中具有诱神经生长作用的65KD蛋白。以该蛋白作为抗原免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术获得一株(VI5E)稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。免疫印迹法表明,该单克隆抗体特异性地与65KD区带结合。免疫组化法显示,在损伤后的坐骨神经远侧端组织中的雪旺氏细胞呈阳性反应。单克隆抗体的制备为进一步阐明该蛋白的生物学特性奠定了基础。
- 沈爱国周亚军张沛云柯靖王东姚登兵顾晓松
- 关键词：周围神经单克隆抗体
- 三氧化二砷对肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2抑制作用的研究被引量：11
- 2005年
- 目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3)对肝癌细胞株的抑制作用。方法 :用不同浓度的 As2 O3处理人肝癌细胞株 SMMC- 772 1、Hep G2及正常人肝细胞株 L- 0 2 ,应用四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT法 )观察 As2 O3对细胞生长的影响 ,并与 3种常用抗癌药羟基喜树碱 (HCPT)、顺铂 (DDP)及 5 -氟脲嘧啶 (5 - Fu)的抑制率进行比较。结果 :低浓度的 As2 O3、HCPT、DDP及 5 - Fu对 SMMC- 772 1、Hep G2两种肝癌细胞株的抑制率分别是 86 .3% ,4 3.2 % ;4 .2 % ,4 2 .1%和 76 .7% ,4 5 .6 % ;19.8% ,18.6 % ,As2 O3的抑瘤作用最强 (P<0 .0 5 ) ,而对正常人肝细胞株的抑制较弱。浓度≥ 2 .0 μm ol/ L 的 As2 O3对 SMMC- 772 1和 Hep G2的抑制作用差异均无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :As2 O3体外试验能有效抑制肝癌细胞株的生长 ,且在一定浓度范围内 。
- 周艳顾星星胡亚娥王东于志坚
- 关键词：原发性肝细胞癌三氧化二砷四甲基偶氮唑盐比色法5-氟脲嘧啶
