王密
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 酸性鞘磷脂酶在酒精性肝病肝纤维化组织中的表达
- 2013年
- 目的探讨酒精性肝病肝纤维化大鼠组织中酸性鞘磷脂酶的表达情况。方法用乙醇灌胃加高脂饮食诱导大鼠肝纤维化模型。将26只Wistar大鼠分为2组：正常对照组6只、模型组20只。用光学显微镜、电子显微镜及Masson染色观察肝组织病理学变化，应用免疫组织化学、Rail—timePCR、Westemblot等方法检测肝组织中酸洼鞘磷脂酶的表达。用SPSS软件分析，组间均数比较用Student-t检验结果肝纤维化大鼠肝脏组织中酸性鞘磷脂酶的mRNA（1．1±0．6比2．2±1．9）和蛋白质（1．00±0．36比1．80±1．26）水平均比正常组明显增加差异均有统计学意义。结论酸性鞘磷脂酶在酒精性肝纤维化发展中起到一定作用。
- 王密曹芹芳刘萍陆小丹张淑娟唐望先吴翠环
- 关键词：肝硬化酸性鞘磷脂酶
- 肝泰胶囊对大鼠乙醇性肝纤维化的治疗作用被引量：5
- 2013年
- 目的探讨肝泰胶囊对大鼠乙醇性肝纤维化的治疗作用及其可能的机制。方法将42只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、乙醇模型组、肝泰治疗组。采用光镜、电镜观察各组肝组织病理学改变,Masson染色观察各组肝纤维化程度。采用放射免疫法测定血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)的含量,同时用半自动生化仪检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、T-CHOL(总胆固醇)、TG(甘油三酯);分光光度仪检测丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),还原型谷胱甘肽(GSH),γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT),以及免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果治疗组与模型组相比:①肝组织肝纤维化程度明显改善;②肝组织胶原纤维面积明显减少;③血清透明质酸、谷丙转氨酶、总胆固醇、γ-谷氨酰转肽酶水平显著降低(均P<0.05);④肝功能损伤明显减轻。结论肝泰胶囊对乙醇性肝纤维化有一定的治疗作用,能显著改善大鼠乙醇性肝组织损伤,减轻肝纤维化。
- 曹芹芳虞涤霞王密吴翠环舒柏华唐望先
- 关键词：肝泰
- 肝泰胶囊对大鼠酒精性肝病的防治作用被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨肝泰胶囊对大鼠酒精性肝病(ALD)的防治作用及其可能的机制。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为正常组10只,采用普通饲料喂养;模型组18只,高脂饲料喂养,同时灌喂酒精性混合液;预防组12只,高脂饲料喂养,同时给予肝泰胶囊和酒精混合液。实验时间为4个月。采用光镜、电镜观察大鼠肝组织病理学改变;M asson染色观察各组大鼠肝纤维化程度;采用放射免疫法测定血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ-)、Ⅳ型胶原(Ⅳ)的含量;用半自动生化仪检测丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST);分光光度仪检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT);免疫组化检测α-平滑肌蛋白(α-SMA)抗体的表达。结果:预防组与模型组比:①预防组大鼠肝组织肝纤维化程度明显改善;②肝组织胶原纤维面积明显减少;③血清透明质酸显著降低;④肝功能损伤明显减轻。结论:肝泰胶囊能显著改善酒精性肝病大鼠的肝损伤,提示该药对酒精性肝病有一定的防治作用。
- 曹芹芳虞涤霞王密吴翠环舒柏华李安意唐望先
- 关键词：肝泰胶囊酒精性肝病
- 不同时期血吸虫肝损伤模型小鼠肝脏组织病理学及肝功能的动态观察被引量：4
- 2012年
- 目的观察不同时期血吸虫肝损伤模型小鼠肝脏组织病理学和肝功能的变化,为血吸虫肝损伤的研究提供理论依据。方法雄性Balb/c小鼠通过腹部皮肤贴敷尾蚴的方法制备血吸虫肝损伤模型。分别在制模后第1、3、6、9周各处死模型鼠10只,第11周和正常对照组各处死6只。取肝脏、脾脏和肾脏组织并称重,计算各个时期小鼠的肝脏指数、脾脏指数及肾脏指数;肝脏组织分别行苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察肝损伤的病理变化和胶原纤维的沉积。摘除眼球取全血用全自动生化仪检测血清中的谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST);放射性免疫法检测血清中的透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)。结果血吸虫肝损伤模型制备成功。随着时间的推进,模型鼠的肝脏组织在第6周逐渐出现嗜酸性肉芽肿结节、胶原纤维及虫卵的沉积;肝脏指数和脾脏指数在第6周逐渐升高,第6、9、11周时与正常组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),肾脏指数无明显变化。ALT、AST在第6周达到高峰,而后下降,但均高于正常组水平(均P<0.01)。HA和PCⅢ分别在第6周和第3周达到高峰,而后下降,但仍高于正常组水平(均P<0.01);LN在第1、3、9周明显升高(均P<0.01);Ⅳ-C在第1周和第3周明显升高(均P<0.01),而后降至正常水平。ALT、AST水平与HA水平呈正相关(r=0.32、0.29,P<0.05)。结论随着时间的推进,血吸虫肝损伤模型小鼠的肝纤维化程度逐渐加重,肝脏和脾脏是晚期血吸虫病主要的损伤器官,ALT和AST可基本反映肝脏的损伤情况,HA和PCⅢ可较敏感地反映血吸虫肝损伤模型小鼠的肝纤维化程度。
- 刘萍王密陆小丹唐望先
- 关键词：血吸虫肝损伤病理改变
- 脂筏在CB2受体介导的内源性大麻素AEA抑制大鼠肝星状细胞增殖活性中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨脂筏在内源性大麻素受体2(CB2)介导的内源性大麻素(AEA)抑制大鼠肝星状细胞(HSC)增殖活性中的作用及作用机制。方法构建大麻素受体2shRNA(Cnr2-shRNA)转染HSC细胞,干扰CB2受体的表达,采用MTT法检测转染前后不同浓度的AEA和甲基-β-环糊精(MCD)对HSC的作用效应;采用Western blot检测不同浓度AEA及MCD作用后HSC中P38丝裂原活化蛋白激酶(p-P38MAPK)和c-Jun氨基端激酶/应激活化蛋白激酶(p-JNK)的表达量;采用激光共聚焦法检测HSC上的脂筏(LRs)以及CB2受体的表达;蔗糖密度梯度离心法提取脂筏,Westernblot鉴定脂筏并检测脂筏中CB2受体的表达。结果成功构建Cnr2-shRNA转染筛选Cnr2-单克隆细胞株,MTT检测发现转染后CB2受体的减少能减弱AEA对HSC细胞增殖的抑制作用,然而用MCD预处理HSC细胞后CB2受体的减少对AEA的效应无明显影响。p-P38MAPK和p-JNK的表达与AEA浓度有依赖关系,且可以被MCD部分拮抗。CB2受体在HSC膜脂筏和胞质中均有表达,但用蔗糖密度梯度离心法提取AEA刺激前HSC细胞脂筏,发现未受AEA刺激时脂筏中含有的CB2受体量很少,CB2受体大部分存在于HSC细胞胞质中。结论 CB2受体参与AEA抑制HSC细胞增殖的过程与脂筏相偶联,通过脂筏这个信号平台AEA的刺激可能使CB2受体聚集或增多从而发挥级联放大效应,且这一效应与细胞中p-P38MAPK和p-JNK信号途径的激活有关。脂筏和CB2受体介导的信号传导途径可能成为治疗肝纤维化有效的作用靶点。
- 吴文杰王密刘萍阳乔唐望先
- 关键词：内源性大麻素脂筏肝星状细胞
- 内源性大麻素对血吸虫肝纤维化小鼠原代肝星状细胞增殖和磷酸化-Erk表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的观察内源性大麻素（AEA）对血吸虫肝纤维化小鼠原代肝星状细胞（HSC）增殖及磷酸化-Erk（P-Erk）的影响，为大麻素在肝纤维化领域的研究提供理论依据。方法（1）腹部皮肤贴敷尾蚴建立血吸虫肝纤维化模型；（2）HE和Masson染色证实肝纤维化形成；（3）非连续密度梯度离心法提取原代HSC；（4）α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和结蛋白免疫荧光双重染色鉴定原代HSC，（5）二甲基偶氮唑盐法检测AEA对HSC增殖的影响；（6）Westernblot检测AEA对HSC磷酸化-Erk表达的影响。多个样本的均数比较采用单因素方差分析，若方差齐则采用LSD检验，若方差不齐采用DunnettT3检验。结果（1）成功建立血吸虫肝纤维化模型：HE染色显示嗜酸性肉芽肿形成，Masson染色显示出现围绕血管的胶原纤维沉积；（2）成功提取高纯度的原代HSC：纯度约为95％；（3）AEA能呈浓度依赖性地抑制HSC的增殖：5、10、20、40、60、80、100、120μmol／L组AEA对HSC的抑制率分别为5．14％士1．61％、10．34％±3．22％、14．1±3．98％、18．64％±3．67％、23．86％±3．06％、62．81％±7．75％、70．39％7．11％、72．31％±6．71％；（4）AEA能呈浓度和时间依赖性地增加P-Erk的表达：20、60、120μmol／L组的平均灰度值分别为39．90±4．61、43．45±0．91、52．91±1．97，与阴性对照组（19．21±1．60）相比，P值均〈0．05；在15、30min，1、3、6、12、24、48h的平均灰度值分别为85．05±15．80、103．41±11．89，118．02i12．24、109．17±15．69、100．86±10．55、71．70±12．87、34．62±14．85、22．84±11．73，与阴性对照组（19．21±1．60）相比，在15、30min，1、3、6、12h，6个时间点比较，P值均〈0．05。结论内源性大麻素AEA能通过激活Erk信号通路，抑制血吸虫肝纤维化小鼠原代HSC的增殖。
- 刘萍王密陆小丹张淑娟唐望先
- 关键词：细胞增殖肝星状细胞
