王建军
- 作品数：18 被引量：61H指数：5
- 供职机构：杭州师范大学临床医学院附属医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局科研项目国家自然科学基金浙江省医学会临床科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 下调DC-SIGN-ManLAM结合信号恢复树突状细胞活化初始T细胞的能力
- 2010年
- 目的探讨利用RNAi下调DC-SIGN与ManLAM结合信号对树突状细胞(dendritic cells,DCs)活化初始T细胞能力的影响。方法利用筛选出的人DC-SIGN分子RNAi有效靶点,构建并包装产生慢病毒表达载体。实验分为:干扰组、空载体组和空白对照组。利用慢病毒表达载体下调DCs表面DC-SIGN分子水平,流式细胞仪、RT-PCR及Westernblot检测各组DCs DC-SIGN分子水平变化,在LPS存在下,与ManLAM共培养18 h后,流式细胞仪检测DCs表面成熟标志物,ELISA方法检测DCs刺激CD4+CD45RA+初始T细胞向Th1分化能力,以了解下调DC-SIGN与ManLAM结合信号对DCs活化初始T细胞的能力的影响。结果①包装慢病毒产生浓缩病毒悬液的滴度为1×109TU/ml。②流式细胞仪检测干扰组DCs表面DC-SIGN分子表达水平较其余2组显著降低(F=14.19,P<0.05),RT-PCR检测干扰组DC-SIGN目的条带灰度值/内参灰度值(0.252 5±0.139 6)与空白对照组(0.572 2±0.190 9)及空载体组(0.548 7±0.119 3)相比灰度值显著下降(F=8.142,P<0.05),Western blot检测干扰组DCs内DC-SIGN蛋白水平均显著低于空载体组和空白对照组(F=51.376,P<0.05)。③干扰组DCs的成熟标志物CD86(F=15.59,P=0.004)、CD83(F=18.03,P=0.003)、HLA-DR(F=7.684,P=0.022)水平较空载体组和空白对照组明显增高。④DCs与初始T细胞共培养,干扰组分泌IFN-γ(F=18.434,P=0.003)、IL-2(F=31.08,P=0.001)水平较空载体组和空白对照组显著增高。结论利用RNAi慢病毒载体下调DCs表面DC-SIGN水平,减弱DC-SIGN与ManLAM结合信号,能够恢复DCs的成熟受阻,最终使得DCs活化初始T细胞的能力恢复。
- 李兰郭述良王建军邬亭亭
- 关键词：树突状细胞DC-SIGNRNA干扰
- 清肺化痰祛瘀汤联合西药治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期疗效观察被引量：25
- 2017年
- 目的观察清肺化痰祛瘀汤联合西药治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期的临床疗效并探讨其机制。方法将患者86例按随机数字表法分为治疗组与对照组,对照组给予西医常规治疗,治疗组在西药治疗的基础上联合清肺化痰祛瘀汤治疗,治疗结束后对两组患者的临床疗效进行评价,并对比治疗前后肺功能指标、血气分析指标及中医证候积分变化情况。结果治疗组患者的临床总有效率为95.35%,显著高于对照组的79.07%(P<0.05);治疗后,两组患者的FEV1%、FEV1/FVC%均较治疗前升高,且治疗组治疗后FEV1%、FEV1/FVC%显著高于治疗后对照组(P<0.05);治疗后,两组患者的Pa O2显著较治疗前升高,Pa CO2较治疗前降低(P<0.05),且治疗后治疗组患者的Pa O2明显高于治疗后对照组,Pa CO2明显低于治疗后对照组(P<0.05),两组p H治疗前后无显著变化(P>0.05);治疗后,治疗组与对照组患者的中医证候积分均较治疗前降低(P<0.05),且治疗组治疗后的中医证候积分显著低于对照组(P<0.05)。结论清肺化痰祛瘀汤联合西药治疗COPD急性加重期疗效显著,可有效改善患者肺功能。
- 阮肇扬王建军戴一帆吕群宋秋英姜海波
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病急性加重期中西医结合
- RNA干扰DC-SIGN表达对树突状细胞成熟及功能的影响
- 2010年
- 目的研究慢病毒介导RNA干扰树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子(DC-specific ICAM-3grabbing nonintegrin,DC-SIGN)分子表达及干扰后对树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟度及功能的影响。方法分离健康人外周血单核细胞,用GM-CSF和IL-4刺激诱导DCs。培养第4天分3组:RNA干扰组、阴性对照组和空白对照组,按实验设计加入病毒共孵育12h后换液,继续培养60h后用荧光显微镜观察转染效率及荧光强度,培养第6天加LPS刺激成熟。第7天收集细胞用RT-PCR检测DC-SIGN mRNA水平,Western blot检测DCs总DC-SIGN蛋白表达水平,流式细胞仪检测DCs表面DC-SIGN水平,ELISA检测DCs培养上清液中IL-12、IL-10水平,混合淋巴细胞反应检测DCs对CD4+T淋巴细胞刺激增殖能力的影响。结果①荧光显微镜显示感染复数(MOI)为20时,DCs感染病毒的效率达85%。②RT-PCR证实RNA干扰后DC-SIGN mRNA表达水平(0.2525±0.1396)显著低于另2组(0.5722±0.1909、0.5487±0.1193),差异有统计学意义(F=8.142,P<0.05)。③Western blot检测干扰组DCs内总DC-SIGN水平(0.3237±0.0570)显著低于另2组(0.590±0.014、0.578±0.023),差异有统计学意义(F=51.376,P<0.05)。④流式细胞仪检测干扰组DCs表面表达DC-SIGN水平[(43.10±10.12)%]显著低于另2组[(73.05±8.11)%、(74.49±5.56)%],差异有统计学意义(F=14.19,P<0.05)。⑤各组间成熟标志物HLA-DR及CD86差异无统计学意义(P>0.05)。⑥ELISA结果显示各组DCs培养上清液中IL-10、IL-12水平差异无统计学意义(P>0.05)。⑦混合淋巴细胞反应结果显示各组DCs诱导CD4+T淋巴细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢病毒介导的RNA干扰能有效抑制DCs表面DC-SIGN分子表达,抑制DC-SIGN表达对DCs成熟度及DCs功能无影响。
- 王建军郭述良李兰邬亭亭
- 关键词：慢病毒属RNA干扰细胞黏附分子
- 生脉胶囊联合一代EGFR-TKI靶向治疗晚期非小细胞肺癌的疗效分析被引量：3
- 2020年
- 目的探讨生脉胶囊联合一代表皮生长因子受体(EGFR)-酪氨酸激酶抑制剂(TKI)靶向治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的疗效。方法选取2018年1月-2019年9月杭州师范大学附属医院收治的晚期NSCLC患者90例,按照随机表法分为生脉胶囊组、EGFR-TKI组、联合组,每组30例。3组患者采取常规治疗及最佳营养支持治疗。生脉胶囊组口服生脉胶囊;EGFR-TKI组口服一代TKI靶向药物凯美纳;联合组口服EGFR-TKI和生脉胶囊,用法用量同上。3组疗程均为3个月。比较3组疗效、治疗前后卡氏功能状态量表(KPS)评分、免疫功能变化,以及不良反应发生情况。结果联合组客观有效率均高于生脉胶囊组和EGFR-TKI组(P<0.05)。3组疾病控制率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。联合组治疗前后KPS评分的差值低于生脉胶囊组和EGFR-TKI组(P<0.05)。联合组治疗前后CD3^+、CD4^+和CD4^+/CD8^+的差值高于生脉胶囊组和EGFR-TKI组(P<0.05)。3组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论生脉胶囊联合一代EGFR-TKI靶向药物凯美纳治疗晚期NSCLC疗效较好,可改善患者生存质量,提高免疫功能。
- 陆秀婷吕群阮肇扬王建军
- 关键词：酪氨酸激酶抑制剂临床研究性
- ManLAM对树突状细胞成熟及下游免疫的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:研究结核分枝杆菌(MTB)成分带甘露聚糖帽的脂阿拉伯甘露聚糖(mannose-capped lipoarabinomannan,ManLAM)对树突状细胞(dendriticcells,DCs)成熟及下游免疫的影响。方法:分离健康人外周血单个核细胞,用GM-CSF和IL-4诱导DCs生长,培养至第五天换液加细胞因子,第六天分三组,按实验设计加ManLAM和LPS。第七天收集细胞送流式检测DC-SIGN、HLA-DR、CD86、CD83表达水平;ELISA检测DCs培养上清液中IL-12和IL-10水平;混合淋巴细胞反应检测DCs诱导CD4+T淋巴细胞增值能力;DCs与初始CD4+CD45RA+T细胞共培养48小时后,ELISA检测培养上清液中IFN-γ水平。结果:(1)ManLAM组DCs表达CD86、CD83等成熟标志物较成熟DCs组下降,差异有统计学意义(P<0.05);(2)ManLAM组DCs培养上清液中IL-10水平较成熟组升高,IL-12水平较成熟组下降,差异有统计学意义(P<0.05);ManLAM组DCs刺激淋巴细胞增殖能力及刺激初始CD4+CD45RA+T细胞向Th1细胞分化能力较成熟组下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ManLAM干扰DCs成熟,下调DCs诱导的淋巴细胞增殖能力和激活初始CD4+CD45RA+T细胞向Th1细胞分化能力。
- 王建军郭述良李兰邬亭亭
- 关键词：树突状细胞结核病DC-SIGN
- SP-A,D在宿主抗甲型流感病毒中的作用
- 2010年
- 肺泡表面活性蛋白A,D(SP-A,D)在宿主对抗甲型流感病毒(IAV)感染中起着重要的作用。SP-A能识别并中和IAV上的血凝素,而SP-D则主要结合IAV上的神经氨酸酶,致使IAV失活。它们都能抑制IAV复制能力及IAV对肺泡上皮细胞的初始感染能力。此外,它们都能介导并增强巨噬细胞、中性粒细胞吞噬和杀灭IAV作用。现就SP-A,D在宿主抗IAV感染中发挥的作用予以综述。
- 杨勇琼王建军郭述良
- 关键词：甲型流感病毒血凝素神经氨酸酶糖基化作用
- C型凝集素在结核病发病机制中的作用被引量：3
- 2010年
- C型凝集素（C．type lectins）是一类非酶、非抗体蛋白质，其活性依赖于Ca2＋，以跨膜蛋白和水溶性蛋白两种形式存在。C型凝集素的共同结构特征是具有1个或多个糖识别域，能选择性识别并结合病原微生物的糖结构域。C型凝集素根据糖识别域1级结构的不同可分为蛋白聚糖、Ⅰ型跨膜受体、Ⅱ型跨膜受体、胶原凝集素、选凝素及自然杀伤细胞受体6个家族，其中胶原凝集素、Ⅰ型跨膜受体和Ⅱ型跨膜受体与结核病的发病机制密切相关。
- 王建军郭述良罗永艾
- 关键词：C型凝集素发病机制结核病自然杀伤细胞受体跨膜受体结构特征
- CT引导下经皮肺穿刺活检380例临床分析被引量：9
- 2018年
- CT引导下经皮肺穿刺活检是一种常用的肺部病变的诊断方法。自1978年Haaga等[1]首次报道CT引导下经皮肺穿刺活检术后,现已广泛应用于临床,是临床诊断肺部占位性病变的重要检查方法。本研究通过回顾性分析我科收治的380例进行CT引导下经皮肺穿刺活检的肺部占位患者,从而探讨CT引导下经皮肺穿刺活检术的临床应用价值及安全性,报道如下。1对象与方法回顾性研究2013年1月至2017年3月于杭州师范大学附属医院呼吸科进行的380例CT引导下经皮肺穿刺活检病例,其中男218例,女162例;年龄20～88岁,平均（61.5±14.5）岁。
- 戴一帆吕群阮肇扬王建军余瑜曼余涛
- 关键词：CT引导经皮肺穿刺活检气胸肺出血
- 糖尿病合并肺结核患者外周血的免疫功能探讨被引量：5
- 2011年
- 目的探讨糖尿病(diabetes mellitus,DM)合并肺结核(tuberculosis,TB)病人外周血是否存在免疫缺陷。方法分离肺结核病人、糖尿病合并肺结核病人和健康人外周血单个核细胞,用1640完全培养基培养,加结核杆菌滤液刺激,48h后收集上清液,ELISA检测上清液中IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平。诱导培养巨噬细胞,用巨噬细胞吞噬结核杆菌悬液,24h后裂解巨噬细胞培养未被杀灭的结核杆菌,10d后计数菌落数。结果①第9天巨噬细胞具有典型的结构特征。②DM+TB组巨噬细胞分泌TNF-α水平(597.5±69.1)pg/mL显著低于另两组[TB组(688.2±64.8)pg/mL,健康组(839.3±74.5)pg/mL],差异有统计学意义(F=18.48,P<0.05);TB组低于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。③DM+TB组巨噬细胞分泌NO水平(57.3±14.6)μmol/L显著低于另两组[TB组(83.5±23.3)μmol/L,健康组(108.9±22.3)μmol/L],差异有统计学意义(F=9.522,P<0.05);TB组低于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。④DM+TB组巨噬细胞内未被杀灭的结核杆菌数(lg CFU)(6.14±0.154)高于另两组[TB组(5.97±0.132)、健康组(5.77±0.127)],差异有统计学意义(F=11.165,P<0.05);TB组高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病合并肺结核病人体内巨噬细胞活化能力降低,分泌TNF-α、NO水平减少,巨噬细胞杀灭结核杆菌能力降低。糖尿病病人容易感染肺结核可能与其巨噬细胞免疫功能降低有关。
- 杨勇琼周晓明王建军
- 关键词：糖尿病结核病巨噬细胞结核杆菌
- 解毒抗瘤方对肺癌化疗患者减毒增效作用的效果观察被引量：1
- 2017年
- 目的:观察中药解毒抗瘤方对肺癌化疗患者的减毒增效作用。方法:86例肺癌患者,随机分为观察组和对照组,每组43例。对照组接受常规化疗,观察组在常规化疗基础上服用解毒抗瘤方,连续用药2个月。评价临床疗效,对患者的生活质量进行KPS评分,记录生存时间,计算1年生存率,观察胃肠道副反应(恶心、呕吐)及血液毒性并进行组间比较。结果:观察组临床缓解率为37.4%,明显优于对照组的23.3%,2组间差异具有统计学意义(P<0.05);观察组患者生活质量改善明显优于对照组,中位生存时间为11.1个月,较对照组明显延长(7.3个月),1年生存率观察组为51.2%,明显高于对照组之32.6%,统计学处理,差异具有显著意义(P<0.05);观察组胃肠道副反应及血液毒性均较对照组减轻,差异具有显著性(P<0.05)。结论:中药解毒抗瘤方对肺癌化疗患者具有减毒增效作用。
- 阮肇扬戴一帆姜海波王建军余瑜曼陈芳芳吕群
- 关键词：肺癌化学疗法减毒增效作用
