王林青
- 作品数：55 被引量：206H指数：6
- 供职机构：郑州师范学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省高校科技创新团队支持计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 铁皮石斛多糖超声-微波协同提取条件优化及其抗氧化活性被引量：2
- 2023年
- 以铁皮石斛为原料,采用超声-微波协同法提取铁皮石斛多糖。选择液料比、微波时间、微波功率、超声时间为单因素,以铁皮石斛多糖提取率为评价指标,通过响应面试验对超声-微波协同法提取铁皮石斛多糖进行优化。确定最佳工艺参数为液料比50∶1(mL/g)、微波时间120 s、微波功率370 W、超声时间30 min,在此条件下铁皮石斛多糖提取率为30.56%。根据体外抗氧化活性评价表明,铁皮石斛多糖对羟自由基的清除能力低于维生素C,对α-葡萄糖苷酶表现出明显的抑制能力,具有较好的体外降血糖作用;另外,铁皮石斛多糖对α-淀粉酶也有一定的抑制作用。
- 王林青宁灿灿李蕊潘中闪任红涛
- 关键词：铁皮石斛超声-微波协同提取响应面抗氧化性
- 猪源抗PDCoV-N蛋白的scFv及其表达载体、构建方法和应用
- 本发明属于分子生物学领域领域，涉及猪源抗PDCoV‑N蛋白的scFv，特别是指猪源抗PDCoV‑N蛋白的scFv及其表达载体、构建方法和应用。猪源抗PDCoV‑N蛋白的scFv，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。...
- 魏战勇王林青宋月张艺璇刘中原刘石
- 不同氮肥浓度对高产小麦光合色素形成的影响被引量：3
- 2016年
- 不同氮素水平对光合色素含量的影响将直接决定作物产量的高低。为了确定不同氮素水平对高产小麦生长的影响,采用荧光定量分析法研究了2种小麦在6种氮素水平条件下的生长形态变化与光合色素含量变化。结果表明：在一定范围内提高氮素浓度即氮肥营养液硝酸钙含量在0.8-1.2mmol·L-1时能够提高小麦光合色素含量,但当超过这一水平,则效果并不明显,进一步明确了氮素变化对小麦光合作用的影响。
- 王言景陈光磊王智红王林青李文增候宏业臧贺藏
- 关键词：小麦氮肥光合色素
- 一种生物实验室用离心装置
- 本实用新型涉及离心设备领域,尤其涉及一种生物实验室用离心装置，包括机箱、机箱上端开设有上端开口的离心室，机箱内竖向设置有延伸到离心室内的驱动轴，驱动轴上端同轴连接有转动盘，转动盘侧面均匀设置有多个横臂，横臂上端均开设有凹...
- 宋月王林青刘中原郭晓庆张丽萌陈龙欣
- 河南省猪伪狂犬病病毒野毒感染血清学调查及gE基因遗传变异分析
- 2023年
- 【目的】调查河南省猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)野毒流行特征及遗传变异情况。【方法】用ELISA法检测2020-2021年从河南省766个不同养殖规模猪场采集的25411份血清样本的gE抗体水平;采用PCR法对从47个猪场疑似PRV感染猪群中收集的251份病料进行gE基因扩增,并将阳性病料样品接种ST细胞进行病毒分离、gE全基因测序和遗传进化分析。【结果】血清样品gE抗体总阳性率为18.42%,从2020年的20.32%降至2021年的16.69%,猪场阳性率为50.26%。随着猪场规模增大,猪场阳性率、血清样本阳性率呈下降趋势;商品代养殖场、屠宰场和种猪场的场阳性率、血清样本阳性率依次降低;豫东、豫西、豫南、豫北和豫中血清gE抗体阳性率分别为15.05%、23.48%、16.50%、16.69%和20.10%,1-3月阳性率最高,10-12月最低。组织病料样品中PRV阳性率为15.14%(38/251),从PRV阳性病料样品中共分离出9株PRV分离株。gE全基因序列遗传进化分析结果显示,分离株都属于GenotypeⅡ型,且猪群中既有PRV经典株也有PRV变异株。【结论】河南省猪场中仍然存在PRV感染,且同时存在PRV经典株和PRV变异株,本研究结果为河南省猪伪狂犬病的防控与净化提供参考依据。
- 王林青赵丽陈曦艋吴少峰韩莹莹刘芳金钺陈红英
- 关键词：血清学调查GE基因
- 绵羊CREBRF基因克隆、生物信息学及组织表达分析
- 2022年
- 【目的】对绵羊Luman/CREB3募集因子(CREBRF)基因进行克隆和生物信息学分析,并检测其在绵羊不同组织中的表达量,为探究CREBRF基因在绵羊中的生物学功能提供理论参考。【方法】以绵羊卵巢cDNA为模板,通过PCR扩增和克隆绵羊CREBRF基因完整CDS区序列,并进行相似性比对、系统进化树构建及生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR方法检测CREBRF基因在绵羊不同组织中的表达水平。【结果】绵羊CREBRF基因CDS区序列全长1920 bp,编码639个氨基酸。相似性比对结果表明,绵羊CREBRF氨基酸序列与山羊、牛、人、小鼠、猪、犬、马、鸡、鸭和斑马鱼的相似性分别为99.8%、99.1%、95.4%、93.6%、98.3%、97.5%、98.4%、88.0%、87.5%和61.3%。系统进化树分析结果显示,绵羊与山羊、牛的亲缘关系最近,与斑马鱼亲缘关系最远。生物信息学分析发现,绵羊CREBRF蛋白分子式为C_(3126)H_(4914)N_(858)O_(1056)S_(21),分子质量为72.08 ku,等电点(pI)为4.77,半衰期为30 h,肽链N-端为蛋氨酸(Met),不稳定系数为54.83;CREBRF蛋白存在于细胞核内,不具备跨膜性,无信号肽,为亲水性不稳定蛋白。CREBRF蛋白二级结构主要以无规则卷曲(47.57%)为主,其次为α-螺旋(37.09%)。实时荧光定量PCR结果显示,CREBRF基因在绵羊不同组织中均有表达,其中在心脏、肾脏和卵巢中表达量显著高于其他组织(P<0.05)。【结论】本试验获得了绵羊CREBRF基因CDS区全长序列,并初步研究了其组织表达规律,为研究绵羊胚胎发育的调控机制及提高繁殖力等提供了材料。
- 张丽萌刘爱菊李闰婷李闰婷李林聂晓宁王林青陈龙欣
- 关键词：绵羊生物信息学分析
- 金银花、山银花黄酮类提取物体外抗伪狂犬病病毒作用研究被引量：35
- 2011年
- 分别提取湖南金银花和山银花黄酮类活性成分,利用Vero细胞体外培养系统,通过观察细胞病变效应(CPE)来评价中药金银花和山银花黄酮类提取物体外抑制伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)对细胞的感染作用,并通过MTT法检测细胞活性。研究比较金银花、山银花的抗病毒作用,初步探讨中药抗病毒机制。结果表明:在安全浓度范围内,金银花和山银花黄酮类提取物均具有显著的抗病毒作用,体外对PRV分别具有明显的阻断、抑制和中和作用,其中山银花对PRV体外的抑制作用强于金银花,而阻断作用和中和作用,两者差异不显著。
- 王林青崔保安张红英
- 关键词：金银花山银花伪狂犬病病毒黄酮类VERO
- 甜菜夜蛾化学感受蛋白SexiCSP3结合特性分析被引量：2
- 2015年
- 本研究构建夜蛾科昆虫化学感受蛋白系统进化树,发现化学感受蛋白在种间保守性强,并与气味结合蛋白明显分为两类。运用反转录RT-PCR方法克隆了Sexi CSP3基因,并在大肠杆菌中正确表达,重组Sexi CSP3蛋白纯化后通过荧光竞争结合实验测定其与24种外源气味分子的结合特性。结果表明:Sexi CSP3与苯甲醛、苯乙酮、2-戊基-3-苯丙基-烯醛、1-苯基-1-丁酮、对甲氧基苯甲醛的结合能力较强,解离常数为0.76、1.39、2.23、3.23和5.30μmol/L,推测Sexi CSP3可能参与了甜菜夜蛾对这5种化学物质的识别过程。
- 邓培渊袁伟李玉华王林青李长看
- 关键词：甜菜夜蛾化学感受蛋白解离常数
- 表达高致病性和NADC30样PRRSV毒株GP5蛋白的重组伪狂犬病病毒的构建
- 2023年
- 参考猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)株HENAN-XINX基因组序列(GenBank登录号:KF611905)中GP5基因,合成1对特异性引物,BamHⅠ和HindⅢ分别引入到其5′端,RT-PCR扩增NADC30样PRRSV(NADC30-like PRRSV)毒株GP5基因。将扩增片段插入到真核表达质粒pBApo-EF1α_Pur_DNA的BamHⅠ和HindⅢ位点,然后扩增含GP5/NA的表达盒,将其导入含高致病性PRRSV(HP-PRRSV)GP5基因的伪狂犬病病毒(PRV)转移质粒pG-GP5/HP-EGFP中,构建重组质粒pG-GP5/HP-GP5/NADC30-EGFP。用脂质体转染法将PRV变异株3基因缺失株rPRV-gE-/gI-/TK-基因组与pG-GP5/HP-GP5/NADC30-EGFP质粒共转染ST细胞,得到携带有HP-PRRSV和NADC30-like PRRSV的GP5基因和绿色荧光蛋白标记基因的重组PRV株rPRV-GP5/HP-GP5/NADC30-EGFP。该重组病毒与CRISPR/Cas9-EGFP敲除质粒共转染ST细胞,经4轮病毒空斑纯化得到了无绿色荧光标签的重组病毒rPRV-GP5/HP-GP5/NADC30株。经PCR和RT-PCR证实成功构建重组病毒rPRV-GP5/HP-GP5/NADC30。
- 王林青侯承尧马晓刘颖刘芳金钺陈红英
- 关键词：GP5基因
- 猪细小病毒河南地方株HP104的分离与生物学特性鉴定被引量：3
- 2013年
- 采用PCR方法对河南采集的疑似PPV病料进行PCR检测，PCR检测为阳性的病料接种猪睾丸细胞，分离到1株病毒，命名为HP104。通过观察细胞病变（CPE）、病毒滴度TCID50和血凝效价的测定、理化特性试验等研究病毒的特性，利用电镜观察病毒的形态，NSI基因PCR扩增及测序分析。该病毒在sT细胞上连续盲传10代后，细胞出现了较稳定的CPE，传代至第15代时病毒血凝效价基本稳定为2，到第20代时TcID50达到10TCID／0．1mL左右。该毒株对热、pH3．0酸、氯仿、胰蛋白酶有抗性。在电镜下可观察到近似球形的病毒粒子，大小约23～26nm。PCR扩增产物与预期一致，与其他PPV毒株NSI基因序列同源性高达99％以上。该病毒特征与猪细小病毒特征基本相符，初步证实分离的病毒为猪细小病毒。
- 吴宇阳陈龙彪崔保安王林青卢权威钞安军李坤魏战勇陈红英
- 关键词：猪细小病毒
