王浩丞
- 作品数：9 被引量：54H指数：4
- 供职机构：四川农业大学动物医学院鱼病研究中心更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划通威股份科研项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学建筑科学金属学及工艺更多>>
- 海豚链球菌cpsD基因的克隆、原核表达及基于cpsD基因的间接原位PCR方法的建立
- 从1976年海豚链球菌首次从淡水海豚上分离报道以来,其不但逐渐成为危害世界水产养殖业的主要病原菌,而且近年来关于海豚链球菌感染人的报道时有可见,海豚链球菌病成为了一种世界范围内的人和鱼类的共患疾病,引起了越来越多的人对该...
- 王浩丞
- 关键词：海豚链球菌克隆分子特性分析原核表达
- 文献传递
- 景观都市主义思想下城市工业废弃地设计与修复初探
- 随着我国城市化进程的加快,城市工业废弃地的出现成为必然。在我国提倡生态文明和可持续发展的大背景下,社会的目光逐渐转向这些工业废弃地,它们一方面承载了历史的记忆,另一方面也对环境造成了污染。如何解决城市工业废弃地带来的一系...
- 王浩丞
- 关键词：景观都市主义城市工业废弃地生态设计修复改造
- 文献传递
- 罗非鱼源无乳链球菌双重PCR快速检测方法的建立被引量：23
- 2011年
- 根据GenBank中罗非鱼源无乳链球菌荚膜多糖的cpsF基因和CAMP因子的cfb基因序列,设计2对特异性引物,通过对反应体系和反应条件优化,并进行特异性试验、敏感性试验及人工感染罗非鱼组织样品检测,建立了快速检测无乳链球菌的双重PCR方法。结果显示,仅无乳链球菌能扩增出cpsF和cfb两条特异性条带,而海豚链球菌、金黄色葡萄球菌、鮰爱德华氏菌、嗜水气单胞菌、杀鲑气单胞菌、豚鼠气单胞菌、嗜麦芽寡养单胞菌无条带检出;经敏感性试验,最小模板检出量为7.632×10-2ng/μL;同时对30尾人工感染无乳链球菌的罗非鱼肝和肾组织中细菌DNA进行双重PCR检测和细菌分离鉴定,检出的阳性结果一致。证实,所建立的方法具有快速、特异、灵敏的优点,适用于对罗非鱼等无乳链球菌的感染病例进行流行病学监测。
- 王均汪开毓肖丹黄锦炉付希王浩丞陈德芳耿毅阳涛
- 关键词：无乳链球菌罗非鱼
- 斑点叉尾源海豚链球菌DGX07株simA基因克隆、鉴定及分子特性分析
- 2012年
- 以Primer p14(5'-GATCAAGTCC-3')为引物对分离自患病斑点叉尾海豚链球菌强毒株DGX07进行RAPD分析。同时参照GenBank中海豚链球菌simA基因序列设计特异性引物,以DGX07基因组DNA为模板,扩增出约1 500 bp的simA基因,并将其克隆到pMD19-T载体上,之后对重组质粒进行PCR和双酶切(BamHⅠ+XhoⅠ)鉴定,鉴定正确后送测序公司测序。RAPD分析结果显示,DGX07和标准菌株均能扩增出750 bp大小的条带。通过生物信息学软件对测序结果分析显示,simA基因全长1 566 bp,由521个氨基酸组成,与海豚链球菌simA和simB亲缘性达100%,存在1个由41个氨基酸组成的信号肽,具有Bap31和Gram_pos_anchor两个超家族的保守结构域;具有与蛋白翻译后修饰功能相关的磷酸化位点22个和N-糖基化位点2个,编码多肽链中亲水区大于疏水区,是一种膜外蛋白,并具有多个抗原优势位点区域。密码子偏爱性分析表明,斑点叉尾源海豚链球菌simA基因密码子使用频率差异较大,密码子偏爱性与酵母较为接近。获得GenBank登录号为JF330100。
- 汪开毓王均肖丹陈德芳黄锦炉黄凌远付希王浩丞
- 关键词：海豚链球菌克隆
- 斑点叉尾鮐源维氏气单胞菌对四环素类抗生素的耐药性及耐药基因的检测
- 采用纸片扩散法和微量肉汤稀释法对四川地区42株斑点叉尾鮐源维氏气单胞菌进行了四环素类抗生素的药物敏感性试验；采用PCR法检测了四环素类耐药基因TETA、TETB、TETC、TETD和TETE.结果显示,42株菌中有28株...
- 赵敏汪开毓王均陈德芳黄凌远王浩丞
- 关键词：维氏气单胞菌四环素强力霉素耐药基因
- 文献传递网络资源链接
- 无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)三重PCR快速检测方法的建立与应用被引量：11
- 2012年
- 参照GenBank发表的无乳链球菌sip、cpsE这两个高度保守基因设计两组特异性引物,应用已报道的无乳链球菌cpsL基因高度保守序列的引物作为阳性对照引物,经反应条件和反应体系参数优化,建立一种检测无乳链球菌的三重PCR方法,并应用本三重PCR方法检测40尾人工感染罗非鱼样本和22尾临床上收集的疑似无乳链球菌感染鱼样本。结果表明,所建立的三重PCR方法具有良好特异性,检测无乳链球菌DNA样本时出现三条扩增条带,检测其他7种供试菌株DNA则不出现出任何扩增条带,对无乳链球菌DNA样本的最低检测浓度为0.32ng/μl,最适Mg2+浓度为37.5mmol/L,整个检测过程耗时100min左右。40尾人工感染罗非鱼的肝脏、肾脏组织DNA样本阳性检出率分别为100%,22尾疑似无乳链球菌感染鱼的肝脏、肾脏组织DNA样本阳性检出率分别为72.7%,以上两批样本检测结果与常规细菌鉴定方法结果一致。
- 黄锦炉汪开毓肖丹刘贝贝王均黄凌远付希王浩丞
- 关键词：无乳链球菌三重PCR
- 罗非鱼源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)Sip基因的克隆、鉴定及分子特性分析被引量：4
- 2011年
- 利用设计的特异性引物,扩增出了分离自患病罗非鱼无乳链球菌强毒株Sip基因,并将其克隆到pMD19-T载体上,之后对重组质粒进行了PCR和双酶切(BamHⅠ+HindⅢ)鉴定,并利用多种生物信息学软件对Sip基因进行分子特性分析。结果显示,罗非鱼源无乳链球菌Sip编码氨基酸序列具有极高保守性,与人源、哺乳动物源无乳链球菌亲缘性达100%,存在1个由25个氨基酸组成的信号肽,具有1个与免疫调节功能相关的LysM结构域,具有与蛋白翻译后修饰功能相关的磷酸化位点33个和N-糖基化位点2个,编码多肽链中疏水区大于亲水区,是一种膜外蛋白。密码子偏爱性分析表明,罗非鱼源无乳链球菌Sip基因密码子使用频率差异较大,密码子偏爱性与真核生物较为接近。
- 黄锦炉汪开毓肖丹王均付希王浩丞连海
- 关键词：无乳链球菌克隆分子特性
- 罗非鱼源无乳链球菌cpsE基因的克隆和分子特性分析被引量：5
- 2011年
- 利用特异性引物,采用PCR扩增出分离自患病罗非鱼无乳链球菌强毒株的cpsE基因,将其克隆到pMD19-T载体上,通过菌落PCR鉴定和利用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ对重组质粒进行双酶切鉴定之后送测序公司测序,并利用生物信息学软件C lustal X 2.0、MEGA4.1、B ioed it 7.0、TMHMM、NetPhos 2.0、NetNG lyc 1.0、SignalP 3.0 Server、PSIpred、SAM_T08以及CUSP等分析cpsE基因的分子特性。结果显示,罗非鱼源无乳链球菌cpsE编码氨基酸序列具有高度保守性,与人源、动物源无乳链球菌亲缘性达100%,具有1个参与催化糖基元转运的G lycosyltransferases超级家族结构域,具有与蛋白翻译后修饰功能相关的磷酸化位点3个,编码多肽链中亲水区大于疏水区,且存在跨膜区。密码子偏爱性分析表明,罗非鱼源无乳链球菌cpsE基因密码子使用频率差异较大,密码子偏爱性更接近真核生物。
- 汪开毓付希肖丹黄锦炉王均王浩丞
- 关键词：无乳链球菌克隆分子特性
- 斑点叉尾源维氏气单胞菌对四环素类抗生素的耐药性及耐药基因的检测被引量：19
- 2014年
- 维氏气单胞菌（Aeromonas veronii）为气单胞菌属（Aeromonas）的一种,亦被称为维罗纳气单胞菌、凡隆气单胞菌和维隆气单胞菌,存在于水体和淤泥等环境中[1],能够感染斑点叉尾（Ictalurus punctatus）[2,3]、锦鲤（Cyprinus carpio L.）[4]、西伯利亚鲟（Acipenser baerii）[5]、鲱形白鲑（Coregonus clupeaformis）[6]、华鲮（Sinilabeo rendahl）[7]、框镜鲤（Cyprinus carpio）[8]等多种鱼类。其中,斑点叉尾感染维氏气单胞菌近几年才被发现,其发病率可达30%以上,病鱼死亡率在50%以上,给养殖户造成了巨大的经济损失,也严重制约了斑点叉尾养殖业的健康发展[2,9]。
- 赵敏汪开毓王均陈德芳黄凌远王浩丞
- 关键词：维氏气单胞菌四环素耐药基因CATFISH
