王海娟
- 作品数：34 被引量：91H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- MTA1及其抑制剂的制药用途
- 本发明涉及MTA1及其抑制剂的制药用途。具体而言，本发明发现了MTA1维持干细胞干性及促进肿瘤干细胞的行为，并且可以是以肿瘤干细胞为靶点的肿瘤治疗策略的分子靶点。MTA1可以用于制备维持干细胞干性的制剂，而MTA1的抑制...
- 钱海利林晨刘健詹启敏王海娟
- 文献传递
- 一种预测乳腺癌对曲妥珠单抗联合化疗治疗敏感性的生物标志物
- 本发明公开了一种预测乳腺癌对曲妥珠单抗联合化疗治疗敏感性的生物标志物，具体的涉及预测HER2阳性乳腺癌患者对曲妥珠单抗靶向治疗联合化疗治疗敏感性的TRBV7‑7生物标志物，本发明通过高通量二代测序方法，对曲妥珠单抗联合化...
- 徐兵河马飞樊英王海娟王文娜易宗毕
- 文献传递
- 基于多数据库分析代谢相关基因DLAT在结直肠癌中的表达及其临床意义
- 目的 筛选与结直肠癌患者生存相关的代谢相关基因,探讨二氢硫辛酰胺转乙酰基酶(DLAT)在结直肠癌组织中的表达情况及其与临床病理特征和预后的关系,建立DLAT 共表达分子调控网络.方法 利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库...
- 王婷李春晓南鹏王劲松张竞尧周彦彤董德操王海娟钱海利
- 关键词：结直肠癌代谢相关基因
- 基于随机森林算法的宫颈癌淋巴结转移相关基因的生物信息学筛选被引量：2
- 2016年
- 目的分析与淋巴结转移最相关的基因集和基因集中的关键节点性基因,为宫颈癌淋巴结转移预测潜在干预靶点。方法利用TCGA宫颈癌患者转录组数据集,使用随机森林算法对淋巴结转移最相关基因进行分析和排名,使用STRING和Cytospace对这些相关基因进行互作网络分析,筛选对其他基因具有最广泛相互作用的基因节点,使用DAVID对这些基因在整体上进行功能识别。结果获得淋巴结转移相关基因重要性排序(2784个),并获得其中的关键节点基因(前13位分别为EGFR,NOTCH1,RHOA),这些基因均与淋巴结转移显著相关(P<0.05)。与淋巴结转移最相关的基因主要聚集在趋化因子信号通路、MAPK通路、细胞间相互作用、黏着连接、细胞骨架调控、wnt通路等。对这些有意义的宫颈癌转移相关基因集在统计学上进行了验证,获得的关键节点基因如EGFR,NOTCH1,RHOA在临床水平均已发现与宫颈癌淋巴结转移显著相关。结论随机森林算法是一个有效的方法,采用此方法获得的宫颈癌转移相关的基因集有很大比例与淋巴结转移显著相关。
- 范淑英李春晓王婷周春霞钱海利王海娟詹启敏
- 关键词：宫颈癌淋巴结转移生物信息学
- 宫颈癌中转移相关基因MTA1高表达的临床意义及其协同表达基因的生物信息学分析被引量：8
- 2016年
- 目的分析转移相关基因MTA1高表达与宫颈癌临床转移的相关性,并筛选MTA1协同表达基因网络中的潜在干预靶点基因。方法应用SPSS软件分析TCGA-CESC数据集中MTA1与宫颈癌转移和病理分级的相关性,应用edge R软件分析该数据集中MTA1高表达组与低表达组的全转录组差异表达基因,应用DAVID平台对这些差异表达基因进行聚类分析,应用STRING在线平台和Cytospace软件对这些基因进行互作网络分析,筛选关键的网络节点基因。结果TCGA-CESC宫颈癌数据库中MTA1表达水平与肿瘤临床转移和病理分级呈显著正相关(P<0.01),在不同MTA1表达水平的宫颈癌转录组中存在显著且较一致的差异表达基因集,这些基因主要聚集在癌症通路、干细胞通路、细胞转移、细胞分化等方面,与肿瘤的恶性生物学行为显著相关。基因筛选显示,宫颈癌中与MTA1协同表达的Agt、Acta1、Fpr2、Pmch和RGS18等基因是差异表达基因集中最重要的节点基因,这些基因聚集在GPCR相关通路。结论 MTA1高表达与宫颈癌转移显著相关,且与肿瘤细胞的干细胞通路、趋化因子受体通路、细胞转移、细胞分化等基因调控网络活化相关。MTA1的协同表达基因网络中的节点基因可能参与了宫颈癌的转移调控,并最有可能成为宫颈癌治疗的分子靶点。
- 范淑英李春晓林锋李慧南楠周春霞钱海利王海娟张颖
- 关键词：宫颈肿瘤
- 肿瘤细胞CAR表达水平与5型腺病毒转导效率的关系被引量：2
- 2006年
- 目的：通过体外、体内实验探讨肿瘤细胞柯萨奇腺病毒受体（coxsackie adenovirus receptor，CAR）表达水平与腺病毒转导效率的关系，为腺病毒相关的生物制剂在临床个体化应用提供实验依据。方法：将载有绿色荧光蛋白的Ad5型腺病毒（Ad．GFP）以100MOI、200MOI分别感染人食管癌细胞系KYSE510、KYSE150、EC9706、人宫颈癌细胞系HeLa、人卵巢癌细胞系SKOV3、人肝癌细胞系HepG2和人肺癌细胞系A549，感染后48h通过流式细胞术检测Ad—GFP对不同细胞系的转导效率。采用Western blotting方法检测这些细胞中CAR的表达水平。将HeLa、A549、SKOV3、EC9706细胞分别接种于裸鼠腋下，接种细胞数分别为3×10^6、3×10^6、3×10^6、2×10^6，建立裸鼠移植瘤模型。待肿瘤长径达5～7mm时，在裸鼠移植瘤内注射Ad—GFP，每次1×10^9PFU，间隔48h注射第2次。第2次注射后48h处死裸鼠，剖取瘤组织，荧光显微镜观察冰冻切片中GFP的表达情况以判定腺病毒在瘤体内的转导效率，同时用免疫组化法检测瘤组织内的CAR表达水平。结果：200MOIAd—GFP感染A549、HeLa、HepG2、KYSE150细胞48h后分别有92．67％、89．31％、84．98％、74．59％的细胞表达GFP；而SKOV3、KYSE510、EC9706细胞中腺病毒的转导效率明显降低，GFP阳性率分别为30．06％、27．40％、18．93％；各种细胞的CAR蛋白表达水平与腺病毒的转导效率呈正相关。注射Ad—GFP的裸鼠移植瘤组织中可见HeLa、A549瘤组织内有明显的点状绿色荧光，而SKOV3、EC9706瘤组织内表达GFP的细胞数明显少于前两种瘤组织；HeLa、A549裸鼠移植瘤组织内大多数瘤细胞高表达CAR（卅），SKOV3、EC9706移植瘤组织内CAR表达水平较低（＋或-），表明瘤体内CAR表达水平与Ad．GFP的转导效率也呈正相关。结论：体内外实验均显示肿瘤细胞的CAR表达水平与5型腺病毒转导效率密切相关。肿瘤患者治疗前检测�
- 王海娟李云峰钱海利张雪燕付明梁萧詹启敏林晨
- 关键词：肿瘤腺病毒基因治疗
- Ad-PUMA用于肿瘤基因治疗的可行性研究
- 恶性肿瘤严重威胁人类健康，亟需发展多种治疗方法改善肿瘤的预后。PUMA(p53up-regulatedmodulatorofapoptosis)是2001年报道发现的具有快速强大促凋亡作用的p53下游基因。本研究旨在探讨...
- 王海娟
- 关键词：肿瘤基因治疗腺病毒化疗药物
- 文献传递
- MTA1转基因小鼠的构建及鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的将人的MTA1外源基因整合到C57BL/6J小鼠中,构建稳定高表达MTA1的小鼠模型。方法通过RT-PCR方法克隆人的MTA1编码序列,将MTA1插入真核表达载体pcDNA3.1构建pcDNA3.1-MTA1载体,回收片段后利用显微注射技术将目的基因片段注入到受精卵的雄原核中,使用MTA1特异性的引物经PCR鉴定出基因型阳性的转基因小鼠,再利用Western-blot及免疫组化方法检测MTA1在转基因小鼠全身级织表达情况。结果成功构建了MTA1转基因注射片段。在320枚显微注射受精卵中挑选出300枚存活卵移植到10只ICR小鼠假孕受体的输卵管中,10只ICR小鼠均怀孕,移植成功率为100%,共生出子代鼠80只,经PCR检测其中共有9只整合了MTA1基因,整合率为11.25%。经PCR鉴定MTA1整合阳性的F1代小鼠,再经Western-blot和免疫组化分析检测MTA1表达水平在脑、肺、肝、肠等组织中表达明显增高,肾、骨骼肌表达无差异。结论成功构建了脑、肝、肺、结肠高表达MTA1的转基因小鼠,为进一步MTA1研究奠定了良好的研究模型。
- 薛洪省王海娟刘健张丽林晨詹启敏赵志龙钱海利
- 关键词：MTA1转基因
- In Situ PLA技术原位分析MTA1与NuRD复合体其他组分的相互作用
- 2014年
- 目的原位检测肿瘤转移相关蛋白MTA1与NuRD复合体其他组分-Mi2、HDAC2及MBD3的相互作用并分析MTA1/NuRD复合体在HCT116细胞中的分布情况。方法首先利用co-IP技术体外验证MTA1与NuRD复合体其他组分Mi2、HDAC2及MBD3在HCT116细胞裂解液中的相互作用。然后利用In Situ PLA技术,体内原位检测MTA1与三者的相互作用,并根据镜下阳性荧光信号数目,比较MTA1与Mi2、HDAC2及MBD3之间的作用强弱;根据相互作用位点的亚细胞分布情况,分析间期及M期MTA1/NuRD复合体的核质分布情况。结果首次从体内原位水平证实MTA1与NuRD复合体其他组分-Mi2、HDAC2及MBD3的相互作用;其作用强度HDAC2最高,Mi2次之,MBD3最弱;首次发现MTA1/NuRD复合体存在很明显的胞质分布(约占总量的1/4);另外,我们还首次发现在M期MTA1/NuRD复合体不再位于核区,而是位于染色体外周。结论In Situ PLA技术是一项有效的原位检测蛋白相互作用的新技术;MTA1/NuRD复合体可能参与MTA1胞质中功能的发挥;并且其胞质分布可能参与M期进程调控。
- 刘健王海娟刘群李春晓刘欢黄骁舾孟希亭赵枚林晨黄常志钱海利
- 关键词：MTA1相互作用SITU
- 盐酸埃克替尼与多西他赛、培美曲塞不同联合方式对非小细胞肺癌PC-9细胞系作用的实验研究被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨盐酸埃克替尼以不同次序联合多西他赛、培美曲塞对非小细胞肺癌细胞系PC-9的作用。方法:运用xCELLigence系统检验多西他赛、培美曲塞、盐酸埃克替尼单药作用于PC-9细胞系的半数抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration,IC50),用流式细胞仪检测埃克替尼与多西他赛/培美曲塞联合的不同组合方式对PC-9细胞系的细胞周期影响及凋亡。结果:1埃克替尼对PC-9细胞作用60 h后的IC50值为5.3μM;多西他赛对PC-9细胞作用36 h后的IC50为21.5 mg·m L-1;培美曲塞对PC-9细胞作用36 h后的IC50为30μM。2Annexin V-FITC凋亡实验观察到化疗药先于埃克替尼应用对靶细胞的体外杀伤作用均明显高于其他各组,先用多西他赛组细胞凋亡率为(23±0.2)%,高于先用埃克替尼组(10.2±0.1)%和两药同时用药组(15.8±0.4)%;先用培美曲塞组细胞凋亡率为(36.3±0.03)%,高于先用埃克替尼组(14.7±0.1)%和两药同时用药组(30.6±0.03)%,差异有统计学意义(P<0.05)。3流式细胞仪周期检测结果显示埃克替尼先于多西他赛(或培美曲塞)用药或两药同时应用时PC-9细胞G0/G1期比例比多西他赛(或培美曲塞)先于埃克替尼用药组高。结论:多西他赛、培美曲塞先于埃克替尼应用方案对肿瘤细胞杀伤作用优于晚用埃克替尼或同时应用埃克替尼。
- 郭磊王键玮李爱洁汪进良刘欢李春晓王海娟钱海利胡毅
- 关键词：埃克替尼多西他赛培美曲塞肺癌
