王淳本
- 作品数：25 被引量：160H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 富含胆固醇的脂蛋白对兔主动脉平滑肌细胞脂类堆积的影响及机制被引量：2
- 1999年
- 为了观察富含胆固醇的脂蛋白对兔主动脉平滑肌细胞脂类堆积的影响及机制，用富含胆固醇的脂蛋白（β－ 极低密度脂蛋白、正常低密度脂蛋白和氧化型低密度脂蛋白） 与兔主动脉平滑肌细胞温育４８ ｈ 后，发现β－ 极低密度脂蛋白、正常低密度脂蛋白和氧化型低密度脂蛋白都能促进平滑肌细胞内总胆固醇和甘油三酯堆积，以β－ 极低密度脂蛋白的作用更显著。乳铁蛋白作为低密度脂蛋白受体相关蛋白的一种特异配体，当它与上述脂蛋白共同与平滑肌细胞温育后，发现乳铁蛋白对脂蛋白所致的平滑肌细胞内脂质堆积有抑制作用。乳铁蛋白与标记的β－ 极低密度脂蛋白、正常低密度脂蛋白和氧化型低密度脂蛋白的竞争结合实验也进一步发现乳铁蛋白可明显竞争β－ 极低密度脂蛋白、正常低密度脂蛋白、氧化型低密度脂蛋白与平滑肌细胞的结合，且对β－ 极低密度脂蛋白的竞争抑制作用尤为明显。提示β－ 极低密度脂蛋白、正常低密度脂蛋白和氧化型低密度脂蛋白可能主要通过低密度脂蛋白受体相关蛋白介导进入平滑肌细胞，导致平滑肌细胞内脂质堆积。
- 从容冯友梅宗义强王淳本瞿智玲邓耀祖
- 关键词：脂蛋白血管平滑肌细胞脂类
- 氯化锂离心纯化质粒DNA方法的建立及其效果评价被引量：3
- 1996年
- 本文建立了一种采用氯化锂离心纯化质粒ＤＮＡ的方法。该法不需要特殊的仪器设备和昂贵的试剂材料，操作简便易行。用此法对ｐＵＣ和ｐＧＥＭ等多种系统的质粒进行了提取纯化。结果表明：纯化的质粒ＤＮＡ无ＲＮＡ、蛋白质和染色质ＤＮＡ污染，其得率与氯化铯超离心法相近；酶切效果良好；可直接用于哺乳动物细胞的基因转移并获得有效表达。
- 王淳本尤颖健陶莎屈伸
- 关键词：DNA提纯氯化锂质粒
- 氧化型和正常极低密度脂蛋白对猪主动脉平滑肌细胞脂类堆积的不同影响被引量：3
- 1998年
- 为了观察氧化型及正常极低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞内脂类堆积的不同影响，探索平滑肌细胞摄取氧化型极低密度脂蛋白的受体途径，用200mg/L的氧化型及正常极低密度脂蛋白与猪主动脉平滑肌细胞温育48h后，细胞内甘油三酯含量分别为对照组的3．2倍和10．6倍（P〈0．01），且两个实验组之间相比，差异也有显著性意义（P＜0．01）；细胞内总胆固醇明显升高（P＜0．05）．但是两个实验组之间无显著差异（P＞0．05）。荧光素异硫氰酸酯标记的氧化型极低密度脂蛋白结合试验表明；平滑队细胞可通过低亲和力受体途径可饱和性地摄取完整的氧化型极低密度脂蛋白（Kd＝48．82mg／L，Bmax＝2067μg／g）。与正常极低密度脂蛋白相比（Kd＝37．17mg／L，Bmax＝2596μg／g），Kd值升高，Bmax值减小。竞争抑制实验表明，氧化型极低密度脂蛋白、正常极低密度脂蛋白及正常低密度脂蛋白均对荧光素异硫氰酸酯标记的氧化型极低密度脂蛋白的结合摄取表现出明显的竞争作用（50％），而乙酰化低密度脂蛋白仅能抑制10％。提示氧化型极低密度脂蛋白通过低密度脂蛋白受体和／或极低密度脂蛋白受体途径进入平滑肌细胞。
- 杨宇虹冯宗忱王淳本江卫国赵小松
- 关键词：VLDL动脉粥样硬化
- 氧化极低密度脂蛋白促进猪主动脉平滑肌细胞内脂类堆积的机制及其细胞毒作用
- 1997年
- 200μg／ml的氧化极低密度脂蛋白（OX－VLDL）与猪主动脉平滑肌细胞（SMC）温育48h后，细胞内甘油三酯（TG）含量为不加脂蛋白对照组的3．2倍（P＜0．01），细胞内总胆固醇（TC）含量为对照组的1．22倍（P＜0．05）。荧光素异硫氰酸酯（FITC）标记OX－VLDL的结合试验表明：SMC可摄取完整的OX－VLDL（Kd=48．82μg／ml，Bmax=2067ng／mgcellprotein）。竞争抑制试验表明，OX－VLDL及正常低密度脂蛋白（N－LDL）均对FITC－OX－VLDL的结合摄取表现出明显的竞争作用，两者的作用相似。以上结果表明，SMC能通过受体途径可饱和性地摄取完整的OX－VLDL，进而形成泡沫细胞。同时还发现OX－VLDL与SMC长时间温育（24h以上）会损伤细胞，造成部分细胞脱落。这对动脉粥样硬化及急性冠状动脉综合征发病机制研究及其预防和治疗都有重要的指导意义。
- 杨宇虹冯宗忱王淳本江卫国赵小松
- 关键词：泡沫细胞低密度脂蛋白
- 细胞培养液中微量多胺的高效液相色谱荧光检测法被引量：2
- 1995年
- 先采用Ｃ１８样品预处理小柱浓缩培养液中的微量多胺，经ＤＮＳ－Ｃｌ荧光衍生，高效液相色谱分离，荧光检测，结果可使腐胺、精脒、精胺等组份得到完全分离。精密度批内ＣＶ分别为２．４９％、２．９５％、４．２６％；批间ＣＶ为４．２９％、４．６９％、５．１６％；回收率为１０３．６％、１０１．６％、９９．０％。我们发现，许多常用人工合成培养基中均含有极低浓度的多胺，本法可分析培养细胞前后培养基中微量多胺的变化，为研究多胺对细胞增殖的调控作用提供了有用的手段。
- 王淳本柴锡禄雷景迈何善述
- 关键词：培养基多胺分光光度法高效液相色谱
- 正常人两种极低密度脂蛋白亚组分对小鼠腹腔巨噬细胞脂质堆积的影响
- 1996年
- 本文研究了正常人极低密度脂蛋白（ｖｅｒｙｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＶＬＤＬ）两种亚组分，即贫含载脂蛋白Ｅ的ＶＬＤＬ和富含载脂蛋白Ｅ的ＶＬＤＬ对小鼠腹腔巨噬细胞（ｍｏｕｓｅｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，ＭＰＭ）脂质堆积的影响。将贫含载脂蛋白Ｅ的ＶＬＤＬ和富含载脂蛋白Ｅ的ＶＬＤＬ分别与ＭＰＭ温育２４ｈ后，细胞内甘油三酯（ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ，ＴＧ）和胆固醇酯（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｙｌｅｓｔｅｒ，ＣＥ）随ＶＬＤＬ浓度的增加而增加（方差分析，Ｐ＜０．０５），且对ＭＰＭ内ＴＧ的增加量以贫含载脂蛋白Ｅ的ＶＬＤＬ居多（Ｐ＜０．０１），而对ＭＰＭ内ＣＥ的增加量两者无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。这提示，贫含载脂蛋白Ｅ的ＶＬＤＬ和富合载脂蛋白Ｅ的ＶＬＤＬ均能促进ＭＰＭ内ＴＧ、ＣＥ堆积，从而使巨噬细胞（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，ＭＰ）转变为泡沫细胞。
- 从容冯友梅宗义强王淳本袁敏邓耀祖
- 关键词：极低密度脂蛋白巨噬细胞脂质动脉粥样硬化
- 人胆汁蛋白质组双向电泳图谱的建立与初步分析被引量：9
- 2007年
- 目的建立人胆汁蛋白质组双向电泳图谱,用于胆汁比较蛋白质组学研究。方法A、B两例胆汁标本分别取自于一例肝门部胆管癌及一例胆总管结石病人。标本经脱盐、脱脂、去除核酸纯化处理后,分别各取350μg以固相pH梯度等电聚焦(IEF)为第一向,SDS-PAGE垂直电泳为第二向进行双向电泳(2-DE)。应用图像分析软件对银离子染色的2-DE图谱进行图像分析。结果经纯化处理的胆汁样本双向电泳图谱中的各个蛋白质点分离清晰,无明显的横向及纵向拖尾;A、B两例胆汁样本2-DE图谱中分别分离出250和216个蛋白质点。其中仪在A例出现的有187个,仅在B例出现的有153个;A、B两例均出现但表达量存在明显差异的有63个。结论本实验建立了一种较为理想的人胆汁蛋白质纯化制备及双向电泳技术;通过对良、恶性阻塞性黄疸胆汁2-DE图谱的匹配分析发现了大量的差异蛋白质点,为开展胆汁比较蛋白质组学研究筛选胆道疾病相关标志物奠定了前期实验基础。
- 陈波郑建伟王剑明田俊王淳本邹声泉
- 关键词：胆汁蛋白质组双向电泳比较蛋白质组学
- 兔主动脉平滑肌细胞低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的诱导表达调节被引量：2
- 2000年
- 在兔主动脉平滑肌细胞 ( SMC)培养基中分别加入正常低密度脂蛋白 ( N- LDL)、氧化低密度脂蛋白 ( ox- LDL)、正常极低密度脂蛋白 ( N- VLDL)、氧化极低密度脂蛋白 ( ox- VLDL)和 β-极低密度脂蛋白 (β- VLDL )培养 2 4 h后 ,用定量 RT- PCR和配体结合实验检测平滑肌细胞 LRP的m RNA和蛋白质水平的表达 .结果表明 :五种脂蛋白均能在转录和翻译水平诱导兔主动脉平滑肌细胞的 LRP表达 ,尤以富含胆固醇的 N- LDL ,ox- LDL和β- VLDL的刺激作用更明显 .用胆固醇单独或与脂蛋白共同温育 SMC后 ,发现胆固醇本身可促进 SMC的 LRP蛋白水平的表达 ,脂蛋白与胆固醇的共同刺激作用更为显著 .结果提示 :上述五种脂蛋白对 SMC上 LRP的表达有上调作用 ,其机制可能主要是通过其中的胆固醇来实现的 .
- 从容冯友梅王淳本宗义强邓耀祖冯宗忱
- 关键词：LRP泡沫细胞SMC
- 巨噬细胞氧化修饰极低密度脂蛋白及Cu^(2+)修饰的极低密度脂蛋白对单核细胞与内皮细胞粘附的影响
- 1993年
- 极低密度脂蛋白(VLDL)与小鼠腹腔巨噬细胞温育24小时和48小时后,其硫代巴比妥酸反应物质值明显高于无细胞对照组,琼脂糖电泳速度也加快,两者一致。结果说明小鼠腹腔巨噬细胞可以氧化修饰极低密度脂蛋白。VLDL在体外用Cu^(2+)修饰后。硫代巴比妥酸反应物质明显增加,琼脂糖凝股电泳速度加快。比较正常的VLDL(n—VLDL)及Cu^(2+)氧化的VLDL(Ox—VLDL)对内皮细胞粘附单核细胞的影响时,发现在所用各种浓度下,Ox—VLDL单核细胞的粘附率比n—VLDL组大得多(P<0.0001),说明VLDL被氧化后明显增加单核细胞与内皮细胞的粘附。
- 张志兵冯友梅宗义强王淳本袁敏冯宗忱
- 关键词：巨噬细胞脂蛋白
- 不同脂蛋白稳定前列环素生物活性的研究
- 1998年
- 不同脂蛋白稳定前列环素生物活性的研究李景东戴闺柱冯宗忱王淳本杨焰魏文宁前列环素（ＰＧＩ２）具有强大的抗血小板聚集、扩张血管和保护细胞的作用，但其半寿期仅３～５分钟［１］。Ａｏｙａｍａ报道高密度脂蛋白（ＨＤＬ）是ＰＧＩ２的稳定因子，为探讨ＨＤＬ２与ＨＤ...
- 李景东戴闺柱冯宗忱王淳本杨焰魏文宁
- 关键词：前列环素生物活性脂蛋白冠心病
