王贺
- 作品数：4 被引量：18H指数：3
- 供职机构：江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：食品科学与技术国家重点实验室目标导向资助项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 转半乳糖基β-半乳糖苷酶产生菌筛选鉴定、产酶条件优化及酶法制备乳果糖
- 2010年
- 借助形态观察、生理生化指标测定及16S rNDA序列分析,对从土壤中筛选得到的转半糖基β-半乳糖苷酶产生菌进行鉴定,确定其为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)285。通过单因子试验和正交试验,对该菌株产转半乳糖基β-半乳糖苷酶的培养条件进行优化。优化的发酵条件为:种龄6 h,起始pH值7.0,接种量3%,装液量40 mL/250 mL,30℃下发酵8 h。该培养条件下产酶量达7.21 U/mL。以0.1 mol/L、pH值7.0 K3PO4缓冲溶液配制的40%乳糖、20%果糖(w/v)溶液为底物,调整酶活力至3.5 U/mL,50℃恒温水浴反应6 h,HPLC分析转半乳糖基产物,得乳果糖产量为20.8 g/L,即3.47 g/(L.h)。
- 蒋孝燕杨瑞金王贺叶发银张燕鹏华霄
- 关键词：肺炎克雷伯氏菌Β-半乳糖苷酶乳果糖
- 密苏里游动放线菌葡萄糖异构酶基因xylA的克隆及其表达条件的优化被引量：6
- 2010年
- 为克隆、表达密苏里游动放线菌葡萄糖异构酶(GI)基因xylA,并对其诱导表达条件进行初步优化。采用Slowdown PCR方法克隆得到密苏里游动放线菌(Actinoplanes missouriensis)CICIM B0118(A)的葡萄糖异构酶基因xylA,构建pET-28a(+)-xylA表达载体,并转化至E.coliBL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并对其表达产物进行SDS-PAGE电泳。结果表明,融合蛋白分子质量约为45kD。在诱导时间9h、0.6mmol/LIPTG、30℃和OD600nm值为0.8的最适培养条件下,酶比活力最高达到62.42U/mL。
- 王贺杨瑞金华霄钱婷婷张文斌蒋孝燕
- 关键词：葡萄糖异构酶SLOWDOWNPCR
- 利用枯草芽孢衣壳蛋白表面展示β-半乳糖苷酶被引量：5
- 2012年
- 分别将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis 168)芽孢衣壳蛋白CotB、CotC、CotG和CotX的启动子和编码序列与来自嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus IAM11001)的β-半乳糖苷酶基因bgaB进行重组,构建融合表达cotB-bgaB、cotC-bgaB、cotG-bgaB和cotX-bgaB的整合型重组质粒。将4种重组质粒分别转入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168(trp-),获得了能在芽孢表面展示的重组菌株PB701、PB702、PB703和PB704。经Western blot检测,4种重组菌株均表达了预期分子量的融合蛋白,初步表明β-半乳糖苷酶被锚定在重组菌株的芽孢表面。以oNPG为底物测定4种重组菌株芽孢表面展示β-半乳糖苷酶的水解能力,得到的酶活分别为0.14、0.06、0.22和0.20 U/mL。
- 王贺杨瑞金华霄赵伟张文斌
- 关键词：芽孢Β-半乳糖苷酶WESTERNBLOT
- 传统豆渣菌的菌相分析及蛋白酶和纤维素酶主要产生菌株的鉴定被引量：7
- 2012年
- 对江西瑞金的特色发酵食品-豆渣菌进行了菌相分析,结果表明豆渣菌是以真菌和细菌为主的混合型发酵食品。真菌主要为串珠霉属(Monilia)、根霉属(Rhizopus)和酵母属(Saccharomyces);细菌主要为微球菌属(Micrococcus)葡萄球菌属(Staphylococcus)、片球菌属(Pediococcus)、异常球菌属(Deinococcus)、肠杆菌属(Enterobacterspp),非乳杆菌属和三株枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。串珠霉属真菌具有纤维素酶和蛋白酶活力,枯草芽孢杆菌和根霉属真菌则具有蛋白酶活力。
- 张燕鹏杨瑞金王贺蒋孝燕
- 关键词：菌相分析纤维素酶蛋白酶
