田国忠
- 作品数：166 被引量：834H指数：15
- 供职机构：中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家科技基础条件平台建设计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程自动化与计算机技术更多>>
- 一种用于PCR扩增的真菌DNA快速提取方法
- 本发明公开了一种用于PCR扩增的真菌DNA快速提取方法，包括以下步骤：(1)培养真菌，得到真菌菌丝体；(2)将真菌菌丝体置于装有裂解液的离心管中；(3)将离心管交替冻融；(4)离心，取上清，加入95％乙醇，混匀，液氮速冻...
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- 文献传递
- 一种适于PCR和LAMP检测的松木中松材线虫DNA快速提取方法被引量：4
- 2015年
- 【目的】本研究旨在探索快速、简便地直接从病木中提取松材线虫DNA的方法。【方法】运用Chelex-100结合异硫氰酸胍蛋白变性缓冲液建立新的高效快速提取微量木块中线虫DNA的方法,并通过普通PCR与环介导等温扩增(LAMP)对提取的DNA进行检测验证。【结果】建立了提取线虫DNA的新方法 Chelex-100法,并对影响提取效率的Chelex-100浓度、冻融时间和煮沸时间进行了优化。Chelex-100法最适Chelex-100终浓度为1.5%(W/V),最适冻融时间为5 min,最适煮沸时间为8 min。与传统的CTAB法和蛋白酶K法比较,Chelex-100法提取的DNA得率高,相同条件下,该方法提取的DNA浓度远远大于常规方法。3种方法的OD260/280比值从大到小依次为CTAB法>蛋白酶K法≥Chelex-100法,Chelex-100法的OD260/280值显著低于CTAB法,而略低于或等同于蛋白酶K法,但这并不影响对提取的DNA进行PCR扩增。采用Chelex-100法提取松木中松材线虫的DNA,结合常规的PCR和LAMP检测,检测灵敏度高,特异性强,稳定性好;提取的松材线虫DNA的75倍稀释液再稀释32倍后进行PCR扩增,扩增产物电泳依然有清晰的条带。用新方法提取病木中线虫的DNA后进行检测,所有带病松木样品的检测结果均呈阳性,而健康黑松、马尾松、油松木屑及盘多毛孢样品的检测结果均呈阴性。此外,该提取方法简便快速,20 min内即可完成整个DNA的提取;经济方便,试剂保藏无特殊要求,单个样品提取耗费低于3.5元。【结论】Chelex-100法是一种快速有效的提取松木中松材线虫DNA的方法,此方法结合PCR和LAMP检测技术将进一步提高松材线虫的检测效率、灵敏度和准确性,可为松材线虫的野外检测提供可靠的技术依据。
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- 关键词：松材线虫DNA提取
- 淡紫拟青霉的液体发酵培养方法
- 本发明公开了一种淡紫拟青霉的液体发酵培养方法，包括：制备淡紫拟青霉孢子悬浮液；制备淡紫拟青霉的液体发酵培养基；向液体发酵培养基中接种淡紫拟青霉孢子悬浮液，发酵培养；所述液体发酵培养基的组成成分包括碳源和氮源；所述的碳源选...
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- 文献传递
- 泡桐对丛枝病原MLO的抗性研究被引量：11
- 1994年
- 本试验通过试验林自然发病调查、病根苗抗病性测定及ＤＡＰＩ染色等方法，对不同无性系及杂交组合的泡桐试材抗病性进行了评估。结果表明，５～６年生泡桐自然感染ＭＬＯ后的地面部分发病现象可归纳为四种类型：丛枝型（ＷＢ）、黄化型（Ｙ）、丛林黄化型（ＷＢ＋Ｙ）和丛枝花变叶型（ＷＢ＋Ｐ）。外部发病差异与其韧皮部筛管中ＭＬＯ的含量有直接联系。一般情况下，ＭＬＯ的浓度高低依次为花变叶部位、丛枝部位、黄化部位、无症或健康部位。在根部ＭＬＯ浓度低，且无性系间差异不显著。不同无性系间或杂交组合间抗病性存在明显差别。根据病状反应、病情指数和病组织ＭＬＯ浓度测定结果，可以区分为高抗、中抗和感病三种类型。初步筛选出一批抗病性强、生长性状好有可能被利用的试材，以及生长性状差但表现出较强抗丛枝病特性的无性系或杂交组合。
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- 关键词：泡桐无性系类菌原体抗病性
- 生物技术在加拿大森林病理学中的地位和作用被引量：1
- 1991年
- 本文介绍了加拿大应用生物技术防治根腐病、溃疡病,硬松类西方瘤锈病、荷兰榆树病、种子传病害、木腐病、低温和冰核因子造成的病害以及松材线虫病方面的新进展。同时也介绍了杂交瘤和单克隆抗体技术、生物化学技术、病菌毒素研究技术、核酸研究技术和生物防治技术在病害治理中的作用。
- 田国忠
- 关键词：林木病害生物防治森林病理学
- 抗病和感病泡桐无性系组培苗对嫁接传染植原体的不同反应被引量：21
- 1999年
- 用感染了植原体并表现典型丛枝症状的组培苗作接穗或砧木，在无杂菌条件下嫁接７个表现不同田间抗性的无性系健康组培苗，并用ＤＡＰＩ荧光显微镜和１６ＳｒＲＮＡ基因扩增（ＰＣＲ）技术检验嫁接传病效果。Ｃ１２５和ＸｕＨ表现出较强的特异性接种诱发坏死反应，ＺＨ和Ｔ３５０２８坏死反应中等，ＱＬＭ、Ｃ０２０和Ｃ１６１的坏死反应较弱。培养基中添加植物生长调节剂（６ＢＡ或ＮＡＡ）可降低坏死程度，提高嫁接成功率，水杨酸处理或去掉健株砧木叶片和根系皆加重坏死反应程度。用病接穗嫁接抗病的ＱＬＭ无性系时，用ＰＣＲ检测到侵染砧木的植原体，但未表现丛枝症状，而将此无性系健康接穗嫁接到丛枝病砧木上时可诱致典型丛枝症状，从而表现出与根系和成熟叶相关的抗性反应。除Ｃ１２５外，其余６个无性系皆被嫁接传染，其继代培养表现出差异不显著的丛枝症状，其韧皮部金黄色自发荧光随着症状的加重而累积，也与抗病性有一定的联系。
- 田国忠张锡津罗飞朱水芳
- 关键词：泡桐组培苗植原体
- 生物技术在加拿大森林病理学中的地位和作用(续)
- 1991年
- 二、生物技术在林病治理中的作用现在人们越来越认识到,要改进和提高林业管理水平,必不可少地伴随着要对森林病害的更大关注。为了更充分地发挥林业生产潜力,保持健康的森林环境,必须将病害造成的损失减少到最低限度。
- 田国忠
- 关键词：病理学生物技术
- 淡紫拟青霉不同菌株对南方根结线虫卵寄生率三种处理方法的比较被引量：6
- 2004年
- 利用来自不同地域的淡紫拟青霉的13个菌株,分别用其孢子液处理南方根结线虫分散卵粒、菌丝处理分散卵粒、孢子液处理卵囊以评价淡紫拟青霉对南方根结线虫的寄生性。在被试所有菌株中,同一菌株三种不同方法对根结线虫卵的寄生率相比,孢子液处理卵囊均明显高于其他两种处理。不同菌株对南方根结线虫卵的寄生率有很大的差异。三种处理方法结果显示618号菌株寄生率均为最高。菌株对卵的寄生率与菌株地理来源无明显相关性。
- 汪来发王艳娜朴春根田国忠张路平
- 关键词：淡紫拟青霉菌株南方根结线虫寄生率卵囊
- 核酸杂交技术在植物类菌质体病害研究中的应用进展被引量：5
- 1991年
- 1967年日本学者Doi等首次用透射电镜观察植物病组织超薄切片,证明桑树萎缩病。
- 田国忠
- 关键词：植物
- 松材线虫的冷冻保存及解冻方法
- 本发明公开了一种松材线虫的冷冻保存及解冻方法，属于线虫的冷冻保存领域。本发明方法包括以下步骤：（1）预处理松材线虫悬液；（2）预处理后的松材线虫悬液中加入冷冻保护剂，平衡处理；（3）平衡处理后的松材线虫悬液程序化降温后冷...
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