石菁菁
- 作品数:6 被引量:14H指数:3
- 供职机构:北京市卫生局更多>>
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- 卵巢癌抗独特型单链抗体6B11ScFv与鼠HSP70融合蛋白的构建、表达及鉴定被引量:5
- 2008年
- 目的构建卵巢癌抗独特型单链抗体6B11ScFv与小鼠热休克蛋白70(mHSP70)融合蛋白6B11ScFv/mHSP70,并初步鉴定其免疫活性。方法根据Genebank上已发表的mHSP70基因序列(NM_010478)合成引物行PCR扩增,以扩增所得mHSP70基因插入pET30a(+)-6B11ScFv质粒后转化入E.coliDH5α,获得pET30a(+)-6B11ScFv/mHSP70重组质粒。将鉴定正确的pET30a(+)-6B11ScFv/mHSP70重组质粒转化入E.coliBL21(DE3),获得E.coliBL21(DE3)[pET30a(+)-6B11ScFv/mHSP70]重组菌株。以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并行SDS-PAGE分析,对表达产物进行复性和Ni2+-NTA柱亲和层析纯化后,采用蛋白质印迹法和ELISA方法进行鉴定和免疫活性检测。结果6B11ScFv/mHSP70融合基因测序结果基本与理论序列相符。SDS-PAGE分析显示,重组菌株表达产物相对分子质量与预期相符。复性、亲和层析纯化后的蛋白复性率达20.9%,蛋白纯度达95%以上。蛋白质印迹分析证实6B11ScFv/mHSP70融合蛋白相对分子质量为104000,ELISA检测表明其具有6B11ScFv和mHSP70的免疫活性。结论构建表达的6B11ScFv/mHSP70融合蛋白具有良好的免疫活性,为进一步研究其体内外抗卵巢癌活性奠定了基础。
- 张果昌晓红石菁菁成夜霞李巍叶雪程洪艳付天云魏丽惠崔恒
- 关键词:HSP70热休克蛋白质类重组融合蛋白质类卵巢肿瘤
- 人源化抗卵巢癌独特型微抗体的真核表达及初步特性研究
- <正>卵巢癌在妇科恶性肿瘤中发生率为第二位,但死亡率却列首位。卵巢恶性肿瘤发现时80%为晚期,尽管应用手术和多种放化疗联合治疗,预后仍然很差。免疫和生物治疗在肿瘤治疗中越来越引起人们的关注。抗独特型抗体作为肿瘤疫苗家族的...
- 石菁菁昌晓红冯捷郭慧方程洪艳成夜霞叶雪付天云
- 关键词:卵巢癌抗独特型抗体真核表达
- 文献传递
- 具有不同转移潜力的卵巢癌细胞系基因表达谱比较
- 目的:通过对具有不同转移潜力的上皮性卵巢癌细胞系基因表达谱比较研究,寻找在卵巢癌的侵袭转移过程中的关键基因和基因群,为最终揭开卵巢癌侵袭转移过程的分子机制奠定基础。
- 白符冯捷石菁菁成夜霞杨蓉
- 文献传递
- 卵巢癌6B11抗独特型微抗体在CHO细胞中的真核表达
- 目的:构建抗卵巢癌独特型微抗体6B11的真核表达载体,使之在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中呈分泌型表达,并对表达的蛋白进行体外生物学活性检测,在此基础上进行无血清培养训化,为卵巢癌抗独特型微抗体疫苗的临床应用提供真核表达的...
- 石菁菁昌晓红冯捷成夜霞郭慧方叶雪程洪艳付天云崔恒
- 文献传递
- 具有不同转移潜力的卵巢癌细胞系基因表达谱的比较研究被引量:4
- 2005年
- 目的:比较具有不同转移潜力的上皮性卵巢癌细胞系基因表达谱,探讨卵巢癌侵袭转移过程中的关键基因和基因群,为最终揭示卵巢癌侵袭转移过程的分子机制奠定基础。方法:采用人工基底膜侵袭实验比较SKOV3·ip1细胞与其母系SKOV3细胞的侵袭转移能力;用17000点人类基因组cDNA芯片杂交检测两细胞系基因表达谱的差异;用RT-PCR方法验证基因芯片结果。结果:与其母系SKOV3相比,SKOV3·ip1细胞侵袭转移能力更强;基因芯片检测到1557个2倍差异表达基因,其中包括nm23-H2,c-erbB-2等重要的侵袭转移基因及一些差异显著的未知基因和EST片段;nm23-H2基因RT-PCR结果验证了基因芯片实验结果。结论:上皮性卵巢癌细胞系SKOV3.ip1具有更强的侵袭转移能力;卵巢癌的侵袭转移是一个涉及nm23,c-erbB-2等重要基因和其他未知新基因等多个基因共同参与的复杂过程;基因芯片是高通量基因筛选的有利手段。
- 白符冯捷石菁菁成夜霞杨蓉崔恒
- 关键词:卵巢肿瘤肿瘤转移基因芯片聚合酶链反应
- 宫颈癌免疫治疗及预防研究进展被引量:5
- 2003年
- 石菁菁李小平崔恒
- 关键词:宫颈癌免疫治疗