胡长征 作品数:6 被引量:32 H指数:2 供职机构: 中国科学院植物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家攀登计划 更多>> 相关领域: 生物学 更多>>
棕色固氮菌缺失nifZ基因的突变种固氮酶MoFe蛋白的纯化和性质 被引量:3 1996年 采用 52℃下加热 6 min,后经 DEAE- 52、Sephacryls S- 2 0 0和 Q- Sepharose等柱层析方法 ,分离纯化了棕色固氮菌 (Azotobacter vinelandii)缺失 nif Z基因突变种固氮酶 Mo Fe(Δnif Z Mo Fe)蛋白 ,其纯度达到电泳纯。Δnif Z Mo Fe蛋白的固氮活性为 2 83nmol C2 H2 还原 / (min·mg蛋白 ) ,远低于野生种 Mo Fe蛋白。Δnif Z Mo Fe蛋白对氧更敏感 ;热稳定性略低于野生种。Δnif Z Mo Fe蛋白的可见光吸收光谱与野生种 Mo Fe蛋白极为相似。其圆二色谱和磁圆二色谱在 450~ 550 nm与野生种 Mo Fe蛋白显著不同 ,表明其 P- cluster及其周围环境与野生种 Mo Fe蛋白有所差异。这亦可能是造成缺失 nif Z突变种 Mo Fe蛋白固氮活性低的原因。 钟泽璞 胡长征 王继伟 黄巨富 骆爱玲 李佳格关键词:棕色固氮菌 固氮酶 钼铁蛋白铁钼辅因子的有机组分对其功能的影响 被引量:1 1993年 棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶的钼铁蛋白经邻菲啰啉在厌氧或有氧环境中处理后,变为 P-cluster 单一缺失或 P-cluster 和 FeMoco 同时缺失的失活钼铁蛋白。含柠檬酸盐或高柠檬酸盐的重组液都使这两种失活蛋白能恢复固氮酶重组的 H^+和 C_2H_2还原活性,活性恢复程度随反映钼铁蛋白中金属原子簇含量变化的圆二色和磁圆二色谱及金属含量的恢复程度的提高而提高,但它们固 N_2能力的恢复程度则不相同:P-cluster 单一缺失的蛋白用两种重组液重组后均可恢复其固 N_2能力,而 P-cluster 和 FeMoco 同时缺失的蛋白,只有用含高柠檬酸盐的重组液重组才恢复其固 N_2能力,表明含不同有机组分的重组液所组装的 P-cluster 均与天然状态相同,只有含高柠檬酸盐的重组液所组装的 FeMoco 才与天然状态相同,从而证明高柠檬酸盐是 FeMoco 的必需的有机组分。 黄巨富 骆爱玲 胡长征 王继伟 李佳格 林永齐 董庆初 程玉华关键词:钼铁蛋白 固氮菌 螺旋藻的培养及初步应用 顾天青 张惠苗 吕京文 钟泽璞 胡长征 张金星 高义 螺旋藻是一种丝状蓝藻,生长于非洲乍得等地。该项课题对它的生理生化特性及其作为太阳能生物转换器,获得高蛋白生物量(做饲料)或做为光合制氢物(做燃料)等进行了研究,并取得了在室内外养殖螺旋藻的方法和经验。研究结果表明,该藻蛋...关键词:关键词:对虾科 青绿饲料 养殖 螺旋藻属 棕色固氮菌钼铁蛋白的金属原子簇与其构象的关系 被引量:1 1994年 棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶钼铁蛋白的紫外CD谱在205—235 nm 出现由峰位分别为208 和222 nm 的双负峰组成的负槽;经邻菲口罗啉在厌氧或有氧环境中处理后,在222 nm 的负峰随该蛋白中P-cluster 和FeMoco 含量的降低而减少。在分别由Na2MoO4、Na2S、二硫苏糖醇和高柠檬酸铁或柠檬酸铁组成的重组液重组后,上述两种处理蛋白在222 nm 的负峰又随其P-cluster和FeMoco含量的恢复而恢复。表明。 黄巨富 骆爱玲 胡长征 钟泽璞 汪志平 林永齐 董庆初 程玉华 李佳格关键词:棕色固氮菌 钼铁蛋白 金属原子簇 氧对固氮螺菌(Azospirillum brasilense)Yu62固氮酶活性的调节作用 1991年 本文研究了在好气条件下,在以谷氨酸为氮源的液体培养基中,固氮螺菌(Azospirillumbrasilense)Yu62固氮酶形成的条件及溶氧压对固氮酶活性的影响。厌氧使整体细胞固氮酶迅速失活;而见氧后固氮酶又重新恢复活性。Western blotting 实验证实,这种可逆失活的分子基础,是由于固氮酶铁蛋白-亚基被修饰和去修饰。呼吸抑制剂 KCN 对固氮酶活性的抑制,亦是由于固氮酶铁蛋白被修饰。因此推论细胞内的能量状态可能是启动固氮酶活化酶系统的重要信号。谷氨酰胺合成酶的抑制剂 MSX 不能去除厌氧和 KCN 引起的抑制作用。结果表明:固氮酶活性的 NH^+_-和厌氧关闭可能通过不同的机制起作用。 王继文 李永兴 胡长征 李久蒂关键词:固氮螺菌 固氮酶 活性 介绍一种新的半干式免疫转渍法 被引量:27 1991年 蛋白质免疫转渍法(Western blotting)是近十年发展起来的一种生化新技术。其原理是用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离待分析的蛋白质样品,然后用转渍装置把蛋白质转移到硝酸纤维素膜(NC膜)上。再利用免疫检测法检出要分析的蛋白质区带。过去报道的大多是利用液相夹心式电转渍仪完成转渍的。 李永兴 胡长征 王继文 李久蒂关键词:抗体 显色剂