袁克湖
- 作品数：11 被引量：6H指数：1
- 供职机构：北京大学深圳研究生院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 增强型青色荧光蛋白慢病毒表达载体的构建
- 2008年
- 目的:通过多点突变构建增强型青色荧光蛋白(ECFP)慢病毒表达载体。方法与结果:根据增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和ECFP基因序列的差异设计3对引物,以pLentiLox3.7-EGFP为模板进行分段PCR扩增,再以分段PCR扩增产物为模板扩增出突变的ECFP基因片段,将其与载体连接,得到ECFP慢病毒表达载体pLentiLox3.7-ECFP,测序结果证实经过多点突变扩增的ECFP片段基因序列完全正确;磷酸钙介导pLentiLox3.7-ECFP在293T细胞中表达,48h后在荧光显微镜下观察到青色荧光蛋白。结论:通过多点突变的方法得到了ECFP慢病毒表达载体。
- 曹鸿国卢智刚罗敏袁克湖邓宏魁
- 关键词：慢病毒载体绿色荧光蛋白点突变
- 应用假病毒和假型病毒制备抗猪瘟病毒E2蛋白中和性单克隆抗体的初步研究被引量：4
- 2010年
- 为制备抗猪瘟病毒(CSFV)单克隆抗体(MAb),本实验以表达CSFV E2囊膜糖蛋白的水泡口炎假病毒免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合;利用间接ELISA方法和携带荧光素酶(Luciferase)报告基因的HIV-luc/CSFV-E1&E2假病毒系统筛选分泌中和性E2MAb的杂交瘤细胞;测定MAb亚型并纯化后,间接ELISA方法测定MAb的效价;采用western blot鉴定MAb的特异性亲和力;利用HIV-luc/CSFV-E1&E2假病毒进行体外中和试验,分析MAb抑制病毒感染的能力。结果表明本实验获得了1株分泌中和性MAb的杂交瘤细胞9C8,该MAb能与E2蛋白特异性结合,而且体外抑制试验中和效价大于1∶25600。
- 陈景艳尹晓磊王宜袁丽王超邓宏魁钱永华袁克湖
- 关键词：猪瘟病毒中和性单克隆抗体假病毒
- 禽流感病毒H5N1假病毒及其制备方法与专用DNA片段
- 本发明公开了一种假病毒及其制备方法与专用DNA片段。本发明提供的DNA片段的核苷酸序列如序列表序列2所示。本发明提供的假病毒是如下方法1)或方法2)：1)权利要求1所述的DNA片段和逆转录慢病毒载体导入受体细胞，得到假病...
- 邓宏魁袁克湖王宜汪芳迅尹晓磊时艳
- 文献传递
- 抑制SARS冠状病毒侵染宿主细胞的多肽类药物
- 本发明涉及抑制SARS冠状病毒侵染宿主细胞的多肽类抗病毒药物，所述药物的通式为：X-SEQ-Z，其中SEQ表示SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.21所示的21个氨基酸序列。经药效学实验测试，本发明的多肽类药物可...
- 邓宏魁丁明孝袁克湖庆婷婷陈坚熊梓锴聂玉春王在易凌江鹏飞任立晨
- 文献传递
- 抑制SARS病毒侵染宿主细胞的多肽药物的研制
- 2003年
- 袁克湖庆婷婷陈坚熊梓锴丁明孝邓宏魁
- 关键词：SARS病毒侵染宿主细胞多肽药物
- 抑制SARS冠状病毒感染的中药有效成分及其生物活性测定方法
- 本发明涉及一类从植物中分离出的抑制SARS冠状病毒侵染宿主细胞的有效成分，其结构母体为如下通式I。本发明采用SARS假病毒侵染系统和真病毒侵染模型，对式I化合物进行了抗SARS冠状病毒研究，证实其对SARS冠状病毒具有抑...
- 徐筱杰邓宏魁陈丽蓉丁明孝段德良易凌李正全袁克湖骆宏鹏曲秀霞朱丽荔陈坚左国营江鹏斐庆婷婷胡建和聂玉春
- 文献传递
- 传染性法氏囊病病毒中国超强毒株Harbin-1基因组A节段全长cDNA的连接被引量：1
- 2002年
- 本研究利用单酶切位点 Sal消化传染性法氏囊病病毒中国超强毒株 Harbin-1基因组 A节段的上段和下段克隆 p GEM-T-P1 2和p GEM-T-P3 4,经过去磷酸化以后 ,再用连接酶将上下段连接起来。酶切和测序鉴定结果表明 ,我们得到了全长的 IBDV基因组 A节段编码区c DNA克隆。本研究结果为以后的工作奠定了基础。
- 黄广明姜丽琼孙安赛袁克湖
- 关键词：传染性法氏囊病病毒全长CDNA
- 抑制SARS冠状病毒侵染宿主细胞的多肽类药物
- 本发明涉及抑制SARS冠状病毒侵染宿主细胞的多肽类抗病毒药物，所述药物的通式为：X－SEQ－Z，其中SEQ表示SEQ ID NO.1～SEQ ID N0.21所示的21个氨基酸序列。经药效学实验测试，本发明的多肽类药物可...
- 邓宏魁丁明孝袁克湖庆婷婷陈坚熊梓锴聂玉春王在易凌江鹏飞任立晨
- 文献传递
- 禽流感病毒H5N1假病毒及其制备方法与专用DNA片段
- 本发明公开了一种假病毒及其制备方法与专用DNA片段。本发明提供的DNA片段的核苷酸序列如序列表序列2所示。本发明提供的假病毒是如下方法1)或方法2)：1)权利要求1所述的DNA片段和逆转录慢病毒载体导入受体细胞，得到假病...
- 邓宏魁袁克湖王宜汪芳迅尹晓磊时艳
- 抑制SARS冠状病毒感染的中药有效成分及其生物活性测定方法
- 本发明涉及一类从植物中分离出的抑制SARS冠状病毒侵染宿主细胞的有效成分，其结构母体为如通式I。本发明采用SARS假病毒侵染系统和真病毒侵染模型，对式I化合物进行了抗SARS冠状病毒研究，证实其对SARS冠状病毒具有抑制...
- 徐筱杰邓宏魁陈丽蓉丁明孝段德良易凌李正全袁克湖骆宏鹏曲秀霞朱丽荔陈坚左国营江鹏斐庆婷婷胡建和聂玉春
- 文献传递
