许正云
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：西安交通大学校科研和教改项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 绿色荧光蛋白基因转染骨髓间质干细胞被引量：6
- 2005年
- 目的建立以增强型绿色荧光蛋白基因示踪骨髓间质干细胞的方法.方法采用密度梯度离心法分离、培养兔骨髓间质干细胞,以脂质体介导法转染增强型绿色荧光蛋白基因的表达质粒,荧光显微镜观察基因表达及转染效率.结果绿色荧光蛋白在基因转染12 h后开始表达,48～72 h达高峰,并在1周内有较强的表达,以后逐渐减弱,4周左右仍有少量表达,转染效率与质粒、脂质体的浓度有关,外缘基因导入后不影响骨髓间质干细胞的生长和增殖.结论脂质体介导的绿色荧光蛋白基因转染骨髓间质干细胞后能安全、有效地表达,转染效率为20%～30%,是一种较为理想的干细胞示踪方法.
- 蒋文慧马爱群王亭忠董安平赵晓鸽许正云耿涛郑小璞
- 关键词：病理学与病理生理学基因转染绿色荧光蛋白基因骨髓间质干细胞脂质体
- 骨髓间质干细胞的分离培养与鉴定被引量：12
- 2005年
- 目的建立兔骨髓间质干细胞(MSCs)的体外分离纯化、扩增和鉴定的方法,为MSCs的进一步诱导分化和应用奠定基础。方法抽取兔胫骨骨髓,密度梯度离心,得到骨髓单个核细胞,接种后形成单层贴壁细胞,经胰蛋白酶消化后传代培养扩增,倒置显微镜下观察原代和传代细胞的生长特性。通过免疫荧光组织化学、流式细胞分析和透射电镜鉴定细胞。结果分离培养的骨髓MSCs贴壁、呈梭形,原代细胞呈集落生长,7～10d达到融合,传代后增殖速度加快;骨髓MSCs表达CD90,反复传代后表达效率增高,不表达CD34;透射电镜可见细胞表面有大量的绒毛突起,胞浆中有丰富的粗面内质网和线粒体,核大,形态不规则。结论密度梯度离心结合贴壁法,以及消化传代能有效分离纯化和扩增骨髓MSCs,分离培养的细胞具有骨髓MSCs的基本表型和特性。
- 蒋文慧马爱群董安平冯敏郑小璞王亭忠耿涛许正云
- 关键词：骨髓间充质干细胞
