谢庆阁
- 作品数：263 被引量：993H指数：16
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 猪水泡病病毒HK′1/70株基因组全长cDNA的构建及其序列测定被引量：1
- 2007年
- 从实验感染猪水泡病病毒(SVDV)的乳鼠组织中提取RNA,利用长距离的RACE技术,扩增出覆盖SVDVHK′1/70株全基因组的2个忠实性的cDNA重叠片段(3′PCR片段和5′PCR片段),分别克隆进pGEM-T Easy载体。利用AatⅡ和BssHⅡ酶切含5′PCR片段的重组质粒,回收目的片段,定向克隆于含3′PCR片段的重组质粒,构建出了SVDV HK′1/70株全长cDNA重组质粒,然后进行序列测定。结果表明,HK′1/70株基因组全基因组序列长7 401 nt(poly A除外),其中5′NCR长743 nt,该毒株蛋白编码区的核苷酸序列为6 558 nt,编码一个长2 185个氨基酸的聚合蛋白,3′NCR长102 nt,其后是至少含有74个A碱基的poly A尾。在HK′1/70株全长cDNA序列的5′端引入了T7启动子序列,在poly A3′端引入了Psp1406Ⅰ识别序列。通过序列同源性和进化树分析,结果表明,HK′1/70属于第Ⅱ抗原遗传群,SVDV与CB5的遗传关系最近,且位于CB5遗传进化树的分支上。HK′1/70株全长cDNA的序列测定及构建,为拯救SVDV和在分子水平进一步深入研究SVDV打下坚实的基础。
- 郑海学刘湘涛尚佑军张淼涛冯霞白兴文吴锦艳吕建亮孙世琪尹双辉郭建宏谢庆阁
- 关键词：猪水泡病病毒RACE全长CDNA克隆分子克隆
- 一种鉴别猪瘟C-株和其他毒株的分子生物学方法被引量：7
- 2004年
- 根据已发表的猪瘟病毒(CSFV)核苷酸序列,筛选出C-株与其他毒株的核苷酸序列差异标记CTTTTTTCTTTT,并设计包含此标记序列的CSFV特异性PCR引物对及nested-PCR引物对。从待检猪脾脏或淋巴组织中提取总RNA,用AMV逆转录酶进行逆转录后,进行PCR和nested-PCR。将扩增片段纯化回收并克隆到pMD18-T载体进行测序。对测序结果进行分析,含有此标记序列的即为C-株,不含此标记序列的则为其他毒株。
- 胡建和陈永耀魏刚才王三虎张彦明谢庆阁
- 关键词：猪瘟毒株分子生物学方法
- 鸡传染性法氏囊病毒生物学与分子结构
- 1992年
- 鸡传染性法氏囊病(IBD)又称甘博罗病,首先由Cosgrove(1962)在美国特拉华州的甘博罗地区发现,并对此病做了详细的描述。据报道这种疾病几乎遍及世界上所有的国家。IBD是雏鸡的一种高度接触性传染病。
- 张显升谢庆阁但秉成
- 关键词：IBD生物学分子结构
- 原位PCR技术及其应用被引量：6
- 2003年
- 邵军军常惠芸谢庆阁
- 关键词：原位PCR技术原位杂交ISH核酸分子探针
- 口蹄疫病毒3A基因在大肠杆菌中的高效表达被引量：13
- 2002年
- 将口蹄疫病毒 (Foot and MouthDiseaseVirus,FMDV)的 3A基因克隆到线形化的原核表达载体pProEX HTb中 ,转化大肠杆菌BL2 1和DH5α ,经氨苄抗性筛选得到阳性克隆 ,IPTG诱导表达。SDS PAGE和Westbolt结果证实大肠杆菌菌体不可溶性蛋白中富含 3A蛋白 ,说明3A蛋白在表达产物中以包涵体的形式存在 ,所表达的蛋白含量占菌体蛋白的 2 9 2 %。
- 薛青红刘湘涛张彦明韩雪清谢庆阁
- 关键词：口蹄疫病毒大肠杆菌
- 一种生产猪瘟疫苗用抗原蛋白的方法
- 本发明提供一种生产猪瘟疫苗用抗原蛋白的方法，具体步骤包括：从猪瘟毒株提取病毒RNA，经反转录获得猪瘟病毒免疫基因E2；以E2基因为模板，进行聚合酶链反应，同时，根据毕赤酵母对密码子的偏爱性对E2基因进行密码子优化，然后通...
- 刘湘涛韩雪清谢庆阁尚佑军
- 文献传递
- 猪口蹄疫病毒系统发生树及其应用
- 谢庆阁赵启祖刘在新常惠芸刘卫
- 该项目属于生命科学中的动物病毒学领域。其研究结果不但可丰富病毒学理论，还可指导兽医防疫政策制定和技术性研究开发。 口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的全球性偶蹄动物烈性传染病，是目前国际上最具经济意义的动物群...
- 关键词：
- 关键词：猪口蹄疫病毒免疫基因核苷酸序列分子系统树
- 口蹄疫病毒多基因重组质粒在BHK-21细胞中的表达被引量：3
- 2003年
- 利用定点突变的原理 ,获得包含有口蹄疫病毒P1,2A ,3C及部分 2B编码区的目的基因片段 ,KpnⅠ和XbaⅠ双酶切后 ,定向克隆于真核表达质粒载体pcDNA3 1(+) ,经筛选、鉴定及DNA序列分析后 ,将重组质粒pcDNA3.1 P12X3C转染BHK 2 1细胞 ,通过双抗体夹心ELISA方法和间接免疫荧光标记方法 ,检测细胞中表达的口蹄疫病毒抗原。结果表明 ,口蹄疫病毒基因片段正确克隆到真核表达质粒载体上 ,重组质粒pcDNA3.1 P12X3C可在BHK 2
- 郭慧琛刘在新孙世琪卢增军周广清祁淑云靳野刘湘涛谢庆阁
- 关键词：口蹄疫病毒真核表达质粒细胞
- 口蹄疫病毒感染细胞的研究进展被引量：11
- 2005年
- 口蹄疫是引起偶蹄动物的急性发热性水泡性疾病,具有高度接触传染性,对发病国家和地区经济有破坏性作用和不良的政治影响。口蹄疫病原体为小RNA病毒科的口蹄疫病毒,是一类单股正链RNA病毒,该病毒有多种血清型及其亚型,相互之间无交叉保护力或保护力极其有限。目前,口蹄疫病毒感染的分子机理还不是很清楚。口蹄疫病毒感染细胞的过程主要包括病毒与细胞的吸附、病毒穿透细胞壁进入细胞、病毒粒子的脱衣壳、病毒RNA的翻译转录、病毒基因组的复制以及病毒粒子的成熟过程,最后是成熟的病毒粒子衣壳包装成为完整病毒。文章就口蹄疫病毒感染细胞的过程做一概述。
- 沈小燕常惠芸丛国正刘永生王建华谢庆阁
- 关键词：口蹄疫病毒基因复制口蹄疫
- 口蹄疫多基因杆状病毒转移载体的构建
- 2004年
- 采用分步 PCR扩增连接的方法将口蹄疫病毒结构蛋白基因 P1 ,非结构蛋白基因 2 A、2 B、3 C蛋白酶和 3 D聚合酶按正确的读码框依次连接克隆入 p GEM-T载体。然后 ,将切取的目的基因亚克隆入杆状病毒转移载体 p Mel Bac B。构建成功的重组 p Mel Bac B/P1 2 X3 C3 D转移载体经测序鉴定 ,含有完整的目的基因表达盒 ,转移载体可与杆状病毒骨架载体进行昆虫 sf9细胞内同源重组 。
- 云涛冷青文郭慧琛刘在新张居农谢庆阁
- 关键词：口蹄疫基因工程疫苗
