赵鹏
- 作品数：6 被引量：57H指数：3
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RBMS3通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胃癌细胞侵袭及其上皮-间质转化被引量：10
- 2017年
- 目的:研究RNA结合基序单链相互作用蛋白3(RNA-binding motif,single-stranded-interacting protein 3,RBMS3)对胃癌细胞侵袭的影响,并探讨其可能的分子作用机制。方法:首先采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人正常胃黏膜上皮细胞GES-1以及胃癌细胞MKN-28、MKN-45、NCI-N87和SGC-7901中RBMS3的表达水平。然后采用脂质体转染法将RBMS3过表达载体[RBMS3-pcDNA3.1(+)]转染至胃癌MKN-45和SGC-7901细胞中,同时设置空白对照组和空载体转染的阴性对照组。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证RBMS3过表达效果后,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的变化,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞中上皮-间质转化相关蛋白以及Wnt信号通路中β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平变化。最后,用Wnt通路激动剂氯化锂(lithium chloride,LiCl)处理RBMS3过表达的胃癌MKN-45和SGC-7901细胞后,再次采用Transwell小室法检测细胞侵袭能力的变化。结果:与正常胃黏膜细胞相比,4种胃癌细胞中RBMS3 mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(P值均<0.05)。RBMS3过表达质粒转染后,胃癌MKN-45和SGC-7901细胞中RBMS 3基因过表达,2种细胞的侵袭能力随之明显降低(P值均<0.05)。在RBMS3过表达的胃癌MKN-45和SGC-7901细胞中,N-钙黏蛋白(N-cadherin)和β-catenin表达水平均明显降低(P值均<0.05),而E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平明显升高(P值均<0.05)。用LiCl处理RBMS3过表达的MKN-45和SGC-7901细胞后,RBMS3对2种细胞侵袭的抑制作用均被部分抵消(P值均<0.05)。结论:RBMS3可能通过阻滞Wnt/β-catenin信号通路,抑制人胃癌细胞的侵袭和上皮-间质转化。
- 赵鹏刘冬张卉宋扬
- 关键词：基因表达调控肿瘤侵润上皮-间质转化WNT信号通路
- 抑制DEK基因表达对结肠癌HCT116细胞增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:通过siRNA技术,阻断结肠癌细胞系HCT116中DEK基因的表达,并研究DEK基因沉默后对HCT116细胞增殖能力影响。方法:用真核转录载体pLKO.1-TRC cloning vector构建针对DEK基因的重组siRNA真核转录载体pLKO.1-siDEK A,pLKO.1-siDEK B和pLKO.1-siDEK C,脂质体法转染结肠癌细胞系HCT116,Western blot检测DEK的表达变化;选择沉默效率最高的载体,采用噻唑蓝(MTT)比色法、克隆形成实验检测转染HCT116细胞在增殖、克隆形成等方面的改变,流式细胞术检测其细胞周期的改变。结果:重组载体pLKO.1-siDEK A有效地阻断了HCT116细胞中DEK基因的表达。pLKO.1-siDEK A转染HCT116细胞后,与对照组相比细胞生长、增殖速度明显减慢(P<0.05),克隆形成率明显下降;流式细胞术表明DEKsiRNA可导致HCT116细胞G0/G1期阻滞,S期细胞减少。结论:成功构建了可有效沉默DEK基因的siRNA干涉载体,证明沉默DEK基因对人结肠癌HCT116细胞增殖有负性调节作用。本研究为进一步阐明DEK基因在结直肠癌中的作用奠定了基础。
- 杨静宋扬赵鹏王宏闵婕张贺龙苏海川冯英明
- 关键词：DEK结直肠癌增殖SIRNA
- 医学生人文素养教育面临的困境及对策被引量：41
- 2015年
- 医学人文素养教育对于缓解日益加剧的医患矛盾、提升医务人员职业素养有着重要的意义。许多医学院校在传统教育管理体制、课程结构设置不合理、教学方式单一化、教师知识结构局限等因素的影响下,医学生人文素养教育面临较大的障碍。需通过加强传统文化教育、增加医学人文课程学时、完善师资队伍3个方面来加强对医学生人文素养的培育。
- 宋扬赵鹏邓林聂娜
- 关键词：医学生人文素养
- Ghrelin在小细胞肺癌组织及H446细胞中的表达及其沉默对癌细胞凋亡的影响被引量：4
- 2017年
- 目的:探讨小细胞肺癌(SCLC)组织和H446细胞中生长激素释放肽(Ghrelin)的表达及Ghrelin沉默对细胞凋亡的影响及作用机制。方法:Ghrelin水平在SCLC和癌旁正常组织中以免疫组织化学法检测,在H446细胞中以RT-PCR和Western blot法检测,在细胞培养上清液中以ELISA法检测。Ghrelin以siRNA干扰法沉默,沉默效果以RT-PCR法验证;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测active-caspase-3及Bcl-2水平;RT-PCR检测miR-21水平;MTT法测定细胞活力;脂质体转染法实现miR-21过表达。结果:Ghrelin在SCLC组织中表达明显高于癌旁正常组织,在H446细胞及其培养上清中表达显著高于BEAS-2B细胞。Ghrelin沉默后,H446细胞凋亡率显著高于其他组,伴随active-caspase-3水平增高及Bcl-2水平下降,同时细胞活力下降,且miR-21水平显著低于其它组;H446细胞经GHS-R拮抗剂或抗体处理后,miR-21水平在Ghrelin基因/GHS-R共抑制细胞中达到最低,表明Ghrelin是通过识别GHS-R受体来调控miR-21水平的;此外,miR-21过表达能够逆转Ghrelin沉默诱导的细胞凋亡率增加及凋亡相关蛋白表达的变化。结论:Ghrelin在SCLC中表达显著升高,且Ghrelin沉默能够通过抑制miR-21表达促进SCLC细胞凋亡。
- 赵鹏张卉苏海川
- 关键词：GHRELINH446细胞细胞凋亡MICRORNA-21
- DEK的表达与结直肠癌患者预后的相关性研究被引量：2
- 2014年
- 目的:采用免疫组化技术,分析DEK基因在结直肠癌患者中的表达情况及其与预后的相关性。方法:运用免疫组化SP法,检测DEK基因在169例结直肠癌患者肿瘤组织及癌旁组织中的表达情况,并运用统计分析软件分析DEK表达水平与结直肠癌患者预后的相关性。结果:DEK的表达率在结直肠癌组织(85/169,50.30%)明显高于癌旁正常组织(28/169,16.57%),差异具有统计学意义(P<0.01)。DEK在肿瘤组织中的表达情况与病人年龄、性别、肿瘤分化程度、TNM分期及肿瘤大小等因素无相关性,与总生存率(OS)显著相关(P<0.05)。结论:DEK表达水平与结直肠癌预后密切相关,DEK高表达的结直肠癌患者预后较差。
- 张坤杨静宋扬赵鹏苏海川冯英明
- 关键词：DEK结直肠癌免疫组化
- Kif2a沉默对人上皮卵巢癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响
- 2017年
- 目的:探讨Kif2a在人上皮卵巢癌细胞中的表达及其沉默对癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。方法:选取人上皮卵巢癌细胞株(OVCAR-3,SKOV-3)及人正常卵巢上皮细胞株(IOSE-80)进行常规培养;采用荧光定量PCR(q-PCR)和Western blot法检测各细胞中Kif2a基因及蛋白的表达量;以siRNA干扰法对癌细胞中的Kif2a基因进行沉默,沉默效果以q-PCR及Western blot法验证;MTT法检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞侵袭能力;细胞凋亡率以流式细胞术进行检测;凋亡相关蛋白active-caspase 3及Bcl-2表达以Western blot法检测。结果:Kif2a在人上皮卵巢癌细胞中的表达均显著高于人正常卵巢上皮细胞。Kif2a基因沉默后,OVCAR-3和SKOV-3细胞增殖及侵袭能力均显著下降;细胞凋亡率显著增加,并伴随促凋亡蛋白activecaspase 3表达显著上升及抑凋亡蛋白Bcl-2表达显著下降。结论:Kif2a在人上皮卵巢癌细胞中表达显著上升,其沉默能够抑制上皮卵巢癌细胞的增殖和侵袭,并诱导细胞凋亡。
- 赵鹏刘冬张卉宋扬
- 关键词：增殖凋亡
