车小燕
- 作品数：147 被引量：400H指数：10
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术农业科学更多>>
- 基因重组人睫状神经营养因子单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 1999年
- 目的 制备基因重组人睫状神经营养因子 (rhCNTF)单克隆抗体。方法利用rhCNTF免疫BALB/C小鼠 ,取其脾细胞与小鼠NS -1骨髓瘤细胞融合 ,制备 3株抗rhCNTF的单克隆抗体 ,分别命名为CA2 、CA6 和BB11。结果 3株抗体类型均为IgG2a,免疫印迹试验证明为特异性抗CNTF的单克隆抗体 ;抗体相加试验表明 3株单抗是针对CNTF两个不同的抗原决定簇。
- 张亚莉苏瑾车小燕林来兴妹周俊岭赵青王小宁
- 关键词：基因重组人睫状神经营养因子单克隆抗体
- SASR-CoV核衣壳蛋白在杆状病毒-昆虫系统的克隆表达及抗原性分析被引量：1
- 2014年
- 目的:SARS冠状病毒(SARS-CoV)核衣壳蛋白(N蛋白)在杆状病毒-昆虫系统的表达,研究其抗原性。方法:利用PCR方法扩增SARS-NP全长基因,使用BamHⅠ和SalⅠ限制性内切酶定向插入Bac-to-Bac系统的pFastBac HTC载体,构建重组质粒转化DH10Bac细胞,获得重组杆粒DNA后转染Sf9细胞,在High Five细胞中表达SARS-NP;表达产物经NiNTA亲和层析纯化及免疫印迹和ELISA方法验证抗原性。结果:成功构建pFastBac HTC-SARS-NP重组质粒,并在High Five细胞高效表达,获得相对分子量约48 kD的重组蛋白质。经验证,重组蛋白能被SARS-CoV NP的特异性单抗(8E1A17)和兔免疫血清识别,能与SARS患者血清反应,与健康人血清、人冠状病毒229E型和OC43型的杂交瘤培养上清、相对应的兔免疫血清、患者血清均无交叉反应,具良好抗原反应性。结论:SARS-NP成功表达于杆状病毒-昆虫系统,具较强抗原反应性,初步认为其与229E型和OC43型感染血清无交叉反应性。
- 黄莉余志武潘玉先丘立文郝卫丁细霞车小燕余楠
- 关键词：核衣壳蛋白杆状病毒抗原反应性
- 氯霉素乙酰基转移酶融合蛋白表达、纯化和鉴定被引量：1
- 2004年
- 目的对氯霉素乙酰基转移酶(Chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因进行表达和纯化。方法通过PCR扩增编码CAT氨基酸序列的基因片断,并将之克隆入pGEX-2T载体。IPTG诱导蛋白融合表达,产物经琼脂糖亲和层析树脂纯化。免疫印迹鉴定纯化蛋白的抗原性。结果筛选得到的重组子诱导后表达相对分子质量约为52 600的CAT融合蛋白。树脂纯化及酶切后均得到高纯度的蛋白样品。纯化蛋白能与抗CAT抗体特异结合。结论本研究获得了CAT基因的融合表达蛋白,并对其完成纯化,为制备抗血清和抗体打下基础。
- 潘玉先廖志勇郝卫车小燕
- 关键词：融合蛋白纯化
- 呼吸道合胞病毒感染患儿T细胞表面标记的检测及临床意义被引量：1
- 1994年
- 采用硷性磷酸酶－抗硷性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）技术检测３６例呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染患儿外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）表面标记发现：１．急性期ＣＤ３、ＣＤ４和ＣＤ８细胞百分率显著降低；＜１岁而有喘鸣症状的患儿ＣＤ８细胞减少更明显，ＣＤ４／ＣＤ８比值升高，恢复期ＣＤ３和ＣＤ８细胞仍低于正常。２．急性期ＨＮＫ－１细胞变化与年龄有正相关性，１－４岁组ＨＮＫ－１细胞明显高于＜１岁组，恢复期ＨＮＫ－１细胞显著减少。３．ＴａＣ和ＩＦＮ－ｒ表达细胞在急性期增高，两者呈显著正相关关系，恢复期ＴａＣ表达细胞下降，而ＩＦＮ－ｒ表达细胞升高更明显。Ｔ细胞表型变化提示细胞介导的免疫应答在ＲＳＶ感染发病中起了重要的作用。
- 车小燕王瑞华刘严庄李新发张国成
- 关键词：呼吸道合胞病毒T细胞
- 新法制备含VEGF启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒被引量：5
- 2004年
- 目的 应用简化的细菌内同源重组法高效制备含血管内皮细胞生长因子(VEGF)启动子驱动的CD／TK融合基因重组腺病毒。方法 先以氯化钙法替代电穿孔法将腺病毒基因组质粒pAdEasy-1导入BJ5183细菌，制备BJ5183pAdEasy-1细菌；再以后者作感受态细菌，与线性化的转移质粒pAdtrack-VEGFP-CDglyTK进行同源重组，获得重组腺病毒质粒pAdEasy-VEGFP-CDglyTK，转染293细胞，制备含VEGF启动子驱动的CD／TK融合基因重组腺病毒。结果 构建重组腺病毒质粒的成功率为60％(6／10)。转染293细胞后7～12d可收获病毒。结论 简化的细菌内同源重组法简便易行，重组效率较高，易于推广应用。
- 黄元媛黄宗海陈建发汤福祥杨文宇郑全车小燕
- 关键词：VEGF启动子重组腺病毒血管内皮细胞生长因子基因治疗
- 应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定腹泻病人气单胞菌属及药敏分析被引量：2
- 2014年
- 目的了解本院冬春季腹泻中气单胞菌属的感染情况及其药敏谱。方法首先肠道病原菌选择平板分离培养;其次基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪初步鉴定腹泻患者病原菌,再次用全自动微生物分析仪结合葡萄糖产气反应对单胞菌属进行种鉴定,最后采用GN-AST13药敏卡及纸片扩散法对常用抗生素进行药敏试验。结果从253份腹泻病人粪便中,分离8株气单胞菌属,检出率3.16%,在腹泻病原谱排列第三,21种抗生素药敏试验中有12种敏感,6种存在不同程度的耐药情况,3种完全耐药,临床症状较轻,主要为腹泻和低热。结论气单胞菌属是本院冬春季重要腹泻病原菌之一,出现多重耐药,药敏谱将为今后临床治疗提供依据。
- 王瑞莲邓间开付亮江凌晓车小燕
- 关键词：气单胞菌属腹泻
- 人冠状病毒229E、OC43与SARS-CoV血清学相关性的研究被引量：5
- 2006年
- 目的检测正常人和SARS患者血清中3种人冠状病毒(229E、OC43和SARS-CoV)特异性抗体,分析3种冠状病毒血清学相关性。方法采用免疫印迹、免疫荧光和ELISA方法检测100例健康献血员、34例SARS患者恢复期以及11例SARS患者双份血清中229E、OC43和SARS-CoV 3种冠状病毒核衣壳(N)蛋白抗体。结果用免疫荧光方法检测100例健康献血员血清中229E、OCA3和SARS-CoV IgG阳性率分别为98％、100％和1％,34例SARS患者恢复期血清中3种冠状病毒IgG的阳性率均为100％;免疫印迹检测100例健康献血员血清中229E、OC43和SARS-CoV N蛋白IgG阳性率分别97％、99％和2％,34例SARS患者恢复期血清中229E、OC43和SARS-CoV N蛋白IgG阳性率分别97%、100％和100%;11例SARS患者的急性期和恢复期双份血清中,免疫荧光检测有5例出现229E IgG滴度4倍或以上升高,10例出现OC43 IgG滴度4倍或以上升高,ELISA检测2例出现229E N蛋白IgG滴度4倍以上升高,没有一例出现OCA3 N蛋白抗体滴度升高。结论正常人群中普遍存在229E和OC43两种人冠状病毒抗体,SARS-CoV感染者存在对人冠状病毒229E和OC43血清学交叉反应,提示核衣壳蛋白不是引起血清学交叉反应的主要抗原,结果对研究SARS溯源有重要意义。
- 王压娣丘立文廖志勇梅亚波车小燕
- 关键词：冠状病毒SARS-COV血清学
- SARS-CoV核衣壳蛋白用于SARS血清学诊断的研究被引量：4
- 2005年
- 目的 研究SARS患者血清中抗SARS冠状病毒 (SARS CoV)核衣壳 (N)蛋白特异性抗体的产生规律 ,评价N蛋白在SARS诊断中的作用。方法 采用间接ELISA法测定 2 5 0例临床确诊、1 88例临床疑似、6 2例临床排除SARS患者血清中针对N蛋白IgG抗体 ,并与其SARS CoVIgG总抗体水平进行比较。结果 临床确诊病例针对N蛋白和全病毒特异性抗体IgG的阳性率均随着病程的延长而增高。N IgG在发病第 1周检出阳性率为 3.4 5 %(4 1 1 6 ) ,第 2周为 6 1 .76 %(42 6 8) ,第 3周为81 .82 %(1 8 2 2 ) ,2 2～ 93d达到 1 0 0 %(44 4 4) ;SARS CoVIgG第 1周检出阳性率为 4 .31 %(5 1 1 6 ) ,第 2周为 5 5 .88%(38 6 8) ,第 3周为 77.2 7%(1 7 2 2 ) ,2 2～ 93d达到 1 0 0 %(44 4 4) ;临床疑似病例N IgG检出阳性率为 3.1 9%(6 1 88) ,SARS CoVIgG检出阳性率为 2 .6 6 %(5 1 88) ;临床排除病例N IgG和SARS CoVIgG检出阳性率均为 6 .4 5 %(4 6 2 )。两种方法检测阳性率差异无统计学意义 (χ2 =0 .1 80 ,P <0 .0 0 1 ) ;两者之间符合率为 98.2 0 %(491 5 0 0 ) ,正常人群SARS CoVN IgG阳性率为 1 .88%(1 4 74 5 )。结论 SARS CoVN重组蛋白对于SARS诊断试剂的研究具有重要价值。
- 王压娣郝卫廖志勇梅亚波尹锴车小燕
- 关键词：血清学诊断核衣壳蛋白间接ELISA法SARS患者抗体IGG病毒特异性
- 侵袭性念珠菌病实验室诊断现状的分析与思考被引量：1
- 2010年
- 侵袭性念珠菌病是第4位医院血源感染性疾病,迄今缺乏理想的诊断方法。尽管以念珠菌抗原、抗体和核酸为靶标的检测方法的研究取得了很大的进展,但由于敏感性、特异性、标准化以及实验设计等原因,难以解决临床实际问题。高度保守、含量丰富的诊断标志物可能是解决这一问题的良好出路。
- 胡冬梅车小燕
- 关键词：侵袭性念珠菌病
- 检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的抗体
- 本发明提供了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的检测抗体和捕获抗体，这两种抗体分别由保藏号为CCTCC NO.C200851的杂交瘤细胞株G2C51A2分泌得到和由保藏号为CCTCC NO.C200850的杂交瘤细...
- 车小燕袁国勇蔡建飘王压娣
- 文献传递
