邱小华
- 作品数：7 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：江西省科学技术厅社会发展攻关项目江西省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- RNA干扰DNA甲基转移酶在肺癌基因甲基化中的研究进展
- 2007年
- 目前研究发现肺癌抑癌基因（tumor suppressor genes）启动子区的5＇-胞嘧啶鸟嘌呤（5＇-CpG）异常甲基化导致了相关基因的表达失活,在肺癌的发生中起了重要作用。基因甲基化受DNA甲基转移酶、去甲基化酶、染色体重构等多种因素的影响,其中DNA甲基化就是在DNA甲基转移酶的催化下的甲基转移的酶促反应。RNA干扰是通过特异降解靶基因mRNA从而达到转录后基因沉默（post-transcriptional gene silencing,PTGS）的一种全新的基因阻断技术。RNA干扰是广泛存在于动物和植物中的一种自我防御机制,在防御外源基因入侵和自身基因异常表达中起重要作用。应用RNA干扰技术沉默DNA甲基转移酶是目前研究甲基化在肺癌发病机制中的热点,可能为肺癌提供一个新的治疗方法。
- 郭玲玲段凤英邱小华
- 关键词：RNA干扰DNA甲基化基因甲基化肺癌
- 肺癌A549细胞中RNAi抑制MeCP2表达的实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨RNA干扰下调MeCP2基因后对人肺癌A549细胞RASSF1A和C/EBPα基因表达及细胞增殖能力的影响。方法:根据MeCP2的碱基序列设计并合成短发夹RNA(shRNA),构建质粒表达载体,用阳离子脂质体法体外转染A549细胞,筛选出稳定转染的细胞株,RT-PCR法检测MeCP2抑制效果及RASSF1A和C/EBPα表达,MTT法检测转染后细胞增殖能力。结果:成功构建了靶向MeCP2的真核表达载体pSilencer-MeCP2/Ⅰ和pSilencer-MeCP2/Ⅱ,与空白组和阴性组相比,pSilencer-MeCP2/Ⅰ和pSilencer-MeCP2/Ⅱ组均可有效抑制MeCP2基因mRNA的表达,抑制率分别为47.6%和70.3%。且在上述两组中C/EBPα表达分别上调约115%和135%、细胞增殖能力明显减弱,与空白组和阴性组比较差异具有统计学意义(P<0.05),而RASSF1A的表达在各组细胞中未见明显变化(P>0.05)。结论:肺癌A549细胞中MeCP2基因的表达可被RNA干扰载体有效抑制,进而导致细胞中部分与增殖和凋亡相关基因的表达改变,细胞增殖能力减弱。
- 王汉姣吴建兵邱小华郭琳琳
- 关键词：RNA干扰肺癌MECP2细胞增殖基因表达
- RNA干扰MeCP2对肺癌细胞A549增殖的影响被引量：2
- 2009年
- 目的研究甲基化结合蛋白MeCP2对肺癌细胞A549增殖的影响。方法针对GeneBank中MeCP2基因的不同靶点,设计并合成两条DNA干扰序列,克隆到真核表达载体pSilencer-2.1-U6,构建能够转录形成MeCP2-shRNA的重组质粒pSilencer-MeCP2,经PCR、测序鉴定正确后,稳定转染A549细胞,在mRNA和蛋白水平观察两重组质粒对MeCP2的干扰作用,MTT法检测对细胞增殖能力的影响。结果成功构建两个针对MeCP2不同靶序列的shRNA真核表达质粒,两质粒在mRNA和蛋白水平可以使MeCP2表达明显下调,稳定转染两质粒的A549细胞增殖能力明显减弱。结论甲基化结合蛋白MeCP2参与了肺癌细胞的恶性增殖。
- 邱小华郭玲玲段凤英王汉娇
- 关键词：RNA干扰MECP2肺癌
- 脂多糖干预气道上皮细胞细胞因子及蛋白激酶C表达的研究
- 目的脂多糖(Lippolysaccharide LPS)能够干预气道上皮细胞分泌多种细胞因子,目前研究较多的参与脂多糖干预气道上皮细胞分泌细胞因子的信号通路主要为p38MAPK、、JNK及ERK1/2,蛋白激酶C(pro...
- 况九龙蔡颖邱小华王聪丽
- 人MeCP2基因shRNA真核表达质粒的构建及鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的构建针对人甲基化结合蛋白MeCP2的shRNA真核表达质粒,稳定转染肺腺癌细胞A-549观察其对MeCP2表达的影响。方法根据MeCP2的mRNA序列,利用Ambion网上设计软件设计两条针对该基因不同靶点的shRNA干扰序列,克隆到线性化的质粒载体上,PCR、测序鉴定插入成功,且插入方向正确。转染A-549细胞,观察其在mRNA和蛋白水平对MeCP2的影响。结果成功构建两个MeCP2的shRNA真核表达质粒,并稳定转染到肺癌细胞A-549中,两个真核表达质粒在mRNA水平和蛋白水平对MeCP2有明显的抑制作用。结论人MeCP2的shRNA真核表达质粒成功构建及鉴定为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。
- 郭玲玲段凤英邱小华
- 关键词：质粒
- 甲基化结合蛋白与抑癌基因失活
- 2008年
- 通常认为肿瘤的发生与体细胞基因突变有关,但近年的研究发现它与基因表观遗传学改变也密切相关.DNA甲基化是基因表观遗传学改变最常见的类型.甲基化的DNA通过与多种甲基化结合蛋白结合使基因转录失活,这在许多肿瘤抑癌基因失活中起重要作用.
- 郭玲玲段凤英邱小华
- 关键词：DNA甲基化遗传学
- 细胞实验室污染原因及有效预防控制措施的分析
- 目的 针对细胞实验室出现污染情况,进行污染原因分析,并探索预防污染措施。材料及方法 干预前后采集无菌培养室不同方向的空气,培养箱各个层面的气体,净化工作台面棉拭子,净化工作台四个顶角及台面中央同时采集了5个空气点,可疑细...
- 邱小华贺文凤梁茜胡龙华
- 关键词：微生物干预
