郭文峰
- 作品数:60 被引量:329H指数:11
- 供职机构:广州中医药大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市教委E研究院-上海高校网格项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 稳定同位素示踪法用于Caco-2细胞葡萄糖吸收模型的研究被引量:2
- 2013年
- 目的建立Caco-2细胞葡萄糖吸收模型,为考察药物对葡萄糖吸收的影响提供方法。方法 Caco-2细胞培养7,14,21 d后,分别加入25,50,75,100 mmol.L-1的葡萄糖溶液孵育5,10,15,20 min,采用高效液相色谱-质谱联用技术,以稳定同位素示踪法比较培养时间、葡萄糖浓度以及孵育时间对葡萄糖吸收的影响。结果 Caco-2细胞培养21 d后葡萄糖的吸收优于培养7 d和14 d的吸收,吸收量大,趋势稳定。此时用75 mmol.L-1的葡萄糖溶液孵育细胞10 min,葡萄糖吸收量与100 mmol.L-1比较差异无统计学意义,但高于25,50 mmol.L-1时的葡萄糖吸收量。结论本实验条件下建立的Caco-2细胞模型可作为研究葡萄糖吸收的模型。
- 任理郭文峰刘佳陈蔚文
- 关键词:CACO-2细胞葡萄糖稳定同位素液质联用
- 理气活血祛湿法治疗脂肪肝的配伍研究
- 该课题旨在通过古今文献研究、动物实验及初步临床观察,进行配伍研究,从方剂学角度,阐明理气、活血、祛湿法配体组方治疗脂肪肝的合理性及各不同治法配伍之间的联系.古今文献研究表明,脂肪肝病因病机多因肝郁气滞,饮食伤脾、脾虚湿停...
- 郭文峰
- 关键词:脂肪肝拆方配伍
- 文献传递
- 黄芪提取物对结肠腺癌Caco-2细胞葡萄糖吸收的影响被引量:2
- 2016年
- 目的:探讨黄芪提取物对Caco-2细胞葡萄糖吸收的影响,并探讨其作用机制。方法:采用系统溶剂法提取黄芪各部位,以Caco-2细胞为研究对象,设立空白组和黄芪各提取部位组(乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇4个部位组)。以荧光标记2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)做为光学探针检测黄芪各提取部位对Caco-2细胞葡萄糖吸收能力的影响。筛选出黄芪中促进Caco-2细胞葡萄糖吸收的药效部位后,对这一药效部位有效作用浓度进行考察。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)法测定Caco-2细胞钠依赖葡萄糖转运蛋白(SGLT1)和2型葡萄糖转运蛋白(GLUT2)蛋白表达。结果:黄芪正丁醇提取部位可以促进Caco-2细胞葡萄糖的吸收,与空白组比较,黄芪正丁醇提取部位100,150 mg·L-1组Caco-2细胞葡萄糖含量升高(P<0.05,P<0.01);且黄芪正丁醇部位可以上调Caco-2细胞GLUT2和SGLT1蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪正丁醇萃取部位可以促进Caco-2细胞葡萄糖的吸收,这一作用机制可能与SGLT1和GLUT2蛋白的调节有关。
- 张磊曾丹郑媛嘉许燕玲郭文峰
- 关键词:CACO-2细胞葡萄糖吸收
- 人参皂苷Re对Caco-2细胞葡萄糖吸收功能的影响被引量:1
- 2013年
- 目的:研究人参皂苷Re对Caco-2细胞葡萄糖吸收的影响。方法:Caco-2细胞培养21 d后加入根皮素及人参皂苷Re孵育,采用稳定性同位素示踪技术,以LC-MS/MS法测定细胞中葡萄糖的吸收量,检测GLUT2蛋白和mRNA表达变化。结果:根皮素能够显著抑制葡萄糖的吸收,50μmol/L人参皂苷Re能够改善受根皮素抑制的葡萄糖吸收量,并增加GLUT2蛋白及mRNA表达。结论:人参皂苷Re能够促进Caco-2细胞对葡萄糖的吸收,并能扭转根皮素对葡萄糖吸收的抑制作用,其作用机理的发挥可能与调控GLUT2有关。
- 刘佳郭文峰任理陈蔚文
- 关键词:人参皂苷RE葡萄糖吸收LC-MS/MS
- 鸟氨酸脱羧酶表达水平与溃疡性结肠炎病变时相的关系被引量:11
- 2007年
- 【目的】观察鸟氨酸脱羧酶(ODC)表达水平与不同时相溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠病理变化的关系。【方法】Wistar大鼠60只,随机分为正常组(12只),模型1、2、3组(各16只),以90 mg/kg三硝基苯磺酸(TNBS)结肠注射复制UC模型,分别于实验第10、20、30天处死模型1、2、3组大鼠,正常组于第30天处死;分别对各组大鼠结肠进行大体和组织病理学评分,并采用免疫组化法检测结肠ODC的表达。【结果】随着实验周期的延长,模型大鼠结肠病变从急性炎症、组织坏死向慢性炎症、溃疡修复进展,ODC在正常结肠粘膜低表达,在溃疡形成、组织坏死阶段的表达略高于正常组,在溃疡修复、细胞大量增生时ODC表达明显增强,在病灶修复处于稳定阶段时ODC表达有所回落。【结论】不同时相UC模型大鼠结肠ODC表达变化特点与结肠病理变化特点相符。
- 李茹柳迟莉郭文峰徐颂芬潘怀耿陈蔚文
- 关键词:鸟氨酸脱羧酶
- 张景岳运用熟地配伍举隅被引量:3
- 1999年
- 郭文峰李冀
- 关键词:熟地配伍人参半夏当归
- 慢性胃炎脾气虚证与脾胃湿热证的差异表达基因比较被引量:25
- 2008年
- 目的:比较慢性胃炎脾气虚证与脾胃湿热证患者差异表达基因。方法:分别提取慢性胃炎脾气虚和脾胃湿热患者胃黏膜组织RNA各4例,逆转录荧光探针标记后杂交制作BiostarH-140 s基因芯片。采用荧光值ratio、生物信息学、t检验等方法分析结果,实时荧光定量PCR检测部分相关基因。结果:获得差异表达基因245条,主要为营养物质消化吸收运输、物质能量合成代谢、细胞周期增殖分化、免疫反应等相关基因;有显著意义的差异表达基因77条;实时定量PCR检测10条基因,6条与芯片结果一致。结论:慢性胃炎脾气虚和脾胃湿热2个证型基因表达存在明显差异,提示中医的临床辨证分型与基因差异表达有一定关系。
- 王颖芳陈蔚文劳绍贤李茹柳郭文峰黄穗平王桂香王静罗琦黄烈平王建华
- 关键词:胃炎脾气虚证脾胃湿热证基因差异表达
- RPS20 miRNA质粒载体的CT26细胞转染条件优化研究被引量:3
- 2010年
- 目的探讨阳离子脂质体法转染CT26细胞适宜的转染条件,为小鼠体内以RNA干扰法进行脾虚证相关基因RPS20的功能鉴定提供参考。方法以6孔培养板培养CT26细胞,利用阳离子脂质体转染pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-neg Control plasmid进入CT26细胞,荧光显微镜、流式细胞仪两种方式观察不同剂量的质粒和转染试剂对转染效率的影响。结果荧光显微镜下细胞计数法检测转染效率,4.0μg和6.0μg质粒的转染效率无明显差异;流式细胞仪检测转染效率,以Lipofectamine2000 15.0μL+质粒4μg转染效率最高,平均为25.3%。结论 6孔培养板,4.0μg质粒+15.0 μL Lipofectamine2000为CT26细胞优化的转染条件。
- 高小玲李茹柳郭文峰徐颂芬胡灿陈蔚文
- 关键词:RNA干扰
- 人参皂苷Rg1对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响被引量:1
- 2011年
- 【目的】观察人参皂苷Rg1对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽化合物的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。【方法】Caco-2细胞长满瓶底后继续培养28 d,然后给予人参皂苷Rg1(终浓度为50 mmol/L)处理,并设立空白对照组及cAMP抑制剂(Rp-8-Br-cAMP)对照组,采用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞对二肽化合物Glycyl-Sarcosine的转运能力,采用Western blot法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平。【结果】人参皂苷Rg1处理组Caco-2细胞15、30、60、120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量均显著高于空白对照组对应时点的量(P<0.05或P<0.01),人参皂苷Rg1与Rp-8-Br-cAMP合用组15、30、60、120 min时点均显著低于相应时点单用人参皂苷Rg1组(P<0.05或P<0.01),人参皂苷Rg1处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达显著增加(P<0.05);荧光定量PCR结果显示:人参皂苷Rg1能显著下调SLC15A1表达(P<0.05)。【结论】人参皂苷Rg1具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与其促进胞浆中PepT1蛋白嵌入胞膜中发挥转运二肽的功能有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。
- 郭文峰胡灿温鹏高小玲李茹柳陈蔚文
- 关键词:基因表达调控转运功能细胞培养
- 活血化瘀法对实验性高脂血症大鼠载脂蛋白与脂蛋白(a)的影响被引量:1
- 2002年
- 目的 :研究活血化瘀法对实验性高脂血症 (HLP)大鼠血清载脂蛋白AI (ApoAI)、B (ApoB)、脂蛋白 (a) [Lp (a) ]及磷脂酰胆碱胆固醇转酰酶 (LCAT)的影响。方法 :采用高脂饮食喂饲法建立大鼠HLP模型 ,自造模第 1天起 ,灌胃给予活血化瘀方剂 ,连续给药 40天 ,应用免疫比浊法在全自动生化分析仪上测定ApoAI、ApoB、Lp (a)浓度 ,参照文献方法测定LCAT活性。结果 :活血化瘀方剂三个剂量均能显著降低高脂大鼠血清ApoB、Lp (a)水平 ( p <0 .0 5 ,p <0 .0 1 ) ,显著升高ApoAI水平及LCAT活性。结论 :提示本方通过升高ApoAI、降低ApoB进一步发挥血脂调节作用 ,通过降低Lp (a)水平降低了心脑动脉粥样硬化 (AS)性血管疾病的独立危险因素 ,并提示提高LCAT活性是本方调血脂机理之一。
- 李冀焦亚斌肖洪彬苏云明张鹏旺建伟李胜志郭文峰
- 关键词:活血化瘀法高脂血症载脂蛋白