陈新雨 作品数:7 被引量:18 H指数:2 供职机构: 第四军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 更多>>
猪akirin2基因的克隆与真核表达 被引量:4 2010年 Trizol法从猪脾脏中提取总RNA,RT-PCR方法得到猪Akirin2的完整编码区,软件分析猪Akirin2的核酸序列与蛋白序列,进行染色体定位。将Akirin2构建到带有荧光标记的真核表达载体pEGFP-C1中,通过脂质体转染法将pEGFP-Akirin2转入猪脐静脉血管内皮细胞系(SUVEC)中进行表达。结果表明,该序列编码203个氨基酸,猪akirin2基因定位于猪1号染色体,含有4个外显子,猪与牛的Akirin2蛋白高度同源。重组表达质粒pEGFP-Akirin2经双酶切鉴定和测序分析,表明构建成功,pEGFP-Akirin2转染SUVEC细胞后,经荧光检测证实转入的akirin2基因得到表达。研究结果为探讨猪Aki-rin2蛋白在免疫调控中的功能提供了基础数据。 曹金锁 柳超 蒋朋飞 赵振华 陈新雨 张德礼关键词:克隆 染色体定位 真核表达 雷公藤胚性愈伤组织再生植株的增殖及其稳定性 被引量:10 2009年 以雷公藤胚性愈伤组织为材料,研究继代培养时间对植株再生和基本培养基、生长素浓度及其与细胞分裂素组合对再生苗增殖的影响。结果表明:在继代培养过程中,愈伤组织再生率和再生苗数经历了一个由低到高再到低的过程,以8个月到1年之间的胚性愈伤组织的再生能力最强,达100%,每块愈伤组织平均形成的芽数也比较多,雷公藤胚性愈伤组织在继代20个月后已经丧失再分化能力。愈伤组织再分化过程易发生变异,从叶形上看,再生苗出现6种类型的变化。再生苗茎段增殖以1/2MS为基本培养基附加2.0mg·L-1IBA为好,以1/2MS+2.0mg·L-1IBA+0.5g.L-1活性炭的培养基有利于芽苗生根培养,生根率达100%。移栽至珍珠岩与腐殖质土(1∶1)的混合基质中成活率达96%。 李琰 冯俊涛 陈新雨 毛圆辉 张兴关键词:雷公藤 胚性愈伤组织 快繁 肝豆状核变性家系致病基因突变的检测方法优化 为了早期对Wilson病(wilson disease,WD)明确诊断和明确治疗,探讨WD的基因诊断方法,优化检测WD基因突变方法,分析其发生和位点分布,以及WD患者基因型与表型的关系.我们通过外显子引物设计和PCR扩增... 路凡 沈琦 陈新雨 吴元明酵母重复基因在蛋白质互作网络中的分歧进化 被引量:1 2010年 【目的】分析全基因组重复后,蛋白质互作网络对重复基因分歧模式的作用机制。【方法】结合高精度的蛋白质互作数据集和具有相同进化年代的重复基因数据集,在全基因组范围关联分析拷贝间进化距离与网络结构的相关性,并通过对拷贝间连接水平的差异程度分类,分析不同阶段网络结构对基因功能的影响。【结果】重复基因两拷贝间的进化距离与其祖先基因在网络中的连接水平呈显著负相关,与重复基因间的连接度差异率呈显著正相关;网络结构完全歧化的重复基因间的非同义替换均值,较未完全歧化的重复基因显著高出30.2%。【结论】网络结构对重复基因的进化起调节作用,网络系统在保持核心稳定的同时,使外围组分发生了更大变化;重复基因在网络结构改变的前期为基因组提供功能冗余,但在网络结构差别较大后,显著增加的突变更有利于基因新功能的产生。 赵振华 陈新雨 周鹏方 郭阳 刘敏 林文超 张德礼关键词:基因重复 进化距离 连接度 酵母 shWnt5a重组慢病毒的制备及其对黑素瘤细胞侵袭的抑制作用 被引量:2 2014年 目的构建下调人Wnt5a基因表达的重组质粒并制备重组慢病毒,感染黑素瘤细胞后,观察其对该细胞侵袭的影响。方法构建下调人Wnt5a基因表达的重组质粒pLKO.1-shWnt5a,利用pLKO.1慢病毒包装系统和HEK293T细胞包装、制备携带shWnt5a的重组慢病毒颗粒,并感染WM793B黑素瘤细胞,建立稳定低表达Wnt5a的WM793BWnt5a-黑素瘤细胞株。采取细胞迁移与侵袭实验检测Wnt5a对黑素瘤细胞侵袭的影响。结果成功制备了携带shWnt5a的重组慢病毒,建立低表达Wnt5a的稳定转染细胞株WM793BWnt5a-,细胞迁移与侵袭实验证明抑制Wnt5a基因的表达可以显著抑制黑素瘤的侵袭能力。结论下调Wnt5a基因的表达对黑素瘤的侵袭能力有明显的抑制作用。 赵亚军 苗叶 陈新雨 王丽亚 路凡 廖文俊关键词:黑素瘤细胞 慢病毒 RNA干涉 细胞侵袭 鸡RNA聚合酶Ⅲ型启动子7SK克隆和转录shRNA活性研究 研究目的:目前表达shRNA的启动子主要为高效的人或小鼠的RNA聚合酶Ⅲ型的U6或7SK启动子,其在禽源细胞、组织乃至个体中的作用一直受到广泛的研讨,而对同类型的禽源7SK启动子的研究甚少;而7SK作为哺乳动物细胞的高效... 陈新雨关键词:慢病毒 小发夹RNA 平均荧光强度 文献传递 猪PDCD5基因的克隆与真核表达 2011年 用RT-PCR方法从猪肝组织中扩增出猪PDCD5(programmed cell death 5)编码序列,TA克隆至pMD-19T载体中,软件分析猪PDCD5基因的核算序列和蛋白序列,进行染色体定位.构建真核表达载体,将PDCD5基因编码区序列插入绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP-C1中.通过脂质体转染法将重组载体瞬转入猪脐静脉血管内皮细胞系(SUVECs)进行瞬时表达.结果表明:该序列编码125个氨基酸,猪PDCD5基因定位于猪6号染色体,含有6个外显子,与人PDCD5基因高度同源.双酶切鉴定和测序表明:重组真核表达载体构建成功,荧光检测和Western blot检测显示PDCD5融合蛋白表达.研究结果为探讨猪PDCD5基因在细胞凋亡调控中的功能提供了基础数据. 胡健 王静娜 陈新雨 温俊歌 徐瑶 钟瑜 张德礼关键词:CELL 克隆 真核表达