陈春妹
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市青年科技启明星计划上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转座子piggyBac介导的HSV-tk基因在妇科恶性肿瘤细胞中长期稳定表达的研究被引量：3
- 2010年
- 目的 研究piggyBac（PB）转座子介导转移外源基因HSV-tk在多种妇科恶性肿瘤细胞中的表达情况,探讨其作为一种可整合的非病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用价值.方法 通过PCR技术扩增HSV-tk基因的编码区,定向克隆至PB表达载体PB[Act-RFP]DS,经酶切、测序鉴定为重组载体PB[Act-RFP,HSV-tk]DS（pPB/TK）.联合3种小同的转染试剂FuGENE HD、jetPEI及lipofectamine 2000,分别将pPB/TK转染入4种常见的妇科恶性肿瘤细胞株HeLa、JEG-3、SKOV3和HEC-1B.转染后以mRFP1为报告基因,经荧光显微镜观察和流式细胞仪分析转染效率;逆转录（RT）-PCR技术检测HSV-tk和mRFP1基因的表达;四甲基偶氮唑蓝实验测定不同浓度的更昔洛韦（GCV）对转染后细胞的杀伤作用.转染后细胞经流式细胞仪分选,极限稀释单克隆培养建立稳定转染株,并以反向PCR技术确定转座子插入基因组的位点.结果 （1）成功构建重组载体pPB/TK.（2）在3种转染试剂的辅助下,pPB/TK均可有效转染入HeLa、HEC-1B、SKOV3和JEG-3细胞;不同转染试剂辅助下pPB/TK在同种细胞中的转染效率各不相同,在HeLa细胞中,FuGENE HD的转染效率[（78.7±9.2）%]高于lipofectamine 2000[（54.1±11.4）%]和jetPEI][（46.5±7.4）%],分别比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;同一转染试剂辅助下pPB/TK在不同细胞中的转染效率也不相同,以FuGENE HD为转染试剂,pPB/TK在HeLa、JEG-3和SKOV3细胞中的转染效率分别为（78.7 ±9.2）%、（74.4±8.9）%和（83.2±9.7）%,高于HEC-1B细胞的（39.5±8.7）%,分别比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）.（3）RT-PCR结果显示,4种细胞均有HSV-tk和mRFP1基因mRNA的表达.（4）GCV对转染有pPB/TK的HeLa、JEG-3、SKOV3和HEC-1B细胞的半数抑制浓度分别为1.29、3.35、0.09和13.28 μg/ml.10μg/ml GCV对转染有pPB/TK的SKOV3细胞抑制率高于单独转染pORF-HSVtk者,细胞抑制率分别为（86±9）%和（52±12）%,两者比较,差异有�
- 康玉孙庆文余文博程明军张晓燕武欣陈春妹郑煜芳徐丛剑
- 关键词：单纯疱疹病毒属胸苷激酶发光蛋白质类
- Au改性TiO2纳米复合物对人结肠癌细胞的光催化杀伤作用被引量：7
- 2008年
- 提出了通过TiO2表面修饰纳米Au的方法来提高纳米TiO2光催化杀伤癌细胞的效率.采用化学还原法合成了Au改性的TiO2(Au/TiO2)纳米复合物,并研究了不同掺杂量(1wt%,2wt%,4wt%)的Au/TiO2对人结肠癌LoVo细胞的光催化杀伤效应.结果显示,Au的掺杂大大地提高了TiO2纳米粒子光催化杀伤结肠癌LoVo细胞的效率,而且Au掺杂量的高低影响Au/TiO2光催化杀伤癌细胞的效率,掺金量为2%的Au/TiO2对结肠癌LoVo细胞具有最高的光催化杀伤效率.在光强为1.8mW/cm2的紫外灯(λmax=365nm)下光照110min,50μg/mL掺金量为2%的Au/TiO2能够杀死所有的癌细胞,而同样浓度的TiO2只能杀死70%的癌细胞。
- 许娟陈智栋孙毅陈春妹江志裕
- 关键词：TIO2
- 组织间Duffy抗原／趋化因子受体在大鼠静脉高压炎症反应中的作用及其机制被引量：1
- 2012年
- 目的探讨组织间Duffy抗原／趋化因子受体（DARC）在下肢静脉高压炎症反应中的作用及其可能的机制。方法采用股动一静脉瘘建立大鼠后肢静脉高压模型，36只sD大鼠数字随机分为pcDNA3．1-DARC质粒组、pcDNA3．1空质粒组和对照组。术后14d和42d，采用实时定量聚合酶链反应（Real—PCR）和蛋白印迹（Westernblotting）检测组织间DARCmRNA和蛋白的表达；酶联免疫吸附测定法检测血清白细胞介素（IL）一8的含量；TUNEL法和HE染色检测组织凋亡和白细胞浸润情况。结果随着静脉高压时间的延长，组织间DARC表达量、组织凋亡及白细胞浸润程度在pcDNA3．1-DARC质粒组和pcDNA3．1空质粒组均呈增加的趋势，同期各组间比较，pcDNA3．1-DARC质粒组明显高于pcDNA3．1空质粒组和对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；血清IL-8含量在pcDNA3．1-DARC质粒组和pcDNA3．1空质粒组均表现为降低的趋势，同期各组间比较，pcDNA3．L．DARC质粒组明显低于pcDNA3．1空质粒组，但两组均高于对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论组织间DARC表达与静脉高压组织的炎症程度呈正相关，可能通过加强白细胞的黏附和迁移促进静脉高压炎症反应的发展。
- 秦委委张岚张纪蔚张柏根何以丰陈春妹余龙
- 关键词：趋化因子静脉炎症白细胞介素8
- 柱层析法纯化重组人肿瘤坏死因子α及其抑癌作用被引量：1
- 1994年
- 半合成人肿瘤坏死因子ＴＮＦ－α在大肠杆菌中高表达．发酵后收集菌体经超声破碎，然后在１２０００ｒ／ｍｉｎ４℃离心１０ｍｉｎ，上清经６０℃热处理３０ｍｉｎ，离心上清用６０％饱和度的硫酸铰沉淀，再依次经过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ—２５、ＤＥＡＥ—５２纤维素和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ—７５柱层析，得到的纯化ｒｈＴＮＦ—α比活性为２×１０７ｕ／ｍｇ，回收率为２４％．经过ＳＤＳ—ＰＡＧＥ电泳和ＨＰＬＣ鉴定，纯度达９５％左右，分子量为１７×１０３．ｒｈＴＮ—α对热稳定性试验表明，—２０℃下贮存一年或者０℃下贮存一个月，ｒｈＴＮＦ—α活性仍保留５０％．人胃癌和肝癌细胞株的体外抑瘤试验和接种小鼠的活体抑瘤试验表明，本实验取得的ｒｈＴＮＦ—α具有明显的抑瘤生长作用．
- 林丽珠陈春妹喻红吕群陈晓龙姚锡惠陈海明赵寿元
- 关键词：肿瘤坏死因子柱层析抑瘤试验
- 结合电生孔技术的抗体-纳米TiO_2靶向光敏杀癌细胞被引量：4
- 2006年
- 报道了用免疫、电生孔和纳米TiO2光催化组合技术进行杀伤结肠癌LoVo细胞的研究.先把结合LoVo细胞表面CEA抗原的单克隆抗CEA抗体吸附在纳米TiO2微粒表面,抗体-纳米TiO2复合微粒就会自动吸附到LoVo细胞的表面,然后用电脉冲法使LoVo癌细胞的细胞膜上产生小孔,促使纳米TiO2微粒进入癌细胞内部.最后在紫外光照射下使TiO2纳米粒子在癌细胞内部发生光催化氧化作用,杀伤癌细胞.结果表明,这种组合技术具有很高的杀癌细胞能力.在仅含3.12μg/mL抗体-纳米TiO2的细胞培养液内和强度为4mW/cm2的紫外光照射下,可在30min内将所有LoVo癌细胞杀死.这种技术对LoVo癌细胞的杀伤力远高于对不表达CEA抗原的人正常TE353.sk细胞的杀伤力,显示了组合技术杀癌细胞的高选择性.因此,这种组合技术有望成为治疗癌症的新方法,值得进一步探索.
- 许娟赵尧敏陈春妹孙毅刘国元严曼明江志裕
- 关键词：光催化癌症治疗
