马晓冬
- 作品数:33 被引量:165H指数:8
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广州市重大科技攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 应用PCR快速制备细小病毒B19诊断芯片探针(英文)被引量:3
- 2003年
- 目的制备细小病毒诊断芯片探针。方法利用Primer Premier 5.0针对细小病毒B19基因保守区域设计PCR引物,将PCR产物克隆pMD-18 T载体。结果序列分析显示,PCR产物均为细小病毒B19特异保守基因。结论利用PCR扩增产物制备诊断芯片探针是一种简便有效的方法。
- 吕梁马文丽王洪敏马晓冬孙朝晖郑文岭
- 关键词:PCR细小病毒B19探针
- 小鼠腹腔巨噬细胞凋亡时线粒体的改变及其调控被引量:3
- 2001年
- 目的 研究小鼠腹腔巨噬细胞凋亡过程中线粒体和磷酸烟酰胺腺嘌呤 (NADPH)氧化酶活性的变化以及信使分子对线粒体膜电位、细胞内活性氧 (reactive oxygen species,ROS)和凋亡的影响。 方法 激光扫描共聚焦显微术、流式细胞术和荧光标记技术等。 结果 1.地塞米松诱导巨噬细胞快速凋亡 ;2 .线粒体膜电位快速去极化 ,NADPH氧化酶活性剧降 ,ROS快速减少 ,ROS清除剂促进凋亡 ;3.蛋白激酶 C(protein kinase C,PKC)促进凋亡、ROS急剧减少、线粒体膜去极化 ;环腺苷酸 (c AMP)抑制凋亡、ROS急剧减少、线粒体膜去极化 ;环鸟苷酸(c GMP)、酪氨酸蛋白激酶 (TPK)略抑制凋亡 ,不影响 ROS变化 ,但影响线粒体膜去极化。 结论 1.地塞米松处理使线粒体内 NADPH氧化酶活性剧降 ,生成 ROS迅速减少从而促进巨噬细胞凋亡 ;2 .信使分子影响线粒体生成ROS的变化以及线粒体膜去极化从而影响巨噬细胞凋亡。提示线粒体变化 ,尤其是 ROS和膜电位的变化影响巨噬细胞凋亡。
- 黄行许乔东访马晓冬鲍永耀朴英杰
- 关键词:线粒体活性氧膜电位凋亡细胞小鼠
- 登革病毒cDNA的生物信息学分析及其Oligo探针设计被引量:7
- 2003年
- 目的设计登革病毒诊断芯片的Oligo探针。方法利用BLAST软件对4型登革病毒的cDNA序列进行序列比对,得到有意义的特异序列;然后用生物学软件Oligo6.0设计特异性高、Tm值相近、长度均一的Oligo探针。结果获得48条70-mer Oligo探针,用于打印成DNA芯片,进行登革病毒的检测。结论利用BLAST系统和生物学软件Oligo6.0设计登革病毒诊断芯片的探针,是一种简便可行、有效的方法。
- 肖维威马文丽马晓冬毛向明郑文岭
- 关键词:登革病毒CDNA生物信息学生物芯片
- 应用PCR快速制备乙型、丁型肝炎病毒诊断基因芯片探针被引量:12
- 2003年
- 目的应用PCR技术扩增乙型、丁型肝炎病毒保守区域基因片段,并进行克隆、测序分析,制备联合诊断乙型、丁型肝炎病毒基因芯片探针。方法利用Oligo6.4软件分别针对乙型、丁型肝炎病毒基因保守区域设计PCR引物,纯化PCR扩增产物,扩增后的产物克隆至pMD18-T载体并进行快速鉴定,提取阳性克隆质粒进行测序分析及鉴定。结果获得多个乙型、丁型肝炎特异性基因片段。序列分析表明,所扩增的片段均属于乙型、丁型肝炎病毒特异基因。结论利用PCR扩增产物制备基因芯片探针是一种快速、简便的实用方法。
- 孙朝晖郑文岭毛向明张宝吕梁马晓冬石嵘马文丽
- 关键词:丁型肝炎病毒基因芯片分子探针技术聚合酶链反应
- ROS对小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响被引量:8
- 2000年
- 目的探讨 ROS影响巨噬细胞凋亡的机制。方法激光扫描共聚焦显微术、流式细胞术和荧光标记技术等。结果 1凋亡巨噬细胞内 NADPH氧化酶活性急剧降低使得胞内 ROS水平快速下降 ;2 ROS清除剂促进地塞米松诱导的巨噬细胞凋亡 ;3PKC促进巨噬细胞凋亡和 ROS急剧减少 ;c AMP抑制巨噬细胞凋亡和 ROS急剧减少。结论 1ROS抑制地塞米松诱导的巨噬细胞凋亡 ;2 PKC、c AMP等因素通过影响地塞米松介导巨噬细胞凋亡时发生的 ROS变化促进或抑制巨噬细胞凋亡。由此可见 ,ROS作为一种巨噬细胞的信使分子和效应分子 ,一方面抑制巨噬细胞自身凋亡 。
- 黄行许陈练波马晓冬乔东访鲍永耀朴英杰
- 关键词:ROS巨噬细胞细胞凋亡小鼠
- 白藜芦醇诱导HepG2细胞凋亡的线粒体机制
- 研究背景和目的:
线粒体曾一度被认为是细胞的“能量工厂”,其主要功能是为细胞提供各种功能活动所需要的能量。除此以外,近年来人们认识到线粒体还具有其他一些重要的功能,其中线粒体在细胞凋亡中的关键作用已成为研究热点...
- 马晓冬
- 关键词:白藜芦醇蛋白质组细胞凋亡
- 文献传递
- 炭疽杆菌保护性抗原基因芯片探针的制备
- 2003年
- 目的快速制备炭疽杆菌保护性抗原基因芯片探针。方法根据PubMed上公布的炭疽杆菌保护性抗原的DNA序列设计引物,扩增保护性抗原基因。利用酶切、AT克隆方法快速分析筛选出保护性抗原基因片段的重组子,从而制备成芯片探针。DNA自动分析仪对克隆片段进行序列测定,生物信息学软件对其基因序列进行分析。结果根据炭疽杆菌保护性抗原设计的引物,可以扩增出长2 205 bp的保护性抗原基因,经酶切、AT克隆方法筛选出约7个长度不一的片段,对其片段进行序列测定并进行Blast序列比对得知这些片段均属于炭疽杆菌保护性抗原基因。结论利用PCR扩增产物并结合酶切、AT克隆方法可以快速、简便地制备基因芯片探针。
- 马晓冬马文丽吕梁肖维威孙朝晖郑文岭
- 关键词:炭疽杆菌保护性抗原
- 一种检测巨噬细胞内NADPH氧化酶活性的新方法被引量:4
- 2000年
- 目的建立一种检测活细胞内NADPH氧化酶活性的新方法。方法用超氧离子物荧光探针HE标记巨噬细胞后,在激光扫描共聚焦显微镜下,用最适发射波长为530mm的检测器1检测巨噬细胞内HE的荧光强度变化。结果检测器1可检测单个和多个巨噬细胞内HE的荧光强度变化,PMA刺激后巨噬细胞内HF荧光强度增强,NADPH氧化酶活性升高;地塞米松使巨噬细胞内HE荧光强度减弱,NADPH氧化酶活性降低:经地塞米松处理0.5 h, PMA刺激引起的巨噬细胞内 HE荧光强度增强幅度减小, NADPH氧化酶活性变化减小。结论激光扫描共聚焦显微术结合荧光标记技术可原位实时观察活细胞内NADPH氧化酶活性的变化。
- 马晓冬黄行许鲍永耀朴英杰朱晓亮
- 关键词:激光扫描共聚焦显微镜NADPH氧化酶巨噬细胞
- 细小病毒B19 Oligo探针设计被引量:2
- 2004年
- 利用BLAST软件对细小病毒B19的序列进行序列比对,获得特异序列;利用生物学软件Oligo6.40设计特异性高、Tm值接近、长度均一的Oligo探针。结果获得了13条70bp的Oligo探针,用于芯片打印及细小病毒B19的检测。表明利用BLAST系统和生物学软件Oligo6.40设计细小病毒B19诊断芯片的探针是一种简便而有效的方法。
- 吕梁马文丽孙朝晖马晓冬郑文岭
- 关键词:细小病毒B19生物信息学BLAST
- 三氧化二砷诱导线粒体通透性转变孔道开放的机制研究被引量:21
- 2006年
- 背景与目的:线粒体通透性转变孔道(permeabilitytransitionpore,PTP)是线粒体释放细胞色素c和凋亡诱导因子的主要途径,亚砷酸盐可能通过PTP影响细胞凋亡,为了揭示其诱导PTP开放的机制,本实验研究了Ca2+介导的线粒体Ca2+释放(Ca2+-inducedCa2+releasefrommitochondria,mCICR)在As2O3介导的PTP开放及细胞色素C释放中的作用。方法:提取大鼠肝线粒体。通过紫外分光光度仪检测As2O3作用下线粒体的膨胀,测定线粒体PTP的开放状态;采用双波长双光束紫外分光光度仪检测As2O3作用下测试体系内Ca2+浓度的变化引起的吸光度值的变化,以反映线粒体Ca2+的转运(即mCICR)情况;Westernblot检测线粒体上清液中细胞色素c的含量,反映线粒体释放细胞色素c的情况。结果:10μmol/LAs2O3和低浓度Ca2+不能引起PTP开放和细胞色素c释放,10μmol/LAs2O3和高浓度Ca2+诱导PTP开放和细胞色素c释放;当抑制mCICR时,As2O3和Ca2+对PTP开放和细胞色素c释放的作用完全抑制。结论:As2O3介导的PTP开放和细胞色素c释放依赖于mCICR。
- 马晓冬乔东访田雪梅晏芳马安德
- 关键词:白血病AS2O3钙转运线粒体细胞凋亡