高捷
- 作品数：8 被引量：35H指数：4
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 抑肽酶基因的克隆和表达被引量：5
- 2002年
- 抑肽酶作为天然的非特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂 ,临床用途广泛。为实现抑肽酶的大量制备 ,按大肠杆菌惯用密码子用人工方法合成抑肽酶结构基因 ,克隆于PUC18的EcoRⅠ和PstⅠ位点 ,转入Top10大肠杆菌 (recA )中 ,经测序证明序列正确。表达体系模拟抑肽酶的体内成熟过程 ,将其自身的 13肽 pro序列融合于抑肽酶的N端 ,并在其间插入胰蛋白酶识别位点。该融合蛋白在使用PET 11C载体表达时 ,产物以包涵体形式存在于大肠杆菌中 ,表达量占菌体总蛋白的 30 %以上。复性实验证明 :该肽段不影响抑肽酶的正确折叠 ,还能帮助抑肽酶包涵体进行体外折叠 ,提高复性得率。复性后使用胰蛋白酶切割融合蛋白 ,可得天然构象的活性抑肽酶。
- 高捷谭树华吴梧桐
- 关键词：抑肽酶克隆复性基因表达
- 酵母菌细胞破壁方法
- 一种用对羟基苯甲酸酯进行酵母菌细胞破壁新方法，该方法条件温和，安全无毒，较好地保持提取物质的生物活性，可用于各种酵母细胞来源的蛋白、酶、多肽及其它活性物质的提取，以及基因工程酵母表达系统表达产物的提取与纯化，尤其适用于食...
- 谭树华吴梧桐高捷海迪乐
- 文献传递
- 酵母菌乳糖酶中试制备新技术
- 谭树华吴梧桐高捷海迪勒高向东尚新燕
- 世界上目前消除或减轻“乳糖不耐症”的通常做法是采用替补疗法，即利用微生物来源的乳糖酶制种高颜色生物催化剂，将乳品中的乳糖水解成易被人体吸收的葡萄糖和半乳糖，从而制成低乳糖乳品或将该酶制成口服制剂在饮用乳制品时服用。该项目...
- 关键词：
- 关键词：乳糖酶发酵
- 酵母菌细胞破壁新方法
- 一种用对羟基苯甲酸酯进行酵母菌细胞破壁新方法,该方法条件温和,安全无毒,较好地保持提取物质的生物活性,可用于各种酵母细胞来源的蛋白、酶、多肽及其它活性物质的提取,以及基因工程酵母表达系统表达产物的提取与纯化,尤其适用于食...
- 谭树华吴梧桐高捷海迪乐
- 文献传递
- 药用多肽新型融合表达体系的构建及应用研究
- 该课题属于基因工程应用基础研究领域,旨在建立药用多肽,尤其是含有较多二硫键的药用多肽高效表达的技术平台,从而为其它具有类似结构的药用多肽的基因工程表达打下基础.以含三对二硫键,由58氨基酸残基组成的抑肽酶为模型蛋白,用化...
- 高捷
- 关键词：硫氧还蛋白突变体基因工程
- 文献传递
- 酵母菌乳糖酶中试制备工艺研究被引量：5
- 2003年
- 研究了酵母菌乳糖酶中试制备工艺包括发酵、菌体破壁、酶液精制等。以 2 %乳糖、2 %葡萄糖、2 %玉米浆、0 .5%酵母膏、1.5%尿素配方作为发酵培养基 ,通过对发酵各参数的优化控制 ,在 50 0L规模发酵罐中进行发酵 ,单位体积酶活达 13 .8U ml。此外 ,还建立了较大规模酵母菌细胞壁快速破壁方法 ,以及简便的乳糖酶提取制备工艺。整套工艺操作简便 ,成本低廉且无须添加任何大型设备 ,酶的总提取收率在 67%以上。该酶制品在 6℃低温条件下可在较短时间内有效水解乳制品中的乳糖 ,降解率达 70
- 谭树华高捷海迪勒尚新燕高向东吴梧桐
- 关键词：酵母乳糖酶乳糖不耐症牛乳中试
- 酵母菌药用乳糖酶制备新方法被引量：7
- 2004年
- 目的 :建立一种简易的从酵母菌制备克鲁维酵母乳糖酶的方法。方法 :在 3 0L发酵罐中进行发酵 ,用对羟基苯甲酸酯进行细胞破壁 ,用超微过滤方法浓缩破壁液。结果 :乳糖酶的收率可达到每毫升发酵液含11 4ONPG单位。从酵终细胞中释放乳糖酶可达 70 % ,每毫升牛奶中加入 1 2ONPG单位制备的液态乳糖酶可使牛奶中的乳糖水解率达到 70 %。
- 谭树华高捷海迪勒尚新燕高向东吴梧桐
- 关键词：乳糖酶破壁对羟基苯甲酸酯
- 大环内酯类药物抗性基因及新药研究进展被引量：19
- 2001年
- 大环内酯类抗生素在广泛使用的过程中 ,细菌的耐药现象 (特别是在G+ 菌中 )日益严重。随着对细菌耐药机制及编码基因研究的深入 ,人们改造出新的 4 氨基甲酸酯大环内酯和酮酯 (大环内酯的 3 酮衍生物 )类抗生素 ,它对已发现的大环内酯耐药菌有较强的活性。此外 ,大环内酯其余的许多非抗菌活性 ,如抑制细胞因子的生成 ,抗癌 ,抗寄生虫等活性 ,在最近也陆续有所报道。
- 顾觉奋高捷
- 关键词：大环内酯耐药性基因
