何承文
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 供职机构：宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 豚鼠胎儿成纤维细胞的分离培养及生物学特性分析被引量：2
- 2013年
- 为建立豚鼠成纤维细胞系,分离培养豚鼠胎儿成纤维细胞,并对其进行细胞活力、生长曲线、细胞周期及基因转染等分析。结果表明,豚鼠胎儿成纤维细胞在10代以内时形态良好,随着传代次数的增加,梭型细胞有拉长趋势,至第20代时梭形明显拉长,单位面积细胞数目大量减少。同时,细胞冻存后复苏贴壁情况良好。EGFP基因转染的成纤维细胞形态特征及生长状态与未转染细胞相似,转基因细胞和未转基因细胞的生长曲线均为S形,符合体外培养细胞正常生长增殖规律。以流式细胞仪分析逆转录病毒介导的EGFP基因转染细胞,可见染色体核型仍为二倍体,说明感染的细胞保持其遗传稳定性。流式细胞仪检测转染后不同时间点收集的病毒液感染的细胞效率,结果显示,病毒转染48h、72h收集病毒液组感染效率分别为16.9%和11.6%,显著高于24h收集病毒液组(0.9%)。
- 吴月红何承文宋孚洋闫琰刘升何玉龙
- 关键词：胎儿成纤维细胞EGFP基因逆转录病毒
- 不同转染试剂对慢病毒包装及包装后病毒感染豚鼠成纤维细胞效率的影响被引量：3
- 2015年
- 为了研究不同转染试剂对慢病毒载体包装效率及包装后病毒感染细胞的能力,试验利用磷酸钙、脂质体2000、脂质体LTX和Quick Shuttle-293转染编码绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)基因的重组慢病毒载体进入293T细胞包装病毒,包装的病毒感染豚鼠成纤维细胞,通过流式细胞仪检测转染试剂的转染效率和病毒感染效率,同时利用MTT法检测了4种转染试剂的细胞毒性。结果表明:磷酸钙在转染效率、转染后细胞活力及包装后病毒对豚鼠成纤维细胞的感染效率都最低,分别为(54.8±2.9)%、(26.7±6.0)%和(7.6±1.1)%;脂质体2000和脂质体LTX对293T细胞转染效率差异不显著(P>0.05),但脂质体LTX转染后细胞活力显著高于脂质体2000(P<0.05),即脂质体LTX的细胞毒性显著低于脂质体2000。而Quick Shuttle-293法转染后的转染效率、转染后细胞活力和其包装后的病毒对靶细胞的感染率分别为(95.5±1.8)%、(88.5±5.7)%和(93.3±1.0)%,都显著高于其他三种转染试剂(P<0.05)。说明在本试验条件下,Quick Shuttle-293是一种高效、低毒的慢病毒转染包装试剂,可用于通过病毒载体介导的基因转染技术制备豚鼠诱导多能性干细胞(i PS)。
- 何承文何玉龙吴月红邵风慧
- 关键词：基因转染慢病毒绿色荧光蛋白成纤维细胞
- 豚鼠诱导性多能干细胞样细胞的建立
- 诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells，iPSCs)是指将体细胞进行重编程，转化为具有胚胎干细胞特性和功能的多能干细胞。诱导多能干细胞可以自我更新并可分化成各种类型的体细胞，不仅在替...
- 何承文
- 关键词：诱导多能干细胞慢病毒成纤维细胞重编程动物模型
- 文献传递
