何江
- 作品数：9 被引量：12H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属大学城医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市渝中区科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 姜黄素联合羟基喜树碱诱导膀胱癌BIU-87细胞凋亡的体外实验研究
- 目的:通过观察姜黄素联合羟基喜树碱对人膀胱癌BIU-87细胞生长抑制作用和凋亡的影响，初步探讨其作用机制。
方法:利用免疫组化检测膀胱癌和癌旁组织中YAP表达情况;培养人膀胱癌细胞BIU-87，用姜黄素和羟基喜树碱...
- 何江
- 关键词：姜黄素羟基喜树碱膀胱癌细胞凋亡体外实验
- LATS1基因去甲基化对人肾癌细胞生物学功能及其Hippo-YAP信号通路的影响被引量：4
- 2014年
- 目的探讨LATS1基因去甲基化对人肾癌细胞生物学功能及其Hippo-YAP信号通路的影响。方法利用RT-PCR检测人肾透明细胞癌细胞系786-O和人胚肾细胞系HEK-293中Hippo-YAP信号通路大肿瘤抑制基因1(large tumor suppressor gene 1,LATS1)mRNA和下游癌基因Yes-相关蛋白(yes-associated protein,YAP)mRNA的表达水平,用亚硫酸氢盐测序法(bisulfite sequence-PCR,BSP)对LATS1低表达细胞786-O进行甲基化分析,5-氮杂-2脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,DAC)处理786-O和HEK-293后,用RT-PCR、Western blot检测各组细胞LATS1和YAP的mRNA和蛋白表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期,CCK-8检测各组细胞增殖抑制情况。结果 786-O较HEK-293 LATS1mRNA表达水平显著降低(P<0.05),YAP mRNA表达水平显著升高(P<0.05),BSP显示LATS1在人肾癌细胞系786-O中高度甲基化;DAC处理786-O后,LATS1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),YAP mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),周期停滞在G0/G1期(P<0.05)、细胞增殖受到明显抑制(P<0.05)、细胞凋亡显著增加(P<0.05),而HEK-293组均无明显变化(P>0.05)。结论 LATS1基因去甲基化后下调YAP基因表达,抑制786-O细胞增殖并诱导其凋亡。LATS1基因甲基化在肾癌发生中起重要作用。
- 陈柯宏李兴森何江黄飚曹建佳盛夏李文宾李美材王德林曾强锋黄亮亮
- 关键词：肾细胞癌去甲基化
- 原发性醛固酮增多症的诊断及治疗观察被引量：1
- 2015年
- 目的回顾性总结原发性醛固酮增多症(PHA)的诊断及治疗经验。方法选取2009年1月至2013年12月重庆医科大学附属第一医院诊断为PHA患者84例,根据临床表现、血钾、24h尿钾、血气分析、立位醛固酮与肾素比值(ARR)、肾上腺静脉取血(AVS)、卡托普利抑制试验、CT定位检查及术后病理确诊为PHA,采用后腹腔镜肾上腺肿瘤切除术治疗,将患者分为典型临床表现组和不典型临床表现组;比较两组患者肿瘤大小、术前美国麻醉师协会(ASA)分级、手术时间、术中出血量、术前准备时间、术后住院时间。结果典型组与不典型组肿瘤最大径、手术时间、术后住院时间、术中出血量比较,差异无统计学意义(P>0.05);典型组和不典型组术前准备时间、术前ASA分级比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论典型和不典型PHA诊断及治疗无差别;典型组较不典型组手术风险高,需要较长的术前准备时间;AVS适用于早期PHA确诊或定位困难者。
- 刘文聪王德林程庆丰张鑫李美才张尧蒲军何云锋吴小候李启富何江
- 关键词：醛固酮增多症
- Rce1在膀胱癌的表达及其对T24细胞凋亡的影响被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨Rce 1(Ras and a-factor converting enzyme 1)在膀胱癌组织及对应癌旁组织中的表达差异及其意义;探究慢病毒介导sh RNA沉默Rce1基因对人膀胱癌细胞株T24细胞凋亡的影响。方法:采用q RT-PCR和Western blot技术检测Rce1在12例膀胱癌组织及对应癌旁组织中m RNA和蛋白表达情况,采用免疫组化技术检测76例膀胱癌组织及对应癌旁组织中Rce1表达情况;结合临床病理资料,分析Rce1表达与临床病理特征的关系。设计针对Rce1基因的sh RNA慢病毒干扰载体感染T24细胞,经嘌呤霉素筛选后建立稳定感染细胞系,实时荧光定量PCR、Western blot分别检测感染后各组细胞Rce1 m RNA和蛋白表达水平;应用流式细胞仪检测T24细胞凋亡改变情况。结果:q RT-PCR和Western blot显示在12对癌及癌旁组织中Rce1差异性表达,差异有统计学意义(P=0.00);78例癌组织中Rce1阳性表达率为70.5%(55/78),癌旁组织中阳性率为19.0%(4/21),组间差异有统计学意义(P=0.000);统计学分析表明,Rce1表达量与肿瘤组织学分级、T分期和肿瘤是否远处转移存在相关关系(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,Rce1阳性表达与病人术后生存时间呈负相关关系(P=0.016)。与空白对照组和阴性对照组相比,感染sh RNA慢病毒干扰载体细胞组Rce1 m RNA和蛋白表达水平明显下调(P=0.000),细胞凋亡明显增加。结论:Rce1在膀胱癌组织中表达高于癌旁组织,Rce1在膀胱癌的发生发展中可能发挥重要作用;慢病毒介导sh RNA沉默Rce1基因能有效下调Rce1在T24细胞中表达,并诱导细胞凋亡;Rce1有望成为膀胱癌临床诊治和预后的一个新指标。
- 曾强锋黄亮亮王德林何江吴文强何云锋李英麦力李建君刘俊男
- 关键词：膀胱癌免疫组化
- RNAi沉默整合素连接激酶基因对人膀胱癌BIU-87细胞体内成瘤的影响
- 2012年
- 目的:研究RNAi沉默整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因对人膀胱癌BIU-87细胞裸鼠皮下成瘤的影响。方法:构建4条针对ILK基因的特异性miRNA干扰载体和1条阴性对照载体,并利用脂质体转染法将其转染BIU-87细胞,并筛选获得稳定转染细胞株。利用RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测抑制效果。将10只裸鼠随机分为2组,皮下分别接种转染组细胞和未转染组细胞,观察瘤体的生长情况,并于接种4周后处死裸鼠,测量其瘤体体积和重量,并将瘤体做HE染色,观察瘤体病理情况。结果:转染组细胞ILK的表达明显受到抑制,以miR-3组的抑制效率最高。裸鼠皮下成瘤实验检测发现:两组均有瘤体形成,未转染组较转染组瘤体生长快,未转染组体积平均为:289.56±36.49mm3,转染组为:56.67±4.32mm3。瘤体重量分别为:1.265±0.02 g和0.518±0.03g。转染组与未转染组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:利用RNAi技术能有效抑制靶基因ILK的表达,从而降低膀胱癌细胞的体内的增殖能力。
- 何江陈亮王德林黄飚
- 关键词：ILKBIU-87裸鼠
- 慢病毒介导shRNA沉默YAP基因对人前列腺癌LNCaP细胞增殖、凋亡及其雄激素受体的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨慢病毒介导sh RNA沉默Yes-相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)基因对人激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P细胞增殖、凋亡及其雄激素受体(androgen receptor,AR)的影响。方法:3条针对YAP基因的sh RNA慢病毒干扰载体感染LNCa P细胞,经嘌呤霉素筛选后建立稳定感染细胞系,real-time PCR、Western blot分别检测感染后各组细胞YAP、AR m RNA和蛋白水平;选取沉默效果最佳sh RNA慢病毒干扰载体组,以细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)、平板克隆形成实验(colony formation)检测LNCa P细胞增殖能力;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测LNCa P细胞凋亡改变。结果:重组慢病毒成功感染前列腺癌LNCa P细胞,经嘌呤霉素筛选后感染效率达95%以上,获得稳定沉默YAP基因LNCa P细胞系。与空白对照组和阴性对照组比较,感染sh RNA慢病毒干扰载体各组中YAP、AR m RNA及蛋白表达水平明显下调(P=0.000),细胞增殖受到明显抑制(P=0.000),细胞凋亡明显增加(P=0.000)。结论:慢病毒介导sh RNA沉默YAP基因能有效下调YAP在LNCa P细胞中表达,并抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡;YAP可能作为AR配体参与AR信号通路的调节。
- 李美材何江吴文强黄亮亮曾强锋曹建佳陈柯宏盛夏李文宾王德林
- 关键词：前列腺癌雄激素受体慢病毒
- shRNA沉默YAP基因对人肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨慢病毒干扰载体沉默Yes-相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)对人肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响。方法:用细胞免疫荧光法检测肾癌786-O细胞中YAP蛋白表达情况;构建针对YAP基因的shRNA慢病毒干扰载体转染786-O细胞。RT-PCR和Western blot分别检测干扰786-O细胞前后YAP mRNA及蛋白的表达情况;CCK-8(cell counting kit-8)法检测沉默YAP后细胞增殖的改变;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡和周期的变化。结果:786-O细胞中YAP蛋白表达于细胞浆和细胞核;shRNA-YAP慢病毒干扰载体转染4 d后,可明显下调786-O细胞YAP mRNA及蛋白表达水平(P=0.000),并且明显抑制细胞增殖和促进细胞凋亡(P=0.000);细胞周期紊乱,G1期细胞明显增加,S期细胞明显降低(P=0.000)。结论:YAP-shRNA慢病毒干扰载体能有效抑制YAP基因在786-O细胞中表达,进而抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。
- 曹建佳何江李兴森陈柯宏盛夏李文宾李美材黄飚王德林
- 关键词：肾细胞癌RNA干扰慢病毒
- 慢病毒介导LATS1过表达对人肾癌细胞系786-0增殖、凋亡及下游癌基因YAP的影响
- 2015年
- 目的探讨慢病毒介导LATS1过表达对人肾癌细胞786-0增殖、凋亡及下游癌基因YAP的影响。方法采用携带LATS1基因的慢病毒载体感染人透明细胞肾癌细胞系786-0,利用RT-PCR检测感染后786-0细胞中Hippo-YAP信号通路大肿瘤抑制基因-1(large tumor suppressor gene 1,LATS1)mRNA和下游癌基因Yes-相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)mRNA的表达水平,Western blot检测LATS1和YAP的蛋白表达水平,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡和周期,细胞增殖/毒性试剂(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖抑制情况。结果慢病毒介导LATS1感染肾癌786-0细胞系后,LATS1 mRNA及蛋白表达水平显著高于对照组及空病毒组(P<0.05),YAP mRNA及蛋白表达水平显著低于对照组及空病毒组(P<0.05),细胞周期停滞在G1期(P<0.05)、细胞增殖受到明显抑制(P<0.05)、细胞凋亡显著增加(P<0.05)。结论慢病毒介导LATS1过表达下调YAP基因表达,抑制786-0细胞增殖、促进其凋亡并阻滞细胞周期于G1期。肾癌的发生、发展可能与LATS1和YAP表达失调有关。
- 陈柯宏何江王德林刘武江
- 关键词：肾细胞癌慢病毒
- CCM联合HCPT对人膀胱癌BIU-87细胞YAP、TEAD1表达及生物学功能的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨姜黄素(CCM)联合羟基喜树碱(HCPT)对人膀胱癌BIU-87细胞中YAP、TEAD1表达及凋亡的作用。方法 CCM和HCPT分别单独与联合用药处理膀胱癌BIU-87细胞。免疫组织化学检测膀胱癌组织及癌旁组织中YAP和TEAD1表达情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR和Western blot检测YAP及TEAD1基因的mRNA和蛋白的表达变化。结果 YAP和TEAD在膀胱癌组织及癌旁组织中均有阳性表达,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示CCM和HCPT均可有效诱导膀胱癌细胞BIU-87的凋亡。CCM组和HCPT组BIU-87细胞中YAP及TEAD1mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),联合用药组YAP及TEAD1mRNA和蛋白表达更低(P<0.05)。结论 CCM和HCPT联合用药抗癌机制可能是通过抑制Hippo信号通路中YAP癌基因表达,下调TEAD1,并诱导膀胱癌细胞凋亡产生。
- 何江曹建佳陈柯宏王德林盛夏李文宾黄亮亮
- 关键词：羟基喜树碱
