刘卫东
- 作品数：37 被引量：32H指数：4
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 来自于Clostridium difficile中的唾液酸醛缩酶的蛋白质晶体学研究
- 酸醛缩酶(NAL Sialic acid aldolase,EC 4.1.3.3)在生物体内可逆地催化N-乙酰-d-神经氨酸(Neu5Ac)的裂解而生成N-乙酰-d-甘露糖胺(ManNAc)和丙酮酸,从而参与糖类降解途径...
- 刘卫东陈曦崔云凤冯进辉郭瑞庭吴洽庆朱敦明
- 文献传递
- 不对称还原大位阻二芳香基甲酮的羰基还原酶的基因克隆及性质分析被引量：1
- 2013年
- 由于二芳香基甲酮的位阻大及羰基两侧的取代基差异性较小,对其进行不对称还原是生物催化中具有挑战性的难题之一。文中通过对毕赤酵母GS115基因组序列的分析,发现了一个潜在羰基还原酶基因pascr。将该基因克隆、表达在大肠杆菌Rosetta2(DE3)中,通过Ni-NTA对重组蛋白进行了分离纯化,并对酶的性质进行了研究。PasCR专一性利用NADPH作为辅酶,其最适反应pH为6.5;最适反应温度为35℃;凝胶层析实验结合SDS-PAGE分析表明PasCR在溶液中以二聚体形式存在。PasCR能够不对称还原位阻较大的二芳香基甲酮类化合物,如4-甲基二苯甲酮、4-氯二苯甲酮、2-氯二苯甲酮等,对4-甲基二苯甲酮的还原产物的ee值达到了85%。
- 李哲刘卫东陈曦贾士儒吴洽庆朱敦明马延和
- 关键词：生物催化羰基还原酶毕赤酵母
- 共固定化酶催化合成d-丙氨酸
- D-丙氨酸是一种非天然氨基酸,是重要的手性药物中间体,可用于生产新型广谱抗生素、食品添加剂、维生素B6等。D-丙氨酸的制备方法有微生物发酵法[1],化学合成法[2]和生物酶催化合成法[3]。其中,生物催化合成法具有反应条...
- 李键煚陈曦崔云凤刘卫东冯进辉吴洽庆朱敦明
- 关键词：催化合成
- 文献传递
- 一种磺基转移酶及其应用
- 本发明涉及生物技术领域和肝素生物合成领域，具体涉及一种磺基转移酶及其应用。本发明挖掘得到磺基转移酶S4来源于鸟类，属于首次报道，并实现了在大肠杆菌中的表达和纯化。经验证具有活性，可用于后续改造提高活性。因此，本发明具有潜...
- 李金山杨书尧龚巧琳殷亮寇梦云刘卫东朱蕾蕾高健王钦宏马延和
- 氧化还原酶的改造与手性胺的不对称合成
- 刘卫东高秀珍李广悦冯进辉吴洽庆朱敦明
- 关键词：单胺氧化酶
- 来源于嗜热氢化杆菌的新型对苯二甲酸双(羟乙)酯水解酶的表达纯化与酶学性质被引量：1
- 2023年
- 石化来源的聚对苯二甲酸乙二酯(polyethylene terephthalate,PET)被广泛用于矿泉水瓶、食品包装和纺织品等领域,因其在自然界中不易分解,大量使用后的PET废弃物造成了严重的环境污染与资源浪费。使用生物酶法对PET废弃物进行解聚,并对解聚产物进行升级循环利用是进行塑料污染治理的重要方向之一,其中关键的是PET水解酶的解聚效率。对苯二甲酸双(羟乙基)酯(bis(hydroxyethyl)terephthalate,BHET)是PET生物酶解的中间产物,其累积是限制PET水解酶催化效率的一个重要因素,BHET水解酶和PET水解酶的联用能提升PET的整体水解效率。来源于嗜热氢化杆菌(Hydrogenobacter thermophilus)的双烯内酯酶(HtBHETase)对BHET有显著水解效果,将该酶在大肠杆菌(Escherichia coli)中进行重组表达并纯化后,对其酶学性质进行了研究。结果显示,HtBHETase对短碳链的酯类如对硝基苯酚乙酸酯催化活性较高,HtBHETase以BHET为底物时的最适反应pH值和最适反应温度分别为5.0和55℃;该酶有较好的热稳定性,经80℃的条件处理1 h仍能保持80%以上活性,显示出了良好的热稳定性,HtBHETase有在PET塑料生物解聚中使用的潜力,本研究为推动生物酶法降解PET提供了新的参考。
- 陈阳阳高健赵夷培王浩韩旭张洁张洁侯颖刘卫东
- 关键词：水解酶表达纯化酶学性质
- 来源于海洋宏基因组塑料降解酶Ple629的耐热性提升改造被引量：1
- 2023年
- 石化来源的聚酯类塑料如聚对苯二甲酸乙二醇酯(polyethylene terephthalate,PET)以及聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯(polybutylene adipate terephthalate,PBAT)等已被广泛使用,但由于它们在自然界中难以降解或生物降解周期较长导致了严重的环境污染,因此对这些塑料废弃物的处理是亟待解决的问题之一。从循环经济的角度考虑,利用生物酶法对聚酯类塑料如PET或PBAT等的废弃物进行解聚,再将解聚产物进行循环利用,是一个很有潜力的研究方向。探究近年来关于聚酯塑料降解酶的报道发现,高活性且耐高温的降解酶会有更大的潜在优势。来自海洋微生物宏基因组的中温塑料降解酶Ple629,在常温下对聚酯类塑料PET和PBAT均有较好的降解活力,但由于不耐受高温,限制了其潜在应用。在前期获得Ple629三维结构的基础上,本研究基于结构比对及能量设计,找到了一些潜在提升其热稳定性的位点进行改造设计,并对突变体进行了表达纯化和热稳定性测定。突变体V80C和D226C/S281C的熔点温度(Tm)值分别提升了5.2℃和6.9℃,突变体D226C/S281C的活性也比野生型酶提高了1.5倍,为后续对Ple629的进一步改造提供了思路和依据。
- 赵夷培王浩武攀李志帅刘夫锋顾群刘卫东刘卫东韩旭
- 关键词：聚对苯二甲酸乙二醇酯水解酶表达纯化耐热性
- 来自于Symbiobacterium thermophilum中的meso -diaminopimelate脱氢酶的晶体结构研究
- 氨基酸脱氢酶(EC.1.4.1.X)能催化氨基酸及其对应酮酸之间的可逆氧化脱氨和还原氨化反应,可从酮酸出发以游离氨作供体进行氨基酸的生物合成,其催化副产物为水,因此,利用该酶进行氨基酸的直接手性生物合成是经济且环保的方法...
- 刘卫东李哲黄骏翔陈曦张大龙郭瑞庭吴洽庆朱敦明
- 玉米赤霉烯酮水解酶耐热性的分子改造被引量：3
- 2019年
- 内酯水解酶ZHD101对玉米赤霉烯酮降解效果显著,是目前研究最广泛的玉米赤霉烯酮降解酶,但由于热稳定性较低,无法满足饲料生产制粒过程中的温度要求。作者利用理性设计和分子改造在其分子中引入二硫键,以提高ZHD101的热稳定性。通过在分子引入七对半胱氨酸双突变(A110C/P196C、S136C/R189C、D143C/P181C、S147C/P181C、D199C/A202C、L200C/A231C、R204C/G205C)以形成潜在的二硫键,研究其对热稳定性的影响。结果表明,突变体S136C/R189C和D143C/P181C在50℃加热处理2 min后的残余活性高于野生型,其中突变体D143C/P181C的残余活性是野生型的2倍,且室温下活力损失小于10%。在此基础上设计四突变(S136C/D143C/P181C/R189C),热稳定性和活力并不优于双突变D143C/P181C。本研究结果为提高ZHD101在饲料工业上的应用潜力打下了基础。
- 许中霞刘桂智刘卫东郭瑞庭李华钟郑迎迎
- 关键词：玉米赤霉烯酮热稳定性二硫键
- D‑叔亮氨酸的一种生物催化制备方法
- 本发明公开了一种新的利用来源于Symbiobacterium thermophilum内消旋‑二氨基庚二酸脱氢酶(StDAPDH)突变体生物催化剂来还原氨化合成光学纯D‑叔亮氨酸的方法。其特征在于将StDAPDH蛋白质序...
- 刘卫东朱敦明吴洽庆陈曦冯进辉马延和
- 文献传递
