刘梅
- 作品数：80 被引量：85H指数：5
- 供职机构：南通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 干扰Kinesin-12表达对星形胶质细胞周期和凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 :比较驱动蛋白家族成员Kinesin-12和Kinesin-5对星形胶质细胞周期和凋亡的影响差异,探讨Kinesin-12在细胞增殖中的作用机制。方法 :采用si RNA方法干扰Kinesin-12、Kinesin-5基因表达,通过实时定量PCR、Western Blot检测干扰表达效率;Hoechst33342染色观察细胞凋亡;经AnnexinⅤ/PI双染色检测细胞凋亡率;流式细胞术检测细胞周期变化;细胞免疫化学染色观察Kinesin-12失功能后MyosinⅡB的分布改变。结果:Kinesin-12和Kinesin-5蛋白表达下调达65%以上;Hoechst33342染色和AnnexinⅤ/PI双染色法发现干扰Kinesin-12和Kinesin-5表达后细胞凋亡率显著增加(P<0.05);流式细胞术检测发现Kinesin-12 si RNA处理后细胞周期被阻滞在G1期,而Kinesin-5si RNA处理后,细胞周期被阻滞在G2/M期。细胞免疫化学染色发现,抑制Kinesin-12表达后MyosinⅡB(即Myh 10)的分布发生改变。结论:抑制Kinesin-12或Kinesin-5表达,均可明显阻滞细胞分裂并诱导细胞凋亡,但作用机制与Kinesin-5不同,推测Kinesin-12可能与MyosinⅡB相互作用形成异源聚合体作用于微管微丝骨架重构。
- 冯杰花娟胡遵鲁严莹莹巫荣华刘梅
- 关键词：星形胶质细胞凋亡细胞周期
- 壁虎胚胎大脑皮层神经元和胶质细胞的分离、培养及纯化被引量：2
- 2007年
- 目的建立多疣壁虎胚胎大脑皮层神经元和胶质细胞的分离、培养及纯化方法。方法分离孵化15d的多疣壁虎胚胎的大脑皮层,经胰酶消化,细胞计数后接种于培养瓶。采用差速贴壁及反复传代相结合的纯化培养方法培养胶质细胞;采用添加B27的神经元培养基培养神经元,并用免疫细胞化学方法鉴定。结果获得体外培养的壁虎GFAP阳性表达胶质细胞,4代后纯度达95%以上;采用神经元培养基,神经元生长良好,NF、MAPⅡ表达阳性,第10d纯度达95%以上。结论建立了壁虎细胞的培养方法,并获得高纯度的胶质细胞和神经元,为进一步对神经系统的深入研究提供细胞模型。
- 顾芸刘梅刘炎顾晓松
- 关键词：皮层神经元胶质细胞细胞培养多疣壁虎
- 中药神经生长液对自然衰老小鼠脑SOD活性和MDA含量的影响被引量：3
- 2004年
- 马振祥周鸣鸣刘梅
- 关键词：神经生长液自然衰老小鼠抗氧化
- 人胰高血糖素样肽-1突变体基因原核表达质粒的构建
- 2008年
- 目的:对人胰高血糖素样肽-1(hGLP-1)进行基因突变,构建GST融合蛋白原核表达质粒pGEX-4T/(Val8)hGLP-1,并在大肠杆菌中诱导表达。方法:选择大肠杆菌偏爱密码子,将hGLP-1(7～37)第2位的丙氨酸(Ala8)定点突变为缬氨酸(Val8),直接生物合成4个寡聚核苷酸片段并进行基因拼接,形成完整的hGLP-1突变体基因(Val8)hGLP-1,并连接到载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21,BamH I与Xho I双酶切电泳鉴定与序列测定,然后诱导表达其融合蛋白。结果:经酶切电泳鉴定与测序分析,证实所合成的突变体基因(Val8)hGLP-1已克隆到pGEX-4T-1中,经SDS-PAGE分析可以诱导表达出融合蛋白。结论:成功地构建了GST融合蛋白原核表达质粒pGEX-4T/(Val8)hGLP-1,为进一步获得重组hGLP-1蛋白奠定基础,为产业化规模制备hGLP-1突变体提供实验依据。
- 朱清顾云陆伟刘梅
- 关键词：融合蛋白基因突变克隆糖尿病
- D-Ala<Sup>2</Sup>-GIP在制备促进血管再生产品中的应用
- 本发明公开了D‑Ala<Sup>2</Sup>‑GIP在制备促进血管再生产品中的应用。本发明通过实验充分证明作为葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)的长效类似物，D‑Ala<Sup>2</Sup>‑GIP静脉注射或损伤处局...
- 管徒晨刘炎刘梅徐曼巫荣华
- 序贯式糖尿病教育对社区糖尿病患者血糖代谢影响的研究
- 目的：探讨序贯式糖尿病教育对社区糖尿病患者血糖代谢的影响.方法：采用空白对照和自身对照研究，将68例糖尿病患者分为实验组和对照组，对照组给予常规糖尿病教育；实验组给予序贯式糖尿病教育.通过比较2组患者在教育前和教育后6个...
- 赵正清刘洋宋艳丽于德纯刘梅
- Tropic1808在PC12细胞中的表达被引量：2
- 2005年
- 目的构建稳定表达tropic1808基因的PC12细胞株,并通过观察稳定株中高分子量神经丝蛋白(NF-H)的表达以初步观察该基因的作用。方法构建重组真核表达载体pcDNA-HA-tropic1808,转染PC12细胞,经G418筛选、Westernblot鉴定。采用RT-PCR,实时PCR,Westernblot和细胞组织化学方法观察tropic1808稳定株中NF-H的表达。结果Westernblot检测表明,tropic1808基因稳定表达,RT-PCR,实时PCR,Westernblot和细胞组织化学方法均观察到NF-H在tropic1808稳定株中的表达高于空载体对照。结论Tropic1808基因可以在PC12稳定表达且NF-H在tropic1808稳定株中表达上升。
- 刘梅张琦刘炎丁斐
- 关键词：PCI2真核表达WESTERNBLOT实时PCR
- 大鼠myostatin蛋白的抗体制备及其应用(英文)
- 2009年
- 目的采用GST-myostatin融合蛋白进行多克隆抗体的制备、鉴定并进一步阐明神经损伤后腓肠肌肌萎缩过程中myostatin蛋白表达变化。方法将纯化好的GST-myostatin融合蛋白免疫家兔,获得抗血清,经Western blot、免疫荧光组织化学及ELISA检测抗体特异性及效价;建立大鼠胫神经夹伤模型,采用western blot及免疫组织化学法检测胫神经夹伤后不同时间段腓肠肌中myostatin蛋白表达变化。结果得到较高纯度的GST-myostatin融合蛋白,获得兔源的抗myostatin血清,经western blot、免疫组织化学及ELISA实验证实所得抗体具有较高的特异性及效价;证实在胫神经夹伤后,腓肠肌myostatin蛋白水平迅速上升,在第14天达到高峰,随后逐渐下降,至第28天降至接近正常水平。结论成功制备了兔抗大鼠myostatin抗血清,进一步检测表明了胫神经损伤后腓肠肌中myostatin蛋白的表达具有时间依赖性。本研究为阐明myostatin在骨骼肌萎缩过程中的作用提供了实验依据。
- 黄丽王莉莉刘梅顾晓松
- 关键词：MYOSTATIN抗体WESTERNBLOT免疫组织化学
- 医学院校不同层次学生的细胞生物学教学被引量：2
- 2007年
- 细胞生物学是医学教育的重要基础课程,本文就细胞生物学课程的不同设置,针对不同层次授课对象的知识背景,交流教学目的和内容的一些体会。阐明本科低年级以讲授细胞功能的亚细胞结构为教学目的;本科高年级以讲授细胞功能的分子事件为教学目的;研究生以讲授细胞功能的分子机制为教学目的。因材施教才能达到满意的教学效果。
- 刘梅
- 关键词：细胞生物学教学医学院校
- 多疣壁虎血管活性肠肽基因的克隆及表达
- 2012年
- 目的:克隆多疣壁虎血管活性肠肽(VIP)的cDNA全长序列,研究VIP在正常壁虎各组织中的表达及断尾损伤后脊髓再生过程中的表达变化。方法:通过对多疣壁虎断尾损伤cDNA文库克隆测序获得VIP基因序列。通过Northern blot验证VIP转录本的大小,通过原位杂交检测VIP mRNA在正常壁虎脊髓中的分布。制备壁虎断尾损伤模型,通过采用Real time-PCR和原位杂交的方法检测VIP mRNA在壁虎损伤模型断端近侧脊髓中的表达变化。结果:VIP mRNA全长1933 bp,编码156个氨基酸的前原蛋白。编码的成熟肽与其他物种的同源性约为82.1%。RT-PCR和Northern blot显示VIP在正常壁虎组织中广泛表达,且通过Northern blot发现正常壁虎体内只一个转录本,大小约1.9kb。原位杂交结果显示VIP阳性信号主要分布于脊髓灰质中,白质中仅有少量表达。Real-time PCR和原位杂交结果表明断尾损伤后的近端脊髓组织中VIP表达呈动态变化。结论:获得壁虎VIP全长mRNA序列的基本特征及其多组织表达图谱。VIP在壁虎的脊髓中主要分布于灰质中,壁虎在断尾损伤后近端脊髓VIP的表达呈动态变化。
- 钱玉燕李冬辉张加吉刘梅刘炎
- 关键词：血管活性肠肽壁虎脊髓实时定量聚合酶链反应
