刘镭 作品数:11 被引量:12 H指数:2 供职机构: 华南师范大学生物光子学研究院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 理学 机械工程 更多>>
紫外辐射诱导的细胞凋亡中PUMA与Bcl-2家族蛋白间调控的分子成像研究 被引量:4 2009年 紫外辐射诱导的细胞凋亡是一个包括DNA损伤、死亡受体启动、线粒体破裂等一系列反应的复杂过程。有研究报道,由紫外辐射引发的DNA损伤可以激活肿瘤抑制因子p53,从而触发细胞凋亡级联反应,其中一个重要的事件就是上调促凋亡蛋白(p53 up-regulated modulator of apoptosis,PUMA)的表达。但是,PUMA在紫外辐射诱导凋亡过程中的作用机制尚不清楚。利用荧光共振能量转移技术(Fluorescence resonance energy transfer,FRET),在人类肺腺癌细胞(ASTC-α-1)内实时研究了紫外辐射诱导凋亡过程中PUMA,Bax,Bcl-Xl三者之间的相互作用关系,从而揭示PUMA的作用机制。用120 mJ/cm2的紫外辐射剂量诱导细胞凋亡,通过共转染荧光探针GFP-PUMA和YFP-Bcl-Xl或者CFP-Bcl-Xl和YFP-Bax,在激光共聚焦扫描显微镜下实时检测PUMA和Bcl-Xl或者Bcl-Xl和Bax之间的相互作用。结果显示,紫外辐射后GFP-PUMA与YFP-Bcl-Xl之间的FRET现象逐渐增强,说明PUMA与Bcl-Xl的作用越来越强;CFP-Bcl-Xl与YFP-Bax之间的FRET现象逐渐减弱,说明Bcl-Xl与Bax的作用越来越弱,此过程伴随有YFP-Bax在线粒体的明显定位。该实验结果暗示PUMA是竞争结合了Bcl-Xl,解除了Bcl-Xl对Bax的抑制作用,进而活化了Bax。 张英杰 邢达 刘镭关键词:紫外辐射 BAX BCL-XL 活细胞内可视化研究顺铂诱导细胞凋亡的分子机制 顺铂是一种广谱的抗肿瘤药物,对乳腺癌、睾丸癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、头颈部癌等都有显著疗效。研究表明,顺铂是一种DNA损伤的药物,主要依赖于与DNA形成加合物,通过与DNA分子形成链内或链间交叉联接而抑制DNA的复制,... 刘镭关键词:抗肿瘤药物 顺铂诱导 细胞凋亡 药理机制 文献传递 实时监测BID与BAX在TNF-α诱导的细胞凋亡中的相互作用 肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)主要由单核细胞和巨噬细胞分泌产生, 其它细胞如NK细胞、肥大细胞、多形核中性细胞、大脑的胶质细胞也能产生,它对体外多种肿瘤细胞株有明显... 裴沂辉 邢达 陈同生 高学娟 刘镭关键词:BID BAX FRET 细胞凋亡 文献传递 实时监测高通量低能量激光照射诱导GSK-3β的核质穿梭 2009年 糖原合成酶激酶-3(glycogen synthasekinase-3,GSK-3)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶。哺乳动物细胞中主要存在GSK-3α与GSK-3β两种亚型。以前的研究认为GSK-3是一种单一的磷酸化糖原合成酶的激酶,可以抑制糖原的合成。最近的研究表明GSK-3可以磷酸化50多种底物,进而调节细胞的多种生理过程,包括细胞结构的改变、代谢,基因表达及细胞凋亡。本文主要研究在高通量低能量激光(high fluencelow-power laserirradiation,HF-LPLI)照射下,GSK-3β在活细胞中的动态分布变化。应用荧光蛋白融合蛋白GFP-GSK-3β,在人神经胶质母细胞瘤细胞(U-87)中实时监测高通量低能量激光照射下GSK-3β的动态行为。实验结果显示,120 J/cm^2的氦氖激光照射后,GSK-3β在9 h时进入细胞核,并维持在核内近2 h,随后GSK-3β又从细胞核转位到细胞质中。这表明高通量低能量激光照射激活了GSK-3β。同时,实验结果预示了高通量低能量激光照射可能激活GSK-3β并且参与调控了p53、β-catenin、Myc等相关的转录因子。进一步的研究将探讨在高通量低能量激光照射下,GSK-3β具体调控的转录因子以及调控机制。 黄磊 邢达 吴胜男 刘镭关键词:细胞凋亡 转录因子 活细胞内可视化研究低功率激光照射诱导细胞增殖的分子机制 2009年 低功率激光照射(Low-power laser irradiation,LPLI)可以诱发多种生物效应,如:促进细胞增殖、分化;增强机体免疫机能;降低血液粘滞度; 刘镭 邢达 章玲玲 高学娟 张军涛关键词:细胞增殖 FRET SRC RAS 利用FRET技术实时研究顺铂诱导的Caspase-9活化 2009年 该研究旨在在活细胞内研究顺铂诱导Caspase-9活化的动态过程。实验样品经顺铂处理后,应用基于FRET原理设计的荧光探针pSCAT-9来检测Capase-9活化的动态过程。结果表明:在顺铂诱导细胞凋亡的后期,可以明显检测到Caspase-9的活化,且其进程快,约30 m in即可完成。研究表明,应用FRET技术,可以在活细胞内实时、直观、可视地研究顺铂诱导的Capase-9活化,从而客观地反映Caspase-9在该凋亡信号通路中的动态行为及时空传递特性。 刘镭 邢达关键词:顺铂 细胞凋亡 CASPASE-9 利用荧光共振能量转移技术在活细胞内研究顺铂诱导的凋亡信号通路 被引量:2 2009年 为在活细胞内探讨顺铂诱导的凋亡通路.实验样品经顺铂处理后,应用基于荧光共振能量转移(FRET)原理设计的荧光探针pFRET-Bid和pSCAT-3来检测Bid切割和Capase-3活化的动态变化,同时,利用荧光成像在亚细胞水平对Bid转位线粒体的动力学特征进行了实时分析.结果表明:在顺铂诱导的细胞凋亡过程中,Bid切割发生在药物刺激后4~5h,历时(120±20)min.Bid切割活化后即从胞浆内转位到线粒体,历时(90±15)min.在凋亡后期,可以明显检测到Caspase-3的激活.研究表明,应用FRET及荧光成像技术,可以在活细胞内实时、直观、可视地研究顺铂诱导的细胞凋亡过程,从而客观地反映了Bid、Caspase-3等蛋白质分子在该凋亡信号通路中的动态行为及时空传递特性. 刘镭 张英杰 汪献旺关键词:荧光共振能量转移 顺铂 BID CASPASE-3 实时监测溶酶体光损伤诱导细胞凋亡过程中Bax定位的时空变化 被引量:1 2013年 光敏剂N-aspartyl chlorin e6(NPe6)能特异性定位于溶酶体,溶酶体光损伤光能触发线粒体凋亡通路从而诱导细胞凋亡。Bax是Bcl-2家族一员,是调控细胞凋亡的关键因子之一。静息态下,Bax定位于细胞质中;而在细胞凋亡过程中,Bax会从细胞质转位到线粒体,损伤线粒体,从而启动细胞凋亡。在本研究中,我们在活细胞内实时监控溶酶体光损伤诱导细胞凋亡过程中Bax亚细胞定位的动态变化。结果表明,溶酶体光损伤后约170 min,Bax开始转位到线粒体,在30 min之内便大量聚集在线粒体上。该研究结果实时动态地展示了细胞凋亡过程中Bax的时空变化过程。 刘镭 张真真关键词:BAX 细胞凋亡 低功率激光照射缓解Aβ引起的神经细胞毒性 被引量:1 2016年 阿尔兹海默尔症(Alzheimer’s disease,AD)随着世界人口老龄化的形势严峻,目前成为一种严重威胁老年人身体健康的疾病之一,探究其发病机制以及如何治疗已经刻不容缓。低功率激光照射(low-power laser irradiation,LPLI)作为一种无损伤的新型物理疗法,能调节机体的多种生物学功能,为AD提供一种潜在的治疗方法。我们发现:低功率激光照射可以缓解β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)引起的神经元细胞毒性及细胞死亡,并且可以改善树突萎缩,缓解突触功能性紊乱,为神经元细胞提供保护作用。这一研究将为低功率激光照射治疗阿尔兹海默症在临床上的应用奠定基础。 申琪 王冠宇 刘镭关键词:阿尔兹海默症 神经元 利用FRET技术实时检测顺氯氨铂诱导的细胞凋亡中Calpain介导的Bid切割 顺氯氨铂是应用最多的肿瘤治疗药物之一, 众多研究表明它能引起肿瘤细胞凋亡, 但是其诱发细胞调亡的分子机制尚不完全清楚。有研究报导,顺氯氨铂能诱导Calpain的活化,Calpain能切割调亡蛋白Bid,从而活化Bid诱发... 刘镭 邢达 裴沂辉 陈同生 高学娟关键词:顺氯氨铂 CALPAIN BID FRET 活细胞 文献传递