古勤生
- 作品数：184 被引量：602H指数：16
- 供职机构：中国农业科学院郑州果树研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家西甜瓜产业技术体系建设专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程动力工程及工程热物理更多>>
- 西葫芦品种“夏秋王”的抗病毒鉴定及露地栽培田间表现
- ＜正＞由于葫芦科作物病毒发生普遍,对生产造成极为严重的为害。轻者造成减产,影响品质;重者植株生长严重受阻,不能结果。抗病毒一直是葫芦科作物品种选育的重要目标。有些葫芦科作物已经育成了一些抗病毒品种,如西葫芦:有一些如西瓜...
- 古勤生彭斌栾贵波郭况钟刘丽锋王伟李莉
- 关键词：西葫芦露地栽培黄花叶病毒
- 文献传递
- 葫芦科作物主要病毒病防治研究进展被引量：21
- 2002年
- 对葫芦科作物主要病毒病的防治研究进展作了概述,防治病毒病方法主要包括4种途径:控制病毒传播介体昆虫;依据病毒株系间的交互保护作用,应用弱株系;利用寄主植物的抗病性;应用生物技术培育抗病品种。
- 古勤生
- 关键词：抗病品种葫芦科作物病毒病
- 甜瓜品种抗枯萎病的苗期鉴定被引量：15
- 2011年
- 研究了甜瓜枯萎病病菌(Fusarium oxysporum f. sp. melonis)孢子不同接种浓度(1×105、1×106、1×107个.mL-1)和接种苗龄(子叶期、2 叶1心期、4叶1心期)对甜瓜枯萎病发生的影响。结果表明,采用1×106个.mL-1孢子液浓度,在2叶1心期进行接种鉴定效果较好,最佳的病害调查时间为接种后第10天。采用此方法对18个甜瓜品种进行枯萎病鉴定,结果表明新金雪莲、长香玉、玉姑、春辉、蜜绿5个品种高抗甜瓜枯萎病。
- 刘朋义别之龙彭斌古勤生
- 关键词：甜瓜枯萎病接种浓度
- 西瓜种传尖孢镰刀菌致病性及其粗毒素对种子发芽的影响被引量：13
- 2010年
- 采用浸胚根法和浸根法对京欣一号西瓜种壳分离得到的尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）进行致病性试验。结果表明：从接种后发病幼苗上分离得到的分离物与最初接种所用的镰刀菌菌落形态和生长速率等性状基本相同,采用相同的引物对rDNA进行PCR扩增获得的核苷酸序列完全相同,说明这二者为同一种菌,从而证明西瓜种子上所携带的尖孢镰刀菌具有致病性,在国内首次报道了西瓜种传尖孢镰刀菌具有致病性。西瓜种传尖孢镰刀菌培养滤液和粗毒素提取物处理西瓜种子后,种子的发芽势、发芽率和发芽指数均显著降低,其中发芽势下降了16.7%-29.0%,发芽率下降了14.4%-22.3%,发芽指数下降了19.1%-37.1%,说明培养滤液和粗毒素提取物可影响西瓜种子发芽。
- 吴学宏卢志军陈倩韩鲁明李怀方古勤生
- 关键词：西瓜尖孢镰刀菌粗毒素
- CMV甜瓜分离物外壳蛋白基因的克隆及植物表达载体的构建被引量：3
- 2005年
- 从河南省临颖县采集的病毒感染的甜瓜样本经ELISA检测和接种分离获得黄瓜花叶病毒(Cucunbermosaicvirus,CMV)分离物。把该分离物接种西葫芦,从发病的叶片中提取总RNA,并以此为模板经RTPCR扩增获得CMV的外壳蛋白(cp)基因,将其克隆到pUCmT质粒上。经序列测定和分析,结果表明该cp基因由657个核苷酸组成,编码218个氨基酸。其核苷酸序列与黄瓜花叶病毒亚组I的分离物有较高的同源性,达92.2%～93.9%,与亚组II的同源性仅为76.8%～77.8%,与我国报道的CMV分离物的cp基因序列比较,除香蕉株系XB外核苷酸序列的同源性达91.8%～93.4%。根据这些分析,该CMV分离物属于亚组I。将cp基因通过中间载体pJIT163定向克隆到植物表达载体pBINPLUS中(重组双元载体质粒命名为pBCP),并经冻融法导入农杆菌中,经PCR及酶切鉴定,证实质粒已被导入。利用该植物表达载体对西瓜的遗传转化工作目前正在进行中。
- 马新艳古勤生刘丽锋李宁杨民和彭斌李莉
- 关键词：CMV中国分离物外壳蛋白基因
- 液相色谱法检测果实中类胡萝卜素的流动相配方及果实中类胡萝卜素检测的HPLC方法
- 本发明涉及色谱检测领域，具体而言，提供了一种液相色谱法检测果实中类胡萝卜素的流动相配方及果实中类胡萝卜素检测的HPLC方法。所述流动相配方包括流动相A和流动相B，流动相A包括以下体积比的成分：乙腈:甲醇:二氯甲烷:正己烷...
- 康保珊古勤生刘慧刘丽锋吴会杰彭斌
- 5种病毒侵染葫芦科作物的症状观察被引量：14
- 2004年
- 对小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)、西瓜花叶病毒(WMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、番木瓜环斑病毒西瓜株系(PRSV-W)和南瓜花叶病毒(SqMV)人工接种侵染7种葫芦科作物后的症状反应进行了初步的观察和探讨,初步筛选出SqMV与南瓜(耳突)、西葫芦(锯齿状叶缘),ZYMV与西葫芦(蕨叶),丝瓜(锯齿状叶缘),CMV与丝瓜(子叶早期褪绿斑)、西葫芦(后期叶片坏死斑)等几种具有比较鉴定作用的植物与病毒的组合。
- 彭斌顾青古勤生刘丽锋李莉
- 关键词：葫芦科作物小西葫芦黄花叶病毒西瓜花叶病毒南瓜花叶病毒番木瓜环斑病毒
- 中国南瓜曲叶病毒编码的AC5基因功能分析
- 中国南瓜曲叶病毒（Squash leaf curl china virus,SLCCNV）属双生病毒科（Geminiviridae）菜豆金色花叶病毒属（Begomovirus）,是一类具有孪生颗粒形态的植物单链DNA病毒...
- 吴会杰彭斌康保珊刘丽锋刘莉铭古勤生
- 关键词：编码蛋白
- 文献传递
- 黄瓜绿斑驳花叶病毒西瓜、甜瓜种子的带毒率和传毒率被引量：30
- 2011年
- 【目的】加强种子带毒检测,防止黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)通过种子传播而导致该病害的扩散和流行。【方法】以感染CGMMV的西瓜、甜瓜病株收获的种子为材料,应用DAS-ELISA检测感染CGMMV的种子带毒率和传毒率。【结果】250粒西瓜种子全部为阳性,带毒率达100%;623株西瓜幼苗14株为阳性,传毒率为2.25%。130粒甜瓜种子122粒为阳性,带毒率达93.85%;2 050株甜瓜幼苗58株为阳性,传毒率为2.83%。灵敏度检测种子带毒量在感染种子研磨样体积与健康种子研磨样体积为1/1 000时仍检测是阳性;叶片带毒量在病叶研磨样体积与健康叶研磨样体积为1/10 000时仍检测是阳性。【结论】感染CGMMV西瓜、甜瓜种子带毒率高而传毒率相对较低,说明CGMMV主要以种子表面带毒为主。灵敏度检测表明DAS-ELISA能进行大批量的种子检测。
- 吴会杰秦碧霞陈红运彭斌蔡建和古勤生
- 关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒西瓜甜瓜
- 瓜类褪绿黄化病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备被引量：3
- 2013年
- 根据已报道的瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列设计引物,利用RT-PCR方法从感病甜瓜中扩增得到长度为753 bp的CP基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-3上,获得重组载体pGexCP,在大肠杆菌BL21菌株中诱导表达,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原,免疫家兔,制备了CCYV外壳蛋白的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,当CP蛋白浓度为2.5μg/mL时,血清效价高达5.12×105。Western blot分析表明制备的抗体检测CCYV侵染的甜瓜叶片得到特异性的条带,表明该抗体的特异性较好。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清可用于田间甜瓜病样的检测。本试验为CCYV的快速检测提供了重要的研究材料。
- 施艳袁媛孙虎古勤生刘珊珊王振跃
- 关键词：外壳蛋白基因原核表达抗血清
